青格達湖濕地野鳥中AIV和NDV監(jiān)測

文│侯群（石河子大學動物科技學院、青格達湖自然保護區(qū)管理站）馬長賓 陳文武 崔蕾 劉向鵬 吳挺（新疆生產建設兵團第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站）胡少華（青格達湖自然保護區(qū)管理站）李巖（石河子大學動物科技學院、新疆生產建設兵團畜牧獸醫(yī)工作總站）

青格達湖濕地野鳥中AIV和NDV監(jiān)測

文│侯群（石河子大學動物科技學院、青格達湖自然保護區(qū)管理站）馬長賓 陳文武 崔蕾 劉向鵬 吳挺（新疆生產建設兵團第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站）胡少華（青格達湖自然保護區(qū)管理站）李巖（石河子大學動物科技學院、新疆生產建設兵團畜牧獸醫(yī)工作總站）

新城疫和禽流感均是由病毒感染引起的家養(yǎng)和野生禽類的急性高度接觸性傳染病。野鳥尤其是野生水鳥是禽流感病毒（AIV）和新城疫病毒（NDV）的天然宿主，并在禽流感和新城疫傳播過程中起到一定作用，這些觀點已經被大多數(shù)學者認可。

青格達湖自然保護區(qū)海拔504米，位于新疆維吾爾自治區(qū)五家渠市南郊，南距烏魯木齊市32千米，東南距米泉區(qū)18千米，西南距昌吉市19千米，處于烏昌經濟帶的腹心地帶，因其對烏魯木齊市及周邊地區(qū)氣候起著重要的調節(jié)作用，被譽為“天然加濕器”和“首府之腎”。青格達湖濕地自然保護區(qū)是根據《中華人民共和國自然保護區(qū)條例》第二章第十條第二款珍稀、瀕危野生動植物物種的天然集中分布區(qū)域應當建立自然保護區(qū)的規(guī)定，于2002年12月經新疆生產建設兵團批準列入的第一個兵團范圍內省級自然保護區(qū)。

青格達湖濕地面積23.25平方千米，核心區(qū)7.96平方千米，占保護區(qū)總面積的34.24%，主要為鳥類棲息地；緩沖區(qū)位于核心區(qū)的東部，面積14.49平方千米，占保護區(qū)總面積的62.32%，主要為灌木林和旅游經營水域；試驗區(qū)位于主壩北部，面積0.8平方千米，占保護區(qū)總面積的3.44%，主要是自然及人文景觀。

青格達湖自然保護區(qū)及周邊區(qū)域鳥類約225種，分屬18目53科124屬，約占新疆鳥類種數(shù)的48%，約為全國鳥類種數(shù)的19%，可見青格達湖自然保護區(qū)及周邊區(qū)域鳥類資源相當豐富。其中，國家Ⅰ級重點保護物種5種分別是大鴇、黑鸛、金雕、玉帶海雕、白尾海雕，Ⅱ級重點保護物種38種。在青格達湖自然保護區(qū)野生鳥類的優(yōu)勢種有：大雁、鸕鶿、鷸類、紫翅椋鳥、燕類、野鴨、鷗類、黑鳶、雀類。每年的4～5月、10～11月是鳥類遷徙的主要時間。3條大的國際遷徙路線（通道）經過青格達湖自然保護區(qū)：一是西亞—中東—東非路線，二是西伯利亞—中亞—南亞路線，三是北極苔原—亞洲—大洋洲路線。這說明青格達湖自然保護區(qū)的地理位置比較獨特，是國際3大遷徙路線的一個節(jié)點，重要作用不言而喻。

青格達湖自然保護區(qū)水草豐茂，鳥類繁多，生物多樣性豐富，是國際候鳥遷徙的重要驛站，也是新疆鳥類的重要棲息地。年過鳥量達20萬只，常年棲息鳥類2萬余只。然而，對于這些野鳥，目前缺乏有效的免疫與疫病監(jiān)控措施。鑒于此，筆者對青格達湖濕地野鳥進行了禽流感和新城疫的流行病學監(jiān)測和調查，以便為有效控制或預防禽流感和新城疫提供科學依據。

一、材料與方法

1.材料。

（1）試劑。檢測禽流感、新城疫病毒抗體的血凝和血凝抑制（HA和HI）試驗診斷試劑，購自中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所。

（2）試劑盒。檢測禽流感通用型、新城疫通用型。

2.方法。

（1）樣品的采集及處理。于2014年4月至2015年3月，對青格達湖濕地保護站救治痊愈的5只野生鳥類進行了樣品采集，樣品包括野鳥的血樣和喉肛棉拭樣品。其中，蓑羽鶴（雙側翅受傷）、大麻鳽（左側翅受傷）、貓頭鷹（幼鳥）、紅嘴鷗（爪受傷）、鵜鶘（喙受傷）各1只。

（2）血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗。HA和HI試驗參照GB/T18936-2003《高致病性禽流感診斷技術》和GB/T16550-2008《新城疫診斷技術》進行。

（3）RT-PCR操作程序。按照禽流感病毒通用型RT-PCR和新城疫病毒通用型RT-PCR檢測試劑盒說明書，并參照NY/T772-2004《禽流感病毒RT-PCR試驗方法》進行。

二、結果

1.野鳥血清中AIV陽性抗體的檢測結果。經HI試驗對不同亞型AIV抗體（H5/H7）的檢測，在受檢的5種野鳥的5份血樣AIV抗體檢測結果均為陰性。

2.野鳥血清中新城疫病毒陽性抗體的檢測結果。新城疫HI抗體效價均小于4lg2，血清抗體陽性率為0，說明所檢測的野鳥血清中無新城疫病毒抗體。

3.喉肛棉拭樣品AI、新城疫病毒的檢測結果。采用RT-PCR檢測方法對野鳥的喉肛棉拭樣品進行H5和H7亞型AIV的病原學檢測，結果均為陰性；采用通用型RT-PCR試劑盒對所采集野鳥的喉肛棉拭樣品進行新城疫病毒的病原學檢測，結果均為陰性。

三、討論

1.本次通過HI和RT-PCR方法對在青格達湖濕地采集的5種野生鳥類樣品進行病毒血清抗體和病原進行檢測，檢測結果均為陰性，說明所檢測的5種野生鳥類并未攜帶禽流感和新城疫病毒。這一檢測結果與孫泉云等和成進等的檢查結果不一致，其原因可能是捕獲的野鳥為不帶毒的狀態(tài)；二是采樣的數(shù)量較少，這有待今后持續(xù)監(jiān)測分析。

2.雖然本次調查未發(fā)現(xiàn)新疆青格達湖濕地野生鳥類感染禽流感和新城疫病毒感染，但存在野生鳥類與水網密集區(qū)家禽（尤其是鴨）接觸，有可能在家禽與野禽之間的AIV、NDV循環(huán)，2013年周邊地區(qū)就發(fā)現(xiàn)了家禽AIV，因而野生鳥類在AIV、NDV流行病學和生態(tài)演化中的作用，需要持續(xù)的動態(tài)監(jiān)測和研究。

3.AIV感染的禽類宿主非常廣泛。國內外學者現(xiàn)已證實AIV的所有血凝素（HA）和神經氨酸酶（NA）亞型（H1～H16和N1～N9）和大多數(shù)HA/NA組合在野生鳥類中儲存。眾所周知，H5和H7亞型是屬于高致病性禽流感的范疇，若沒有任何癥狀或病情的野鳥攜帶高致病性AIV無疑將對本地區(qū)家禽養(yǎng)殖環(huán)境構成潛在的威脅和隱患。鑒于此，本次主要對H5和H7兩個高致病性禽流感亞型進行了流行病學調查，然而要想弄清楚本地區(qū)野生鳥類感染AIV不同HA亞型的范圍是否在不斷擴大，表明導致基因重組和置換的幾率是否也在增加，需要對本地區(qū)有關野生鳥類AIV進行持續(xù)監(jiān)測，以便獲得長期的、大量的、規(guī)律性數(shù)據。

2014年第六師五家渠市科技計劃，

課題編號：1419