Sysmex XN-9000血液分析儀檢測低值血小板的性能評價

吳 敏 文 艷 劉愛勝

Sysmex XN-9000血液分析儀檢測低值血小板的性能評價

吳 敏①文 艷②劉愛勝①

目的：評價Sysmex XN-9000全自動血液分析儀檢測全血中低值血小板(PLT)的性能。方法：隨機收集XN-9000檢測全血PLT計數＜70×109/L的臨床標本48份，分別用XN-9000和顯微鏡計數，通過對兩種方法所測得的結果進行相關性分析，評價XN-9000檢測全血中低值PLT的精密度、相關性、準確度、攜帶污染率、線性范圍以及臨床可報告范圍。結果：XN-9000檢測全血中低值PLT的批內和批間CV%分別為1.13%和1.29%；XN-9000與顯微鏡PLT計數結果具有高度相關性，回歸方程為Y=0.917X+3.217，相關系數r=0.964；XN-9000檢測全血中低值PLT的攜帶污染率為0.12%；檢測PLT的正確度(Bias%)為-1.25%～1.80%；線性范圍為(0～1206)×109/L；臨床可報告范圍為(0～6030)×109/L。結論：XN-9000血液分析儀檢測全血中低值PLT具有很高的精密度和準確度，攜帶污染率極低，結果具有可靠性，可直接應用于臨床。

XN-9000血液分析儀；低值血小板；顯微鏡檢查；性能評價

DOI∶ 10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.08.016

[First-author’s address] Clinical Laboratory, Shenzhen Longhua New District People's Hospital, Guangdong 518109, China.

Sysmex XN-9000全自動血液分析儀是Sysmex公司最新推出的XN系列產品最高端一款血細胞分析儀，其在檢測通道和試劑方面有所改變，其中增加了低值血小板(blood platelet，PLT)檢測。PLT計數專用檢測通道，主要用于低值血小板的檢測。為了解XN-9000檢測全血中低值PLT的性能，本研究對其性能進行評價。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Sysmex XN-9000全自動血液分析儀及配套試劑、校準品及質控品均購自日本Sysmex公司；CX21顯微鏡、BX50顯微鏡購自日本Olympus公司；血小板稀釋液購于上海江萊生物科技有限公司；德國Brand改良Neubauer計數板購于上海正慧工貿有限公司。

1.2 標本來源

隨機收集2014年1-8月深圳市龍華新區人民醫院門診患者標本48份，其中男性標本21份，女性標本27份；患者年齡5月～82歲，平均26.5歲。其血液常規檢測PLT計數＜70×109/L者視為低值PLT-F(按國際血液學復查規則41條定義)，真空采集靜脈血于EDTA-K2抗凝管內充分混勻送檢，確保血標本無凝集現象。同一份標本上機和顯微鏡檢測均于1 h內完成[1]。

1.3 精密度

參照(美國)全國委員會臨床實驗室(NCCLS)/ CLSI EP5-A文件[2]提供的方法，對XN-9000全自動血液分析儀檢測全血中低值PLT的精密度進行評價。待室內高、中和低值質控物檢測結果在控后，用XN-9000對低值PLT室內質控物連續檢測20次，求出低值PLT的批內精密度；同時連續測定低值PLT室內質控物20 d，求出檢測低值PLT批間精密度。

1.4 相關性分析

分別用XN-9000(X)參照NCCLS/CLSI EP15-P[3]、EP9-A[4]和顯微鏡(Y)參照《臨床檢驗操作規程》第3版[5]檢測120例低值PLT新鮮全血標本中的PLT，待室內高、中和低值質控物檢測結果在控后，操作均由經驗豐富的工作人員進行檢測，各測3次，取均值，求回歸方程及相關系數。

1.5 攜帶污染率

根據NCCLS/CLSI EP10-A文件[6]提供的方法，選取高、低值PLT新鮮全血標本，先連續測定高值標本3次(H1、H2、H3)，后連續測定低值標本3次(L1、L2、L3)。攜帶污染率(%)＝[(L1-L3)／(H3-L3)]×100[7-8]。

1.6 正確度

用XN-9000分析儀連續檢測2014年衛生部第一批室間血液質控物3次，取平均值，與衛生部回報的結果靶值比較，并計算出相對偏倚(Bias)，其計算公式1：

以評價XN-9000分析儀檢測低值PLT結果的準確性。

1.7 線性范圍

參考EP6-A2文件選取1份接近儀器檢測上限的高值PLT(1256×109/L)標本和接近儀器檢測下限的低值PLT(15×109/L)，按等比例稀釋成100%、50%、25%、6.25%、3.125%和0%。混勻后用XN-9000分析儀從低濃度到高濃度測定不同稀釋度標本，各重復測定3次，取均值與理論值比較，并進行相關性分析，評價XN-9000分析儀檢測PLT的線性范圍[9]。

1.8 臨床可報告范圍

選取PLT濃度高于檢測范圍高限的臨床標本2份(1317×109/L和1536×109/L)，用9 g/L生理鹽水對所選取樣本按1∶2，1∶3，1∶4，1∶5及1∶9的5個比例稀釋，分別為批號201411，201412，201413，201414，201415，混勻后各樣本分別測定3次，取均值計算稀釋回收率，其計算公式2：

以重復性CV值＜5.0%，回收率在90%～l10%以內為可接受，確定最大稀釋倍數，結合最大稀釋倍數確定臨床可報告范圍。

1.9 統計學方法

采用SPSS 19.0軟件進行統計處理，計量資料以均數±標準差(x-±s)表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 精密度

XN-9000分析儀檢測新鮮低值PLT全血標本批內精密度為1.17%，檢測低值PLT室內質控物批內和批間精密度(CV%)分別為1.13%和1.29%，均低于儀器設定的要求(＜5.00%)。

2.2 相關性

XN-9000分析儀檢測全血中、低值PLT與顯微鏡檢測結果具有良好的相關性(r=0.964)，回歸方程為Y=0.917X+3.217，經t檢驗，XN-9000分析儀與鏡檢檢測低值PLT結果之間差異無統計意義(t=1.07，P＞0.05)。

2.3 攜帶污染率

XN-9000分析儀檢測低值PLT的攜帶污染率為0.12%(＜1.00%)，小于儀器設定的要求。

2.4 正確度

XN-9000分析儀連續檢測衛生部血液室間質評PLT標本3次，取平均值與衛生部回報的靶值作比較，并計算Bias(%)值，Bias值均＜5.0%，見表1。

表1 XN-9000分析儀檢測PLT正確度(×109/L)

2.5 線性范圍

XN-9000分析儀對高、低值PLT標本的不同稀釋度樣品分別進行測定，各稀釋度的實測值和理論值之間相關性良好，相關系數r=0.9993，回歸方程為Y=0.9996+2.4573，檢測線性范圍為(0.00～1206)×109/L。

2.6 臨床可報告范圍

XN-9000分析儀檢測不同稀釋倍數的標本中的PLT，在1∶5時，CV均在5%以內，當稀釋倍數延伸至1∶9時，回收率超出實驗設定范圍，所以其最大稀釋倍數為9倍。因此，本實驗室XN-9000分析儀檢測PLT臨床可報告范圍為(0～6030)×109/L，見表2。

表2 PLT回收率(%)

3 討論

XN-9000分析儀是Sysmex公司最新推出最高端一款血細胞分析儀，其在檢測通道和試劑方面有所改變，增加了低值PLT計數專用檢測通道，主要用于低值血小板的檢測。

良好的精密度是驗證其他各項指標的基礎，其大小應小于儀器規定的要求才能保證臨床標本檢測的重現性[10]。本研究結果顯示，XN-9000分析儀檢測低值PLT批內和批間精密度分別為1.13%和1.29%，均低于儀器設定的要求(5%)，并且XN-9000分析儀檢測低值PLT與顯微鏡人工PLT計數具有很高的相關性(r=0.981)，兩者結果差異無統計學意義，其原因為Sysmex XN-9000全自動血液分析儀采用液壓聚焦法(DC檢測法)和半導體激光器的流式細胞計數法對細胞計數，可以防止區域的血細胞回流，并可防止產生假性血小板脈沖，且計數細胞數量是其他系列的3～5倍之多，改善了血細胞計數的精確度和重現性。

攜帶污染率是判斷高值標本是否影響低值標本檢測結果的指標，其大小應符合儀器制造商的要求。本研究結果顯示，XN-9000分析儀檢測PLT標本攜帶污染率極低(0.12%)，這主要與XN-9000分析儀血細胞計數時由于血細胞通過在一條直線上的小孔，可減少對貫流池的污染，降低細胞計數標本之間的攜帶污染率等有關。

XN-9000分析儀檢測衛生部室間低值血小板質控物(PLT-F)的Bias%值為-1.25～1.80，均＜5.0%，XN-9000分析儀檢測低值PLT的正確度極高，這主要與其采用最新的熒光染色技術(PLT-O)。熒光染色技術(PLT-O)使用專用的熒光染液，該染液選擇性染色血小板，網織紅細胞難以染色，且不易受到紅細胞碎片的影響及儀器增加了低值WBC及低值PLT專用檢測通道，進一步確保了低值PLT檢測結果的準確性等因素有關。

線性范圍的驗證是確定臨床可報告范圍的基礎，當儀器檢測超出線性范圍的結果時，應視為不準確的測定值[11-15]。本研究結果顯示，XN-9000分析儀檢測血小板的線性范圍廣(0.00～1206)×109/L及臨床可報告范圍寬(0～6030)×109/L，有利于高值PLT檢出的準確性，這主要與PLT-F通道中的PLT計數是XE系列產品的3～5倍之多，極大地提高了PLT檢測的精密度和準確性等因素有關。

4 結語

PLT-F通道在全血模式、低值白細胞模式及稀釋模式均可檢測，標本檢測前只要按照國際血液學復檢規則41條及XN-9000分析儀本身要求，復檢規則中設定好只要違反PLT復檢規則就進行PLT-F通道檢測PLT，其操作非常簡單，臨床工作中只需根據臨床需要修改復檢規則便可與血常規一同檢查，并得出準確可靠的PLT結果，而且XN-9000分析儀檢測PLT的線性范圍和臨床可報告范圍很廣，適用各種濃度標本的檢測。

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Blood analyzer Sysmex XN-9000 testing in low whole blood platelet performance evaluation

WU Min, WEN Yan, LIU Ai-sheng
China Medical Equipment,2015,12(8)∶51-53.

Objective∶ To evaluate the performance of Sysmex XN-9000 automatic blood analyzer (hereinafter referred to as XN-9000) in whole blood with the low platelet (PLT). Methods∶ A total of 48 whole blood samples with platelet count less than 70×109/L were randomly collected from XN-9000 correlation analysis to evaluate XN-9000 the accuracy and precision of detection in low whole blood PLT and carry pollution rate, use XN-9000 and microscope count, respectively. Results∶ XN-9000 detection in low whole blood PLT between batch and batch of CV% 1.13% and 1.29%, respectively; XN-9000 with microscope PLT count results have high correlation, The regression equation for Y=0.917X+3.217,correlation coefficient r=0.964; XN-9000 detection in low whole blood PLT carry pollution at a rate of 0.12%. Detection accuracy of PLT Bias, %(-1.25%～1.8%); Linear range(0～1206)×109/L; Clinical reportable range (0～6030)×109/L. Conclusion∶ The detection of XN-9000 blood analyzer is in low whole blood PLT has high precision and accuracy, carry pollution rate is extremely low, the result has the reliability, can be directly applied to clinical.

XN-9000 blood analyzer; Low platelet; Microscopic examination; Performance evaluation

1672-8270(2015)08-0051-03

R446.111

A

吳敏,女,(1981- ),本科學歷,主管技師。深圳市龍華新區人民醫院檢驗科，從事臨床檢驗與免疫工作。

2014-12-25

①深圳市龍華新區人民醫院檢驗科 廣東 深圳 518109

②深圳市光明新區人民醫院ICU 廣東 深圳 518106