豬O型口蹄疫疫苗免疫效果對比觀察

楊本宋（福建省大田縣畜牧獸醫水產局 366110）

豬O型口蹄疫疫苗免疫效果對比觀察

楊本宋（福建省大田縣畜牧獸醫水產局 366110）

某規模豬場選擇80頭，分兩組，每組40頭，分別免疫豬0型口蹄疫合成肽疫苗和豬0型口蹄疫滅活疫苗，采用正向間接血凝試驗、vp1結構蛋白抗體ELISA檢測首免后21d、28d及二次免疫后14d、91d抗體水平，同時，對接種疫苗的試驗豬進行免疫應激觀察，結果顯示：注射豬0型口蹄疫合成肽疫苗的試驗豬未出現不良反應，兩種疫苗抗體檢測比較表明：豬0型口蹄疫合成肽疫苗臨床使用的安全性較高，免疫抗體合格率明顯優于豬0型口蹄疫滅活疫苗。

豬；口蹄疫；疫苗；免疫效果；觀察試驗

口蹄疫（Foot and mouth disease，FMD）FMD是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的，FMDV屬于小RNA病毒科，口蹄疫病毒屬，病毒顆粒無囊膜，極易發生變異，血清型多，目前共存在O、A、C，亞洲1型，以及南非1、2、3共7個血清型，不同血清型間沒有交叉保護，同一血清型又存在不同亞型，亞型之間的交叉保護差異巨大。口蹄疫病毒的抵抗力極強，由口蹄疫病毒引起的以偶蹄動物為主的急性、熱性、高度接觸性傳染病，其特征是在口、舌、唇、鼻，蹄，乳房發生水泡，并潰爛形成斑。該病具有傳播速度快而廣，發病急、危害大等流行病行特點[1]，世界動物衛生組織（OIE）將其列為一類傳染病，口蹄疫目前沒有藥物治療，我國采用撲殺和免疫控制，疫苗免疫是目前防治口蹄疫發生和蔓延的最有效和經濟的主要措施之一，當前防疫使用的疫苗主要有口蹄疫合成肽疫苗和口蹄疫滅活疫苗，為了解掌握其臨床應用效果，為制定科學的免疫程序，筆者進行豬O型口蹄疫合成肽疫苗和滅活疫苗免疫效果對比試驗。

本試驗選擇某規模場30～40日齡商品豬，分兩組分別免疫豬0型口蹄疫合成肽疫苗和豬0型口蹄疫滅活疫苗進行免疫試驗，通過觀察試驗豬免疫后臨床反應和首免21d、28d及二免后14d、91d抗體水平進行比較，現將試驗報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選擇某規模場30～40日齡商品豬80頭。

1.2 疫苗

豬0型口蹄疫合成肽疫苗（批號：1409004）和豬0型口蹄疫滅活疫苗（批號：1410001）兩種疫苗均是中牧實業股份有限公司蘭州生物藥廠生產。

1.3 檢測試劑

口蹄疫0型正向間接血凝試驗診斷液，中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產，批號：20150324201豬0型口蹄疫vp1抗體檢測試劑，上海優耐特生物醫藥有限公司生產，批號：201408008。

1.4 方法

1.4.1 分組

80頭豬分為兩組（A組和B組）每組40頭，A組接種豬0型口蹄疫滅活疫苗，B組接種豬0型口蹄疫合成肽疫苗。

1.4.2 免疫劑量

按照說明書的免疫劑量對試驗豬進行免疫接種。豬0型口蹄疫滅活疫苗注射1ml，豬0型口蹄疫合成肽疫苗注射1ml。

1.4.3 應激反應判定標準

豬免疫后的1周內，每天對注射家畜進行臨床觀察，凡出現注射部位腫脹，體溫升高、食欲減退或厭食、嘔吐等癥狀的均判定為家畜應激反應。如果家畜應激反應嚴重的，采用腎上腺素或地塞米松脫敏進行治療，同時做好家畜應激反應情況記錄。

1.4.4 樣品采集

家畜首免后21d、28d及二次免疫后14d、91d采血檢測。

1.4.5 免疫抗體檢測判定標準

按照GB18935-2003口蹄疫診斷技術，正向間接血凝試驗，抗體效價大于或者等于1：32判定為合格；vp1結構蛋白抗體ELISA抗體效價OD值大于或者等于（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，判定為合格。

2 結果

2.1 對免疫接種的豬3d進行觀察和登記結果

A組有3頭豬輕度應激反應，主要表現豬第1d第2d為采食量有所下降，體溫39.1～39.6之間波動，第3d恢復正常，有1頭豬注射部位腫脹，未出現死亡，B組未發現任何不良反應。

2.2 首免21d后抗體檢測結果

由表1可見，A組40份血清有19份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率47.5%，B組40份血清有32份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率80%。

表1 首免21d后抗體檢測結果

2.3 首免28d后抗體檢測結果

由表2可見，A組40份血清有27份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率67.5%，B組40份血清有37份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率92.5%。

表2 首免28d后抗體檢測結果

2.4 二免14d后抗體檢測結果

由表3可見，A組40份血清有35份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率87.5%，B組40份血清有39份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率97.5%。

2.5 二免91d后抗體檢測結果

由表4可見，A組40份血清有30份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率75%，B組40份血清有39份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率97.5%。

3 討論

（1）從疫苗免疫后臨床應激反應的觀察對比，接種合成肽疫苗的豬精神狀態良好，未出現體溫升高，食欲下降，呼吸困難等不良反應的癥狀，而接種的滅活疫苗的豬有3頭出現輕度應激反應，主要表現為體溫升高，食欲下降，局部腫脹等不良反應的癥狀。臨床上出現應激反應主要是由于滅活疫苗中含有大量異體蛋白，對致敏因子引起變態反應，而合成肽疫苗采用人工多肽合成技術，是一種單一抗原，不存在異體蛋白，能有效地避免異體蛋白引起不良應激反應[2]，由該次試驗臨床觀察來看，口蹄疫合成肽疫苗具有良好的生物安全性，不易產生過敏反應。

表3 二免14d后抗體檢測結果

表4 二免91d后抗體檢測結果

（2）從豬血清抗體檢測結果對比，A組首免21d和28d后抗體合格率分別為47.5%和67.5%均達不到農業部規定的抗體合格率70%的要求，B組首免21d和28d后抗體合格率分別為80%和92.5%均達農業部規定的抗體合格率70%，說明口蹄疫合成肽疫苗比口蹄疫滅活疫苗效價好，A組二免后14d抗體合格率分別為87.5%，B組二免后14d抗體合格率分別為97.5%，從而表現口蹄疫合成肽疫苗合格率明顯高于口蹄疫滅活疫苗合格率。A組二免后91d抗體合格率分別為75%，B組二免后91d抗體合格率分別為97.5%，B組抗體水平一直維持在一個較高的陽性值范圍內，說明豬口蹄疫合成肽疫苗免疫抗體持續期長。

（3）綜上兩種豬O型口蹄疫疫苗免疫效果對比，說明豬口蹄疫合成肽疫苗高效、安全、副反應小、抗體持續期長，是目前預防豬O型口蹄疫的理想疫苗。

[1]田召芳，張文娟，陳蕾，等.口蹄疫疫苗免疫效果跟蹤試驗報告[J].中國動物檢疫，2011（7）：46-47.

[2]王江輝.豬口蹄疫新型合成肽疫苗的優點及研制現狀[J].河南畜牧獸醫（綜合版），2007（10）：8-9.