一例高致病性豬藍耳病和豬瘟混合感染的診斷

韓俊偉（河南省新鄉市動物衛生監督所 453000）

杜海燕（河南省新鄉市動物疫病預防控制中心 453000）

一例高致病性豬藍耳病和豬瘟混合感染的診斷

韓俊偉（河南省新鄉市動物衛生監督所 453000）

杜海燕（河南省新鄉市動物疫病預防控制中心 453000）

某規模化豬場存欄生豬519頭，其中公豬5頭，母豬280頭，后備母豬134頭，斷奶仔豬100頭，養殖方式為自繁自養，主要從事仔豬生產銷售。免疫方面，該豬場按春秋兩防給豬群進行免疫，接種豬瘟弱毒疫苗，并對即將出售的60日齡仔豬接種豬瘟疫苗一次。2014年12月5日，豬群開始發病，病情不斷發展變化。12月26日，實驗室收到該豬場送檢的20～50日齡病死仔豬3頭，對發病原因進行檢測診斷。

1 流行病學調查

豬群發病后，有130頭妊娠母豬發生流產，死胎現象，初產或經產母豬均出現繁殖障礙癥狀，流產率達到46.4%；哺乳仔豬曾有黃、白痢的流行病史，斷奶后發病的仔豬體溫升高，伴隨呼吸道癥狀，肢體末端，包括耳朵，吻突，四肢，尾部皮膚發紫。截至送檢時，該豬場共死亡成年母豬4頭、仔豬120頭，死亡率達到23.89%。

2 剖檢病變

肺臟表面可見大小不等的出血點或出血斑，肺膈葉觀察到暗紅色的突變區（3/3）；肺表面出現纖維素性滲出物，肺與胸壁或膈肌相粘連（2/3）；胃底腺體區觀察到彌漫性出血病變；包皮積尿，擠壓后流出茶黃色的尿液，膀胱粘膜可見針尖大小的出血點；盲腸粘膜、回盲瓣區域出現同心圓狀的紐扣狀潰瘍；腎包膜下可見少量的出血點（1/3）；腹股溝淋巴結、肺門淋巴結、腸系膜淋巴結水腫，切面多汁，部分病例觀察到大理石花紋狀的出血病變，參看圖1、圖2、圖3。

3 實驗室檢測

3.1 RAN提取

分別取3頭病死豬的肺、淋巴結研磨組織勻漿液，8000rpm離心10min，取上清液采用離心柱提取法提取病料總RNA樣本。

圖1 胃底腺體區彌漫性出血

圖2 回盲區域紐扣狀潰瘍

圖3 肺門淋巴結腫大

3.2 豬瘟病毒核酸檢測

采用廣州維伯鑫生物科技有限公司的豬瘟病毒核酸檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）對待檢病料進行豬瘟病毒RNA體外擴增檢測。結果見圖4。

圖4 豬瘟病毒核酸RT-PCR熒光探針法檢測結果

結果判斷：（1）陽性：檢測樣本Ct值小于等于35.0，且曲線有明顯的指數增長期；（2）檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復一次試驗，如果Ct值仍小于40.0，且曲線有明顯的指數增長期，為陽性，否則為陰性；（3）陰性：檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。

陽性對照Ct值為13.85；樣本1的Ct值為15.72；樣本2的Ct值為19.16，樣本3未檢測到Ct值。結果表明3頭送檢病死豬的豬瘟病毒核酸檢出率達66.67%（2/3），病死豬群存在豬瘟病毒的感染。

3.3 豬藍耳病病原核酸檢測

采用針對藍耳病病毒非結構蛋白Nsp2基因的引物對病料RNA樣本進行RT-PCR擴增，結果見圖5。

結果表明，從3頭送檢病死豬的肺和淋巴結樣本均擴增出1064bp的DNA帶，藍耳病病原核酸檢出率達到100%（3/3）。可知該豬場存在豬藍耳病的感染。

圖5 豬藍耳病病原核酸檢測結果

4 結論與建議

根據診斷結果，對死亡豬組織檢測出豬瘟病毒和豬藍耳病病毒核酸陽性，說明該豬場20～50日齡斷奶仔豬出現豬瘟與藍耳病混合感染。高致病性藍耳病是引起母豬繁殖障礙和仔豬死亡的罪魁禍首，豬瘟混合感染是次發的病因。發病的仔豬曾經接種豬瘟弱毒疫苗，可能是由于豬場存在管理上的漏洞等問題，單獨使用了一些不正規廠家生產的疫苗，且免疫的方法和劑量不當，致使豬群沒能產生應有的保護力。

防治動物疫病應采取綜合性措施，即加強預防接種，搞好飼養管理，加強檢疫和防疫，做好豬場衛生和消毒工作。建議對斷奶仔豬群進行豬瘟弱毒活疫苗緊急免疫接種，3～5d以后再接種藍耳病滅活疫苗。結合豬場實際，科學制定免疫程序，豬瘟免疫程序不能按春秋兩防季節性預防接種，應20日齡豬瘟弱毒活疫苗首次免疫；50日齡加強免疫一次（2頭份）；以后每4～6個月接種一次豬瘟疫苗。藍耳病預防接種可以先免疫發病豬群，再接種正常豬群。配種前20d，臨產前30d母豬各接種1次（4頭份）。此外，豬場還應注意疫苗質量、接種方式和途徑，確保免疫質量。目前，豬群不要急于配種，應錯開1～2個發情期，待豬群恢復健康以后再配種。