酶抑制法速測技術在農藥殘留檢測中的應用

楊靜++王歡++謝偉強++劉麗萍

摘要 介紹了農藥殘留速測技術，重點介紹了酶抑制法速測技術以及其所依據的速測方法標準，并對基于酶抑制法的農藥殘留快速檢測技術在檢測過程中的注意事項作了闡述，以期為今后的農殘速測提供了參考依據。

關鍵詞 農藥殘留；速測技術；酶抑制法；速測儀

中圖分類號 S481.8；TS207.53 文獻標識碼 B 文章編號 1007-5739（2015）17-0161-01

農產品質量安全逐漸成為社會關注的熱點問題，由于我國農產品市場為 “小農戶、大市場”的生產銷售模式，要求農產品的殘留檢驗結果必須在較短時間內準確完成，但是采用傳統的實驗室定量檢測往往不能滿足這一要求。因此，發展高效、快速的農藥殘留檢測技術是解決這個問題的最好途徑。

1 農藥殘留速測技術

現有的農藥大致可分為氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、有機氯類、有機磷類等。由于農藥的品種繁多、化學結構復雜，給農藥殘留檢測技術提出了更高的要求。農藥殘留速測技術可分為生物檢測、化學檢測和生化檢測三大類，目前研究較多的有生物傳感器法、酶抑制法、儀器分析法、活體檢測法等。其中，酶抑制法是相對成熟的一種對特定農藥進行殘留速測的技術，也是目前使用最為廣泛的農藥殘留速測技術。

2 酶抑制法速測技術

酶抑制法的工作原理是基于有機磷及氨基甲酸酯可特異性地抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中乙酰膽堿酶（AchE）的活性的原理，在乙酰膽堿酶及乙酰膽堿共存的體系下，加入待測農產品提取液和指示劑，根據反應體系中乙酰膽堿酶活性受到抑制的情況（由指示劑指示），判斷出產品中有機磷和氨基甲酸酯類農藥是否超標。該法適用于有機磷和氨基甲酸酯類農藥的檢測。

3 酶抑制法所依據的農藥殘留快速檢測方法標準

目前，農藥殘留檢測不同速測方法均制定成相關的國家標準或行業標準，儀器設備也都是基于這些標準開發，其原理和操作要點可按標準要求執行，在此不作重復，為了方便使用，下面列出現有的農藥殘留速測國家標準方法供選用參考。NY/T 448《蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘毒快速檢測方法》、GB/T 18625《茶葉中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的簡易檢驗方法——酶抑制法》、GB/T 18630《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的簡易檢驗方法——酶抑制法》、GB/T 5009.199《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》。

4 基于酶抑制法開發的農藥殘留速測儀器

國內一些儀器生產企業以相關國標為基礎建立檢測方法，并生產了速測儀器進行推廣應用，例如上海博納新技術研究所生產的CL-BⅢ殘留農藥測定儀、深圳市安鑫寶科技發展有限公司生產的WT-R01智能數碼型農殘速測儀等。

5 農藥殘留快速檢測儀檢測過程注意事項

5.1 試劑保存與配制

按照使用說明的要求，緩沖液和顯色劑可在室溫下進行保存，酶試劑和底物要求在0～4 ℃下進行冷藏保存；底物和凍干酶粉用緩沖液進行配制，顯色劑和緩沖液用純凈水或蒸餾水稀釋，稀釋時應注意各種試劑對應的稀釋液，同時注意用量[1]。試劑切勿冷凍至結冰，使用前搖勻，用一瓶取一瓶，防止其他物質的污染。并且遵循“只出不進”的原則，每次檢測時，吸出的試劑不管使用與否都不能放回試劑瓶中。所有用于轉移試劑或樣品的器具都要專用并貼上標識[2]。

5.2 培養溫度與時間

在關于培養溫度與時間的問題上，關鍵要保證樣品測試與對照測試保持相同的條件，檢測結果才有一致性。不同廠家生產的酶因靈敏度和穩定性不同，其對培養溫度要求也有所不同，另外培養時間也不同[3]。

5.3 樣品處理

對于一些葉綠素較高的蔬菜，為減少色素的干擾，可采取整株浸提的方法。有些農作物會產生對酶有影響的植物次生物，這些次生物容易導致檢測結果呈假陽性，比如蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、蘑菇、茭白及番茄等，處理這類樣品時，可采用整株浸提或采用表面測定法[4]。待測樣品大小為1 cm×1 cm比較適宜，太大或太小都會影響提取。另外，由于同一樣品不同部位農藥含量也不同，因此如果采用重復性檢測時，最好為同一待測液，否則可能出現重復性不好的情況[5]。

5.4 樣品提取

對樣品進行振蕩提取時，可采用振蕩器，如果手動振搖，盡量注意幅度不要大，以免影響結果。

5.5 儀器操作

在檢測的過程中，操作的速度應盡量快，即加入底物和上機測試的時間一定要快，且底物的量要一致，否則也會帶來誤差。

5.6 結果判斷

抑制率在40%～50%之間的樣品為可疑超標樣，>50%為超標樣，≥40%的樣品需重復檢驗2次以上，超標樣品應用氣相色譜儀或液相色譜儀進行精確定量檢測確認。

6 結語

就目前發展來看，農產品安全檢測要體現快速和準確，因為農產品在生產、運輸及銷售的各個環節，都可能受到污染，都需要控制安全質量，以上介紹的檢測技術已經廣泛在我國食用農產品生產流通領域、質量監督檢驗部門和科研院所使用，是農產品質量安全監管一項重要的內容。文章所提出的關于速測技術中的一些注意事項，可以作為農產品快速檢驗的重要依據，有助于相關部門農藥殘留檢測工作的順利開展。

7 參考文獻

[1] 馬愛國.農產品質量安全檢測技術實務[M].北京：中國農業出版社，2011.

[2] 王曉飛，周啟星.蔬菜中農藥殘留檢測技術研究進展[J].生態科學，2004，23（4）：356-361.

[3] 紀淑娟，趙麗麗.快速檢測果菜類蔬菜有機磷農藥殘留結果分析[J].沈陽農業大學學報，2002，33（1）：14-16.

[4] 李艷莉.蔬菜中有機磷與氨基甲酸酯類農藥殘留酶抑制法快速檢測技術[J].現代農業科技，2015（11）：148.

[5] 劉豐茂.農藥質量與殘留實用檢測技術[M].北京：化學工業出版社，2011.endprint