◆安英 趙麗晶 沈楠 陳雪 徐博
作者:安英、陳雪、徐博,吉林醫藥學院基礎醫學院講師;趙麗晶、沈楠,吉林醫藥學院基礎醫學院副教授,研究方向為醫學機能學(132013)。
鉀離子是參與機體正常物質代謝活動的重要陽離子之一,它可以維持細胞新陳代謝,保持細胞靜息膜電位,參與動作電位的形成,調節細胞內外的滲透壓和酸堿平衡。高鉀血癥及救治實驗中判定高鉀血癥模型成功的診斷標準是高鉀血癥典型心電圖的變化和血清鉀離子濃度的測定,其中血清鉀離子濃度的測定是直接診斷標準[1]。正常人血清鉀離子濃度正常值為3.5 ~5.5 mmol/L,而家兔血清鉀離子濃度正常值為2.7 ~5.1 mmol/L,當血清鉀離子濃度大于5.1 mmol/L 時,說明模型復制成功。吉林醫藥學院從2010年開始使用電解質分析儀,使髙鉀實驗由簡單的測定心電圖到結合血清鉀離子濃度測定,大大提高了實驗教學的深度與廣度。
家兔稱重后,用20%氨基甲酸乙酯溶液5 ml/kg,耳緣靜脈緩慢注入,麻醉后不撥出頭皮針,直接連接輸液裝置輸入生理鹽水,維持靜脈滴數,保持靜脈通道通暢,方便繼續給藥復制模型。家兔仰臥位固定于兔手術臺上,分離頸總動脈遠心端并結扎,用動脈夾將頸總動脈近心端夾住,在結扎點處與動脈夾之間穿入備用細線。在靠近結扎處的稍下方用眼科剪剪一個與血管呈45°角的向心切口,將動脈插管(管內充滿1%肝素生理鹽水)由切口向心臟方向插入動脈內,備用細線結扎,并將余線固定在動脈插管上,防止動脈插管滑脫。
取正常血液松開動脈夾,取正常血1.5 ml(用EP 管接血時先放掉管內的肝素)。
取高鉀血癥模型制備后血液4%氯化鉀緩慢滴注靜脈,給藥速度確定為15 ~20 滴/min。如果靜滴速度過快,導致短期內鉀離子在兔體內大量快速蓄積,家兔死亡[2]。實驗過程中觀察心電圖的波形,當出現P 波低平增寬,QRS 波群壓低變寬和高尖T 波時,描記心電圖的同時取血1.5 ml,取血時也需要排掉管內的殘余血。
取高鉀血癥救治后血液治療高鉀血癥時為降低血鉀濃度,可采用靜推5%碳酸氫鈉,10%~25%葡萄糖胰島素溶液,10%葡萄糖酸鈣或10%氯化鈣靜脈注射,采用利尿藥等排出多余的鉀離子。學生可任意選擇搶救藥品,經搶救心電圖逐漸恢復正常后,再次取血1.5 ml。
取3 管血后,用高速離心機離心10 min。離心后將血清分別轉移入新的EP 管中,用電解質分析儀測量血清鉀離子濃度。
本實驗室使用的是AFT-500AU 型電解質分析儀,由深圳梅州康立高科技有限公司生產。利用離子選擇電極技術檢測電解質儀器中的一種,可對血清、血漿、全血、腦脊液、尿液等體液中的鉀離子、鈉離子、氯離子、鈣離子等檢測含量。
電解質分析儀操作步驟
1)儀器開機自檢完后進入主菜單,在數字鍵盤區中按2 鍵,開始自動定AB 標。按1 鍵,定A 標。
2)在數字鍵盤區中按8鍵(設置鍵),設置中選擇7鍵(打印鍵)開啟打印,選擇YES 鍵確認。
3)退出設置后在數字鍵盤區中按5 鍵(急診鍵),進入手動測樣。按照儀器提示,掀起吸樣針,將裝有血清的EP 管放到吸樣針下方,按YES 鍵吸樣。
4)儀器自動吸樣后,吸樣針頭用木漿紙擦拭干凈,再按儀器提示,壓下吸樣針,開始自動測樣。測樣完成后打印出血清鉀離子檢測結果單。按NO 鍵退出測試程序。
5)連續測完樣品后,按3 鍵清洗1 ~2 次。全部測定后對電解質分析儀進行去蛋白調理。
電解質分析儀使用優點自動定標,全自動檢測,大大提高了檢測血清鉀離子濃度的效率;采用一次性試劑包,杜絕試劑污染,方便試劑更換;全天24 h 待機,大大方便檢測實驗期班多、學時比較多的高鉀血癥及救治實驗。測試速度快,30 s 即可完成一個測試,血清用量最少僅需65 μl,根據需要靈活選擇鉀離子、鈉離子、氯離子、鈣離子及pH的任一組合。并且具有自動進樣盤、有手動進樣和自動進樣可供選擇。總體來說,AFT-500AU 電解質分析儀值得在高鉀血癥及救治實驗中推廣應用。
電解質分析儀使用中的常見問題處理任何一臺儀器要正常使用,與儀器的維護保養是分不開的,只有認真做好保養,才能保證所出結果能為實驗教學使用。在開設高鉀血癥及救治實驗課期間,儀器是每天24 h 開機,儀器的維護保養就顯得很重要。
1)堵塞。最常遇到的問題也就是堵塞現象,因為在分離標本血清時有些標本分離不是很完全,取血清時就會混有少量的纖維蛋白原和紅細胞,而形成堵塞。清理堵塞時,加樣針可用洗耳球吹或用細金屬絲慢慢通,再用蒸餾水沖洗進樣針或管道[3]。為避免此類故障,每50份標本進行去蛋白和自動清洗進樣針。
2)定標故障。儀器定標不通過或斜率異常,此時進行電極的調理和去蛋白處理,查看電極和參比電極內充液有無減少、變色、渾濁等現象,電極金屬頭有無污染[4],根據電極毫伏數的偏移程度判斷電極性能是否下降或老化,并及時更換。
3)更換打印紙。儀器的打印機是安裝在頂部的一個小型打印機,在更換打印紙的過程中,不要用力去抽打印紙,而是把打印紙一端剪成三角形放在進紙口處,按一下旁邊的SEL 鍵綠燈熄滅,再按一下LF 鍵,打印機就會自動走紙。當紙走到位后再按一下SEL 鍵就會停止走紙。
吉林醫藥學院在臨床本科班、檢驗本科班、預防本科班及影像本科班等本科班中廣泛使用AFT-500AU 電解質分析儀,用于高鉀血癥及救治實驗中檢測血清鉀離子濃度。儀器的使用不僅可以提高鉀離子的濃度測定速度,縮短實驗操作時間,而且相比于其他方法,準確性和穩定性更高。同時,學生沒有將有限的實驗時間花費在鉀離子的測定方法上,可以將更多的精力放在對實驗結果的分析和討論中,以及對高鉀狀態下的動物癥狀觀察和數據分析上,使得實驗內容的深度和廣度得到提升,課堂效率得到提高。此外,學生可以切身體會到臨床電解質測定的具體方法,有助于臨床診斷和治療思維模式的建立,不僅對臨床專業的學生,對其他專業學生也具有很好的促進理解的作用。
在家兔高鉀血癥及救治實驗過程中不僅提高了學生對有關鉀離子的理論知識的掌握[5],對學生更深入地理解心肌細胞電生理特性都有很大的幫助。同時,學生在實驗過程中很直觀地感受到自己制備的家兔高鉀血癥模型制備及解救成功的喜悅,有助于對學生人文精神的培養,使教學得到較好的效果。因此,在高鉀血癥及救治實驗中使用電解質分析儀,對實驗本身以及對學生各方面能力的培養和提高都起到非常積極的作用。
[1]趙麗晶,安英,陳雪,等.機能實驗中高鉀血癥及搶救實驗的改進與完善[J].中國西部科技,2015,14(4):80.
[2]金會艷,朱智勇,呂樂春.家兔高鉀血癥綜合實驗中常見問題分析[J].實驗科學與技術,2009,7(1):68-70.
[3]程蓮花.AFT-500 型電解質分析儀簡易故障維修[J].內蒙古中醫藥,2012,31(15):88.
[4]陳明,馮雪敏.AFT-500D 型電解質分析儀常見故障的分析與排除方法[J].中國社區醫師,2006(3):66.
[5]董曉青,李娜,李金蓮,等.家兔機能學心電綜合性實驗教學初探[J].南方醫學教育,2015(1):47-48.