化學發光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應用

范紅松

【摘要】目的探討化學發光免疫法（CLIA法）應用于檢測梅毒螺旋體抗體（TPA）的臨床價值。方法隨機選取2014年12月一2015年1月間的100例健康人為對照，將300例TPA陽性患者作為研究對象，分別進行TPPA和TRUST檢測和CLIA法檢測，以cv、靈敏度等為指標，評價CLIA法的臨床應用價值。結果①組內、組間在不同TPA濃度下的CV均<10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（I/80），差異有統計學義（P<0.05）。②CLIA、TPPA檢測的陽性率分別為87.7%（264/300）、86.3%（250/300），差異無統計學意義（P>0.05），但均高于TRUST法42.3%（127/300）（P<0.05）。其中陰性組患者血清檢測的陰性率均為100%。結論CLIA法檢測TPA的結果準確率高，CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在十擾和限制、攜帶污染率低，值得推廣應用。

【關鍵詞】化學發光免疫測定法；梅毒螺旋體抗體；臨床應用

【中圖分類號】R446.6

[文獻標識碼】A

【文章編號】1674-0742（2015）08（a）-0072-02

梅毒螺旋體（TP）是梅毒病的常見致病因素之一，其臨床表現復雜、具有傳播性和全身性，很容易誤診、漏診，嚴重者可致全身的病變、損害等。據相關的調查結果顯示，從2006年至今，梅毒發病率呈現明顯的上升趨勢，檢測患者血清中的TPA是其目前診斷方法的主要根據之一。因此，怎樣才能對患者進行有效的、準確的、迅速的檢測有著十分重要的臨床意義，CLIA的研究能夠為診斷梅毒病提供可靠的檢測依據，以保證盡早治療，具有靈敏度高、特異性強的特點。該研究選取2014年12月-2015年1月間該院收治的400例患者為研究對象，對比分析了使用CLIA檢測和其他方法檢測的結果，得到較滿意結果，現將其總結果匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究中研究對象共400例：陽性患者共300例，均是于2014年12月-2015年1月來該院就診的，且符合梅毒診斷標準，另外陰性對照患者共100例。其中，年齡8-20歲37例，21-30歲96例，31-40歲245例，41-50歲22例，平均年齡（38±1.8）歲。陽性患者組男、女患者分別有219例、181例。陰性患者組男、女患者分別有67例、33例。

人選標準：年齡在8-50歲之間；自愿作為試驗對象者。臨床診斷明確者。

排除標準：需要維持服用精神類安定藥、鎮靜藥的患者以及心臟、肝、腎功能有損害者；患有其他重癥疾病者。

1.2 方法

①采集本試驗中所有研究對象的血清（空腹狀態下）、留樣。②將留取的血清標本置于備好的真空促凝管內，分離血清，低溫冷藏（4-8℃）。③檢測：用CLIA（試劑盒，12000型，雅培，美國）、TPPA（試劑盒，日本）、TRUST（試劑盒，中國）方法參照其各白說明書進行檢測。④重復性實驗：取s/c0（吸光度/lia界值）24（高）、3（中）、0.05（低）的三個水平，對組內及組間分別在連續的2h和20d內進行TPA標準品的CLIA檢測5次、2次。計算其靈敏度。⑤檢測攜帶污染率：參照國際標準，使用富士G1200CLIA分析儀對TPA的高、低值標準品進行檢測，各連續、平行三次得h_{1、h2、h3、l1、l2、l3值。⑥十擾試驗：將十擾物（膽紅素、三酰甘油、血紅蛋白）加入到不同TPA濃度的患者血清中，以富士（；1200CLIA分析儀進行檢測，記錄、計算。⑦在CLIA檢測后，對陽性組、陰性組患者分別進行TPPA、TRUST檢測，對比3種方法的結果，進行分析。}

1.3 觀察指標

①以變異系數（cv）為觀察指標評價儀器重復性。②以攜帶污染率為指標評價其儀器攜帶污染情況。攜帶污染率=（l_{1-l3）/（h3-l3）×100%。}

1.4 統計學方法

應用SPSS17.0軟件進行數據分析，對計數資料采用x?檢驗進行統計處理，分析數據結果，差異有統計學意義（P<0.05）。

2 結果

2.1 組內、組間重復性和靈敏度實驗結果

經重復性實驗，組內、組間在不同TPA濃度下的cv分別為6.72、8.31、8.51和6.69、8.44、8.49，均<10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差異有統計學意義（X?=6.442，P<0.05）。

2.2 干擾實驗、攜帶污染率結果

經CLIA分析儀檢測的TPA攜帶污染率為0.14%，且十擾物加入前后測得的結果差異為3.21%（S/CO）。

2.3.3 種方法檢測結果對比

CLIA、TPPA、TRUST法的陽性率分別為87.7%（264/300）、86.3%（250/300）、42.3%（127/300），前兩者差異無統計學意義（X?=0.768，P>0.05），但均高于TRUST法（X?=45.300，X?=42.169，P<0.05）。其陰性組患者血清檢測的陰性率均為100%。

3 討論

目前，在世界范圍內梅毒發病率已經逐年上升，其嚴重危害著人類的健康生活。因此，各種診斷方法也不斷發展、應用，但早期的、有效的診斷方法尚不完善，有待于進一步研究，它們各有各的優勢和缺點，隨著現代醫學、科研與科技的不斷發展和進步，人們更加傾向于特異性強、準確、有效的TPA檢驗方法。TPA是一種特異性的TP感染患者體內誘導產生的抗體，其往往最早出現，卻遲遲不消失，甚至在治愈后、乃至終生的患者仍然可以檢出TPA。梅毒患者經感染后還可以產生一種nTsAh，這種抗體無特異性，容易受到多種因素、多種疾病的影響，所以經常使患者血清檢測結果呈現假陽性。同時，在使用TPPA法對患者進行檢測的時候也會得出假陰性結果，故這種檢測方法在梅毒患者不同期中都存在一定的盲區，都不如CLIA法準確、特異性強。

該研究經對正常人和TP患者血清的檢測，從靈敏度、重復性、特異性、準確度等方面探討了CLIA法的應用特點和優勢，結果為：CLIA分析儀的靈敏度為1/16；且該法的TPA攜帶污染率、陽性率、陰性率分別為0.14%、87.7%（264/300）、100%。表明CLIA法重復性良好、精密度優良，檢測結果準確，且優于TPPA和TRUST。林炳柱等研究者通過應用3種不同的方法（RPR法、CLIA法、TPPA法）檢測研究對象的血清TPA，進而探討了其各白臨床價值，研究發現：CLIA法準確、方便、特異性強，與該研究結果相似。

綜上所述，使用CLIA法作為檢驗TPA的手段，其結果準確率高；并且CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在十擾和限制、攜帶污染率低，值得推廣應用。