臨床血液檢驗中兩種不同細菌鑒定法的應用

胡錦霞

(信陽市第四人民醫院 檢驗科 河南 信陽 464006)

近些年來，抗生素在臨床上的應用已越來越廣泛，使得細菌的耐藥性及對抗生素的敏感性發生了一定變化，從而給臨床檢驗工作帶來了一定難度。通過血液細菌鑒定法對患者的血液樣品進行檢測，可為相關疾病的診斷及治療提供有效依據［1］。本研究主要就兩種不同細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用作以下分析。

1 資料與方法

1．1 一般資料 研究資料選自信陽市第四人民醫院2012 年7月至2013 年9 月收治的620 例發熱合并全身感染患者，排除及納入標準:①無血液系統疾病;②凝血功能無障礙;③入院前48 h內未服用任何藥物及未接受任何治療。通過無菌操作在患者發熱初期或高峰期采集620 例血液標本，每人采集20 ml，以冷藏方式對標本進行保存，并盡快送檢。

1．2 研究方法 同時使用常規藥敏試驗和直接藥敏試驗對每份標本進行檢測，對兩種檢測方法所得細菌鑒定結果及藥敏結果的符合率進行分析。

1．2．1 常規藥敏試驗 把血液標本分別接種在巧克力平板、麥康凱平板及血平板上，在濃度為5%、溫度為35 ℃的CO2下孵育18 ～24 h 后，取出菌落涂片，行革蘭氏染色鏡檢，結合檢測結果選擇相應的觸酶或者進行氧化酶試驗，使用URITEST －3000 生物鑒定儀對其進行鑒定，并行藥敏試驗［2］。

1．2．2 直接藥敏試驗 ①先把血液標本接種在URITEST －3000 型生化血培養儀自動培養及檢測，當檢測出陽性樣后，通過無菌注射器抽取10 ml 陽性品，注入無菌試管，以梯度方式對細菌離心分離，速度1 500 r/min，5 ～10 min 后收集上層清液，再以3 000 r/min 速度離心，15 ～20 min 后清除上清液，PBS 洗滌2 次后重懸［3］。②另外取懸液涂片20 μl 對陽性樣進行革蘭氏染色，同時行倒置顯微鏡觀察，若為G+菌，且形態為鏈狀，則使用濃度為5%的羊血血平板+ MH 進行初級藥敏試驗，結合試驗結果選擇合適的酶，把菌液濃度調整為6.2 ×108cfu/L 后，接種在藥敏綜合板NC21 上，行細菌鑒定及藥敏試驗;若為一般菌種，在MH 平板上接種2 滴懸液(真菌例除外)，借助無菌拭子涂抹均勻，貼上合適的藥敏紙片，結合2005NCCLSI 標準對陽性樣敏感性以及耐藥性進行判斷［4］。

1．3 統計學分析 采用SPSS 17.0 統計學軟件進行數據處理分析，定性資料的組間比較采用χ2檢驗，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

620 份樣品中檢出陽性樣共375 份。G－球菌和G+桿菌的中度敏感、敏感、耐藥符合率分別為92.37%、95.14%、97.17%及94.46%、96.61%、96.91%，組間比較差異均無統計學意義(P ＞0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方法抗生素敏感度檢出符合率比較(n，%)

3 討論

近年來因細菌耐藥性增加導致的多重耐藥菌感染誘發的全身感染或敗血癥等疾病成為院內感染或社區獲得性感染中的重要組成。快速有效的檢測方法對于及時診斷、正確合理用藥具有重要意義［5］。隨著研究深入，目前臨床上常用的藥敏試驗方法有紙片擴散法、稀釋法、抗生素濃度梯度法及全自動培養檢測儀等。

本研究使用常規藥敏試驗和直接藥敏試驗對620 份血液標本進行檢測，此外，還對樣品中的G+桿菌、G－球菌進行了藥敏試驗，結果顯示，兩種檢測方法的陽性樣藥敏試驗總符合率比較，差異無統計學意義(P ＞0.05)。說明直接藥敏試驗可替代常規藥敏試驗對G+桿菌、G－球菌的抗菌藥物敏感度檢測，且直接藥敏試驗檢測時間較短，耗材少，簡單方便，因此，可把其廣泛應用在相關疾病的臨床診斷中。

［1］張茂海．兩種細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用研究［J］．湖南中醫藥大學學報，2011，31(12):3 －4，7．

［2］趙碩，朱以軍，單小云，等．576 株血液分離病原菌的分布及耐藥性分析［J］．中華醫院感染學雜志，2011，21(9):1909 －1911．

［3］張鴻．武漢市青山區血培養病原菌的分布及耐藥性分析［J］．實驗與檢驗醫學，2011，29(4):411 －412，436．

［4］曹敏華．2 659 份血培養中病原菌的分布及耐藥性［J］．海南醫學，2012，23(8):99 －101．

［5］李慧．兩種細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用［J］．現代預防醫學，2011，38(9):1705 －1706．