腦脊液細胞學檢查在診斷中樞神經系統感染性疾病的臨床應用

劉迎春 阮 劍

湖北團風縣人民醫院 1）檢驗科 2）骨外科 團風 438000

中樞神經系統感染是中樞神經系統（central nervous system，CNS）的常見疾病，腦脊液（cerebrospinal fluid，CSF）檢查對疾病的診斷具有重要參考意義［1］。本文采用玻片離心沉淀法檢查腦脊液細胞學診斷中樞神經系統感染，現分析如下。

1 資料與方法

1.1病例資料選取2010－03－2013－03間我院收治的中樞神經系統感染患者82例，男43例，女39例，年齡23～67歲，平均39歲。病毒性腦膜炎23例，結核性腦膜炎31例，細菌性腦膜炎17例，腦轉移瘤11例，均為亞急性或急性發病。頭痛13例，發熱11例，嘔吐23例，意識障礙15例，抽搐7例，精神異常8例，腦膜刺激征5例。

1.2儀器和方法

1.2.1 儀器：玻片離心沉淀儀，采用孔氏FCS兩用型離心沉淀儀。細胞涂片離心機，購自于長沙湘儀離心機儀器有限公司。顯微診斷儀，購自于重慶天海醫療設備有限公司。

1.2.2 CSF檢查方法：①患者行腰椎穿刺術，先進行腦脊液常規檢查、計數和生化檢查，檢測顱內壓。每位患者各取1 mL新鮮腦脊液標本進行玻片離心沉淀。采用FCS－E型玻片離心儀，將獲取的標本注入離心機沉淀池內，慢速離心，設置參數為500rpm／min，離心10min后取出玻片晾干。②于室溫下進行瑞－姬染色，染色時間約為10min，之后沖洗晾干。③利用顯微診斷儀觀察腦脊液細胞形態，并進行計數和分類，查看有無異常細胞。

2 結果

2.1腦脊液常規、生化和壓力檢測結果患者腦脊液壓力增高，其中10例患者腦脊液壓力＞300mmH2O。蛋白含量0.5～3.8g／L，8例顯著升高。葡萄糖含量1～3.5mmol／L，3例顯著降低。氯化物在118～120mmol／L范圍內波動，變化不顯著。腦脊液中最高白細胞數量達到1 000個／mm3，最少者僅為6個／mm3。見表1。

表1 腦脊液常規生化檢查與細胞學檢查異常百分率比較表

2.2腦脊液細胞學檢查結果（1）正常腦脊液：60%～70%為淋巴細胞，形態較小且多呈圓形，具有完整的胞膜和光滑的邊緣，胞漿量少。30%～40%為單核細胞，形態較大且多呈馬蹄形。單核細胞與小淋巴細胞的比例約為4：6或3：4，無中性粒細胞，偶見大淋巴細胞。（2）化腦：神經外科術后感染患者，80%～90%為嗜中性粒細胞，甚者中毒顆粒出現在胞漿內。（3）病腦：以淋巴細胞反應為主，細胞分類比例為嗜中性粒細胞＜單核細胞＜淋巴細胞，具有大量激活淋巴細胞。（4）結腦：染色涂片后出現單核細胞、淋巴細胞、嗜中性粒細胞、漿細胞、激活單核細胞及激活淋巴細胞等并存，由此可見結腦以混合細胞反應為主。（5）腦髓炎：小淋巴細胞升高為主要表現癥狀，同時伴有漿細胞、激活淋巴細胞和嗜中性粒細胞。（6）腦囊蟲：嗜酸性粒細胞升高為主要表現癥狀。見表2。

3 討論

中樞神經系統感染是由不同病原體引起的一類炎性疾病，是由于生物性病原體侵入中樞神經系統后引起的慢性或急性疾病，屬于我國常見疾病，包括腦炎、腦膜腦炎和腦膜炎等，且臨床漏診或誤診現象極其嚴重。腦室系統內的脈絡從可產生腦脊液，正常腦脊液中單核細胞與淋巴細胞的比例約為70∶30～60∶40，當致病菌侵襲中樞神經系統時，其抗原性引起特征性細胞免疫反應和相應的腦脊液白細胞計數，同時還可出現激活淋巴細胞、大淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、激活單核細胞、嗜中性粒細胞等異常細胞，為定性診斷提供依據［2－3］。其中，細菌性腦膜炎以嗜中性粒細胞反應為主，結核性腦膜炎以嗜中性粒細胞、單核細胞、激活淋巴細胞和漿細胞的混合反應為主，病毒性腦膜炎以淋巴細胞的細胞學反應為主。腦脊液細胞學檢查是一門逐漸發展的新興學科，主要研究正常狀態和病理狀態下的腦脊液細胞成分分類及其臨床引用，通過特殊裝置收集細胞成分后進行染色觀察［4］。常規腦脊液檢查其陽性率遠遠低于腦脊液細胞學檢查，不同類型的中樞神經系統感染表現出不同的腦脊液細胞學特性，腦脊液細胞學檢查可準確的動態觀察細胞形態，提供快速、簡便、準確的輔助診斷。腦脊液細胞學臨床表現大致可分為如下幾類：（1）淋巴細胞型，如感染后脫髓鞘腦炎或病毒性腦膜炎等慢性或免疫性炎癥。（2）單核－吞噬細胞型，常見于變性疾病或慢性刺激性疾病。（3）多形核粒細胞型，常見于出血或急性細菌性炎癥。（4）混合細胞型，常見于隱球菌性腦膜炎和結核性腦膜炎等亞急性炎癥。

有學者采用玻片離心沉淀法分別收集結核性腦膜炎和病毒性腦膜炎患者的腦脊液細胞，進行巴氏染色后發現結核性腦膜炎患者在病初12d內多呈嗜中性粒細胞反應，直至病情第4周末，單核細胞與嗜中性粒細胞所占比例一致［5］。隨著病程的逐漸延長，淋巴細胞逐步代替腦脊液病理細胞，而在整個病程中始終出現漿細胞和激活單核細胞，由此提示腦脊液細胞的細胞質、量差別及動態變化對結核性腦膜炎的早期診斷具有重大意義。

腦脊液內的細胞在離體環境下極易被破壞，因而腦脊液細胞檢查的關鍵是盡可能多的收集完整細胞，沉淀池法收集細胞形態清晰完整，僅需少量標本0.5～1.0mL。綜上所述，通過玻片離心沉淀法檢查腦脊液細胞學可動態監測其變化，從而極大提高中樞神經系統感染診斷的陽性率，對臨床療效的評估具有重要意義。

表2 腦脊液細胞學檢查結果

［1］粟秀初，趙鋼，楊毅寧，等 .玻片離心沉淀法腦脊液細胞學檢查在中樞神經系統感染性疾病診斷中的應用價值［J］.中國現代神經疾病雜志，2013，2：008.

［2］Spudich S，Gisslen M，Hagberg L，et al.Central nervous system immune activation characterizes primary human immunodeficiency virus 1infection even in participants with minimal cerebrospinal fluid viral burden［J］.Journal of Infectious Diseases，2011，204（5）：753－760.

［3］Nau R，Srgel F，Eiffert H.Penetration of drugs through the blood－cerebrospinal fluid／blood－brain barrier for treatment of central nervous system infections［J］.Clinical microbiology reviews，2010，23（4）：858－883.

［4］戰玉喜，李建新 .顱內感染者腦脊液細胞學檢查的臨床意義［J］.山東醫學高等專科學校學報，2013，35（5）：364－366.

［5］粟秀初 .影響玻片離心沉淀法腦脊液細胞學檢查進一步推廣的若干因素［J］.中國現代神經疾病雜志，2011，11（5）：486－488.