探討ADAM33基因多態性與塵螨過敏性哮喘易感性的關系研究

宮 蕾　呂響紅　于 斌

（青島大學醫學院第二附屬醫院（中心醫院）小兒科，山東 青島 266042）

探討ADAM33基因多態性與塵螨過敏性哮喘易感性的關系研究

宮 蕾呂響紅于 斌

（青島大學醫學院第二附屬醫院（中心醫院）小兒科，山東 青島 266042）

目的 探討ADAM33單核苷酸多態性與塵螨過敏性哮喘間的關聯性。方法取哮喘病、健康人各100例，通過AS-PCR、DNA測序法等，分別測定ADAM33基因F+1、S2、T2及V4位點。結果兩組在S2位點基因型及等位基因頻率上，存在明顯差異（P＜0.05）；與過敏性哮喘易感性無顯著關聯（P＞0.05）。結論S2位點基因多態性與過敏性哮喘顯著相關，與病情嚴重性及肺功能指標關聯甚微。

ADAM33基因多態性；哮喘；關系

本研究將對哮喘組和正常組患者展開研究，通過分子生物學法檢測哮喘發病相關聯的ADAM33基因F+1、T2、S2以及V4位點多態性，研究ADAM33基因多態性與塵螨過敏性哮喘疾病間的關聯性。

1　對象與方法

1.1研究對象：過敏性哮喘組共100例，未合并其他疾病或感染，中位年齡（34.5±13.2）歲，患者未經脫敏治療。健康對照組共100例，中位年齡（36.5±11.4）歲，樣本外周血均由我院提供（5 mL）。

1.2方法

1.2.1臨床指標檢測。①過敏原檢測：利用皮膚點刺實驗，將塵螨所致過敏性哮喘篩選出來；②肺功能檢測；③胸部正位片；④特異性IgE抗體測定。

1.2.2基因組DNA提取與序列檢測：取3 mL外周靜脈血，抗凝后運用基因組DNA提取試劑盒進行基因組提取。用實時熒光定量PCR系統分析PCR反應及擴增產物；取基因型樣本，純化PCR擴增產物，用遺傳分析儀對PCR產物予以測序，用BLAST軟件分析測序結果的同源性及準確性。

1.3統計處理：通過SPSS13.0軟件來處理所有數據。χ2用以檢驗組間基因型頻率以及等位基因頻率等。用OR、95%CI代表哮喘風險評估，P＜0.05，表明對比差異顯著。

2　結　果

2.1ADAM33多位點基因型與等位基因頻率分析，見表1。

2.2過敏性哮喘組S2位點多態性與哮喘易感性的關系，見表2。

3　討　論

表1　ADAM33多位點基因型與等位基因頻率分析

表2　過敏性哮喘組S2位點多態性與哮喘易感性的關系

哮喘，屬于臨床頻發的變應性疾病，其發病機制及病因仍有待明確。Raby等通過對北美哮喘兒童ADAM33基因的17個SNP進行檢測，發現單個SNP與哮喘不相關聯；而Werner等人在德國群體ADAM33基因中的15個SNP檢測中，得出F+1、ST+4、ST+5等多態性與哮喘存在顯著性差異（P＜0.01）。本研究通過測定F+1、T2、S2及V4四個位點的基因型及等位基因，結果表明：ADAM33基因F+1、T2與V4位點基因型對比無顯著差異（P＞0.05）；哮喘組與健康組在S2位點基因型及等位基因頻率存在明顯差異（P＜0.05）；S2位點基因型構成差別對哮喘嚴重性無顯著差異（P＞0.05）；提示在漢族群體中，ADAM33基因F+1、S2、T2以及V4位點具有多態性，S2位點多態性和哮喘具有一定關聯，但與其嚴重性無顯著相關。盡管ADAM33基因會否參與哮喘發病的研究結果各不相同，但其對了解哮喘形成及發展極有利。

哮喘患者肺功能會有所降低，這已是不爭事實。有研究［2］表明，ADAM33基因中有2種SNP（S2與Q21）的FEV，年降低斜率顯著上升，提示ADAM33基因會使肺功能下降。魏龍等［3］通過對1350例新疆人8種SNP展開對比研究，結果表明：ADAM33基因的多態性位點對慢性阻塞性肺疾病的肺功能降低有顯著影響。本研究通過計算S2位點基因型及其和肺功能指標FEV實/預以及FEV1/FVC之間關聯性，得出S2位點SNP與哮喘患者的肺功能無關聯。研究結果之所以存在差異，主要是受遺傳、種族因素影響。為探討ADAM33與哮喘相關的遺傳多態性及表達影響機制，未來還需展開深入研究。

［1］遲翔宇.ADAM33基因在支氣管哮喘發病中的研究［D］.濟南:山東大學，2011.

［2］邱玉明，羅雅玲.ADAM33基因Met764Thr位點多態性與支氣管哮喘發病及患者肺功能的相關性［J］.中華結核和呼吸雜志，2007，30（7）:517-521.

［3］魏龍.ADAM33基因多態性與新疆維吾爾族人群支氣管哮喘的相關性研究［D］.烏魯木齊:新疆醫科大學，2012.

To Investigate the Relationship between ADAM33 Gene Polymorphism and Dust Mite Allergic Asthma Susceptibility

GONG Lei，LU Xiang-hong，YU Bin
（Department of Pediatrics，the Second Affiliated Hospital of Medical College of Qiingdao University （Central Hospital），Qingdao 266042，China）

Objective To investigate the relationship between ADAM33 single nucleotide polymorphism and dust mites allergic asthma among. Methods The asthma and 100 healthy people were selected，by means of AS-PCR，DNA sequencing，ADAM33 genes F+1，S2，T2 and V4 loci were determined respectively. Results The two groups in the S2 genotype and allele frequencies，there is obvious difference （P＜0.05）；no significant association with susceptibility to allergic asthma （P＞0.05）. Conclusion Significant correlation of S2 polymorphism with allergic asthma，with severity of pulmonary function indices and little.

ADAM33 gene polymorphism；Asthma；Relationship

R562.2+5

B

1671-8194（2015）22-0020-02