乙肝標志物與前S1抗原及HBV—DNA相關性分析

阮艷秋 劉偉平 周溢

【摘要】目的探討乙肝病毒標志物與乙肝-DNA、前S1抗原的相關性，為預測乙肝病毒的傳染程度與乙肝的預防、診斷及治療提供實驗室依據(jù)。方法對2037份臨床及門診標本采用ESLSA法檢測乙肝五項及前S1抗原，用實時熒光定量PCR法檢測乙肝DNA，最后對測定的三項結果進行比較分析。結果在HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）組中前S1抗原和乙肝DNA的陽性率分別為96.9%、92.4%，在HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）組陽性率分別為74.5%、81.3%，在HBsAg（+）、HBeAg（+）組陽性率分別為96.2%、84.6%，在HBsAg（+）、HBcAb（+）組陽性率分別為69.2%、67.9%。HBeAg與前S1抗原、乙肝DNA經(jīng)分析差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），前S1抗原與乙肝DNA差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。結論前S1抗原與乙肝DNA具有良好的相關性，經(jīng)χ2檢驗分析，兩者差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），但其操作方法比PCR方便，可代替乙肝DNA作為常規(guī)項目為預測乙肝的預防、診斷及治療提供實驗室依據(jù)。

【關鍵詞】HBV-DNA；乙肝前S1抗原；乙肝病毒血清標志物

【中圖分類號】R512.6+2【文獻標識碼】B【文章編號】1005-0019（2015）01-0458-01

乙肝是目前流行最廣泛、危害最嚴重的病毒性肝炎之一[1-2]，我國對乙肝感染者檢查大多數(shù)以血清學標志物的測定為主要途徑，采用ELISA檢測HBV血清標志物只能反映病毒入侵人體的免疫狀態(tài)，不能直接反映人體內病毒載量的情況，而且乙肝DNA病毒的復制表達與乙肝血清標志物在人體內的表現(xiàn)差異較大。乙肝前S1抗原作為一項新的血清學檢測指標，已經(jīng)逐漸被應用于乙肝的實驗室診斷和療效觀察中[3]。本研究對2037份臨床及門診標本采用ELISA法檢測乙肝五項及前S1抗原，用實時熒光定量PCR法檢測乙肝DNA，最后對測定的三項結果進行比較分析，目的在于探討乙肝血清學標志物與HBV-DNA及乙肝前S1蛋白的相關性，為乙肝的早期診斷、治療及預后判斷提供實驗室依據(jù)。

1對象與方法

1.1對象

樣本均來自于2013年6月到2013年11月醫(yī)院門診和住院患者檢測HBV感染的血清標本共2037份。

1.2儀器、試劑和方法

FTC-2000實時熒光定量PCR儀購自上海楓嶺生物技術有限公司；HBV-DNA試劑盒購自中山大學達安基因股份有限公司。RT-2100C型酶標分析儀；乙肝標志物試劑盒購自英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司；乙肝Pre-S1抗原試劑盒購自上海阿爾法生物技術有限公司。乙肝兩對半、Pre-S1檢測采用ELISA法；HBV-DNA采用實時熒光定量PCR法。

1.3統(tǒng)計學分析：數(shù)據(jù)分析采用χ2檢驗，數(shù)據(jù)處理由SPSS14.0軟件完成，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1Pre-S1Ag與HBV-DNA在不同的乙肝五項模式中檢出情況

對2037份血清標本進行乙型肝炎五項、乙型肝炎前S1抗原、HBV-DNA檢測，結果如表1。

3討論

目前，臨床上對于乙肝的診斷主要是乙肝五項、前S1抗原和HBV-DNA，在這三種血清標志物的檢測中，靈敏度最高的是HBV-DNA，其次是前S1抗原，乙肝五項檢測的靈敏度最低。

本研究結果顯示，Pre-S1Ag和HBV-DNA陽性主要集中在大三陽（HBsAg（+）HBeAg（+）HBcAb（+））模式中，分別為96.9%和92.4%，表明病毒此模式的患者中復制率較高，感染性較強。在小三陽組中，其Pre-S1Ag與HBV-DNA的檢出率分別為74.5%和81.3%，說明病毒在HBeAg轉陰的患者中仍存在復制，病情較重，其中部分患者還可能演變?yōu)楦斡不蛘吒伟棉D率非常低，原因可能是乙肝病毒為了逃避宿主的免疫反應而發(fā)生前C區(qū)前端變異[4]。而亞洲人群平均50%的HbeAg陰性的慢性乙肝部分患者存在前C區(qū)與C區(qū)基因的突變，使HbeAg分泌減少，在兩對半檢測結果中HbeAg為陰性。另外，Pre-S1Ag和HBV-DNA陽性只出現(xiàn)在HBsAg陽性的標本中，沒有在HBsAg陰性的標本中出現(xiàn)，具有較高的特異性[5]。

HBeAg與HBV-DNA檢驗結果存在相關性，但兩者通過統(tǒng)計學分析，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。這表明HBV-DNA檢測的熒光定量PCR法較ELISA法更為靈敏。與文獻報道基本相符[6-7]。

乙肝前S1抗原和HBV-DNA二者之間無顯著性差異（P>0.05），說明乙肝前S1抗原比HBeAg在判斷有無乙肝病毒復制或活躍程度方面更有意義[8-9]。熒光定量PCR直接檢測患者血清乙肝病毒DNA的含量，它是反映乙肝病毒感染、復制及判斷治療效果最直接的指標。

由此可見，乙肝兩對半可作為乙肝病毒感染的初篩指標，乙肝前S1抗原，操作簡便、經(jīng)濟、快速，與乙肝DNA有良好的相關性，在無條件開展乙肝DNA檢測的基層醫(yī)院可用于乙型肝炎的診斷、治療及預后判斷中具有重要指導意義。

參考文獻

[1]葉維法，鐘振義.肝炎學大典[M].第1版.天津：天津科學技術出版社，1996，463-515

[2]NishizawaT，OkamotoH，KonishiK，etal.AnovelDNAvirus（TTV）associatedwithelevatedtransaminaselevelsinposttransfusionhepatitisofunknownetiology[J].BiochemBiophysResCommun，1997，241（1）：92-97

[3]張榮生.乙肝病毒前S1抗原的檢測與臨床[J].實驗與檢驗醫(yī)學，2009，10（26）：548-548.

[4]張海譜，李仕英，謝曉民.HBV-Pre-C區(qū)段變異患者血清HBV和前S1抗原的檢測[J].中原醫(yī)刊，2009，2（33）：1-2.

[5]李加村，張傳興，裴景亮.乙肝病毒前S1抗原與乙肝病毒DNA相關性分析[J].濰坊醫(yī)學院學報，2009，28（3）：211-212.

[6]吳兵，朱玉蘭，劉勝牙.乙型肝炎患體內病復制水平的試驗觀察[J].中國熱帶醫(yī)學，2010，8（6）：939.

[7]劉吉純，張艷菊.慢性乙型肝炎患者的e抗原、前S1抗原與HBV-DNA檢測及相關性分析.中國實用醫(yī)藥.2011，06（21）：124-125.

[8]張艷超.乙型肝炎病毒前S1抗原檢測的臨床意義.標記免疫分析與臨床.2009，16（1）：8-10.

[9]HuyTT，ushijimaH，WinKM，etal.HighprevalenceofHepatitisBVirusPre-SMutantincountriesWhereItIsendemicandItsrelationshipwithgenotypeandchronicity[J].Jclinmicrobiol，2010，12（41）：5449-5455.