兩面針藥材提取物體外抑菌作用研究

馬建鳳　劉華鋼　朱丹　馮看

【摘要】 目的：探索兩面針藥材的體外抑菌作用。方法：采用紙片瓊脂擴散法，觀察兩面針藥材提取物對臨床常見感染病菌的抑制作用。結果：兩面針提取物對9種臨床常見感染細菌（金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、傷寒沙門氏菌、肺炎克雷伯氏菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌）均有不同程度的體外抑制作用。結論：兩面針藥材提取物在體外對9種臨床常見感染細菌有抑制作用。

【關鍵詞】 兩面針；瓊脂擴散法；體外抑菌作用

【Abstract】：Objective To study on the antibscterial action of extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.in vitro.Methods To observe the antibscterial action of extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.On common clinical bacterials with disc agar diffusion method.Results The extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.showed strong inhibitory effects on common clinical pathogens such as Staphylococcus aureus， Escherichia coli， Bacillus aeruginosus， Bacillus subtilis ，Salmonella typhi，， Klebsiella pneumoniae and Hemolytic streptococcuses.Conclusion The extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.has strong inhibition on bacteria in vistro.The results provide a basis for clinical application of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.

【Key words】：Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.； disc agar diffusion method；bacteriostatic action in vitro.

【中圖分類號】R28 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2015）02-0099-01

基金項目：國家自然科學基金項目“兩面針生物活性與化學特征相關指紋圖譜的研究”（30760302）；廣西壯族自治區科技廳自然科學基金項目（0832127）

兩面針是廣西特色藥材之一，其植物來源為蕓香科植物兩面針 Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.的根，廣泛應用于中醫處方、中成藥及精細化工產品中，具有驅風化濕、消腫止痛、行氣之功效[1，2]。現代藥理研究表明兩面針具有良好的抑菌、抗炎、鎮痛、抗腫瘤、抗氧化等作用[3～5]。為闡明兩面針的抗炎抑菌作用，本文采集廣西南寧，崇左，百色，玉林，欽州等22個產地的兩面針藥材，對兩面針藥材提取物的體外抑菌作用進行了較為系統的研究。

1 材料和方法

主要儀器和試劑：M-H瓊脂[6] ，購自北京陸橋技術有限責任公司；氯化鈉，二甲基亞砜（DMSO）等有機試劑均為國產分析純；無菌綿羊全血，廣西醫科大學實驗動物中心提供。實驗菌種均購自中國藥品生物制品檢驗所。兩面針藥材，采自廣西崇左等22個產地。

1.1樣品配置

取藥材，洗凈泥沙，切薄片，陰干，粉碎，過40目篩，稱取藥粉6g，加氯仿40mL回流提取，濾過，回收氯仿，殘渣用乙醇定容到10mL量瓶中。

提取物用直徑為 0.22μm 的微孔濾膜過濾除菌，選用新華層析濾紙，用打孔機制成直徑6mm圓片。高壓滅菌烘干后，加藥液浸泡過夜，置恒溫箱中烘干，4℃ 保存[6]。

1.2 直接菌落法制備菌懸液：取各菌37℃18～24h 純培養物，用無菌生理鹽水校正到濃度相當于0.5麥氏標準比濁標準，無菌生理鹽水1∶10稀釋備用。

1.3 體外抑菌研究

采用紙片瓊脂擴散法進行抑菌試驗。用無菌棉簽將菌液分別均勻涂布于M-H瓊脂平板表面，含藥慮紙片緊貼于瓊脂表面，接種好的平皿置室溫待菌液被瓊脂吸收后把瓊脂平皿倒置放入35℃±2℃培養箱孵育16～20h（鏈球菌20～24 h）觀察結果。每個藥物抑菌試驗重復3次，抑菌結果為3次試驗平均值。抑制菌指數判斷：如抑菌圈直徑等于6mm，說明對該菌種無抑制作用；抑菌圈直徑越大，抑菌作用越強。

2 結果；

3 討論；

所選廣西各產地兩面針藥材提取物對9種細菌均有不同程度的抑制作用，對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、傷寒沙門氏菌、 肺炎克雷伯氏菌抑制作用較強，而對大腸埃希氏菌 和鏈球菌的抑制作用較差，對銅綠假單胞菌抑制作用最弱。綜合比較22個產地中，廣西崇左和玉林產的兩面針藥材抑菌活性較高。但各產地藥材對9種細菌的抑菌活性強度不盡相同。兩面針藥材抑菌作用的活性成分和體內試驗有待進一步研究。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部.北京：化學工業出版社，2005，116～117.

[2] 中華本草.1999年版四部，1999：3821.

[3] 劉華鋼，黃秋潔，賴茂祥.中藥兩面針的研究概況. 時珍國醫國藥. 2007，18（1）：222～223.

[4] 姚榮成，胡疆.兩面針化學成分及其藥理活性研究概況. 藥學實踐雜志.2004，22（5）：264～267.

[5] 秦三海，劉華鋼，王博龍，等.氯化兩面針堿體外誘導肺癌SPC-A-1、舌癌Tca8113兩種腫瘤細胞株凋亡的研究.中國藥理學通報.2007，23（2）： 279～280.

[6] 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理學實驗方法學[M].第3版，北京：人民衛生出版社.2002，1647-1660.