碘油聯合壁虎活性單體介入治療兔VX2肝移植瘤術前影像評價

張明 劉峰 孫業全

【摘要】目的：建立兔VX2肝移植瘤模型，對其影像學表現進行評價，為下一步聯合壁虎活性單體評價治療效果提供一定的參考。方法：20只兔新西蘭大白兔在無菌條件下接種VX2瘤組織塊，建立VX2肝移植瘤模型，2周后行超聲、3.0T磁共振，評價其影像表現。結果：成瘤率為90%。超聲表現為略高回聲團塊，沒有包膜，其內可見強回聲。TIWI表現為低信號，T2WI表現為高信號，增強掃描后明顯強化，內部有不強化的壞死區。結論：對兔VX2肝移植瘤而言，超聲檢查篩查腫瘤生長情況，磁共振可以從分子水平上評價藥物療效，為下一步碘油聯合壁虎活性單抗評價藥效提供一定的依據。

【關鍵詞】兔；VX2肝移植瘤；影像表現

【中圖分類號】R562.21【文獻標識碼】B【文章編號】1005-0019（2015）01-0071-01

肝癌是常見的消化系統腫瘤之一，兔VX2肝移植瘤模型從生長、轉移及死亡、病理均與人肝癌相似，建立兔VX2肝移植瘤模型，篩選合適的模型，可以為碘油聯合壁虎活性單抗行介入治療及評價療效提供更好的參考依據。

1材料與方法

1.1實驗動物及其模型建立

新西蘭大白兔20只，購自山東省農科院，體重2.5～3.5kg。從-152℃超低溫冰箱中取出組織塊，放入40℃水浴箱中復蘇1分鐘，放入盛有生理鹽水的換藥碗中。用1.5%戊巴比妥鈉（2ml/kg）耳緣靜脈注射麻醉2只，常規備皮、消毒、鋪無菌洞巾，于大腿內側切開皮膚，暴露肌肉，用手術刀切開2mm長的切口，切取大約1mm3的組織塊置入其中，縫合切口。術后三天每天給予40U青霉素預防感染。術后3周，超聲掃描可見接種處肌肉內一實質性低回聲包塊，即制成荷瘤兔。于3周后麻醉該瘤兔，切取新鮮腫瘤組織，剔除壞死組織，切成大約1mm3的組織塊，麻醉20只兔子，手術操作方法同上，于劍突下切開大約2～3cm切口，于肝左葉用眼科鑷刺破形成3～5mm深的竇道，置入2～3塊組織塊，明膠海綿填塞，防止組織塊到皮下等位置，縫合。術后三天每天給予40萬U/只，青霉素預防感染。

2、儀器及方法

選用SIMENS超聲診斷儀，探頭采用4PL，淺表器官探頭，變頻范圍5～12MHz。

GE3.0T磁共振，采用膝關節線圈，掃描參數TIWI，TR220ms，TE6.2ms，FOV576mm，層厚5mm，層間距1mm，矩陣320×224，T2WI，TR2360ms，TE71.9ms，FOV576mm，層厚5mm，層間距1mm，矩陣320×224，DWI，b值取0s/mm2、800s/mm2和1000s/mm2，TR5320ms，TE73ms，FOV456mm，層厚5mm，層間距1mm，矩陣128×128。經耳緣靜脈注射Gd-DTPA，劑量0.1ml/kg，動態增強掃描。

結果：

VX2肝移植瘤超聲表現：VX2肝移植瘤呈略類圓形等回聲團塊，與正常肝實質分界欠清，其內可見斑點狀強回聲。（圖A）

MRI表現：T2WI圖像上VX2肝移植瘤呈邊緣清楚的圓形或橢圓形高信號，高于周圍肝臟或肌肉，其內部信號不均勻，有不規則的高信號區。T1WI圖像上VX2呈現較均勻的低信號，中心信號略不規則。DWI圖像上顯示為高信號，增強后邊緣明顯強化，中心出現清楚的非強化區。（圖B-E）

討論：

VX2是Shop病毒在兔皮膚上誘發的鱗狀細胞癌經多次傳代建立，其是穩定的可移植腫瘤細胞株[1]。兔VX2肝移植瘤模型現在已經比較成熟，是目前最大、最成熟和最常用的肝癌腫瘤模型[2]，其移植成功率高，時間短，是理想的動物研究模型，其比較接近人類肝癌，可以較好的為抗肝癌新藥的應用研究提供良好的基礎模型。不同之處，是缺乏引起肝癌的原發病，例如肝炎、肝硬化，這在一定程度上限制了它的研究價值。開腹手術種植法成瘤率高、模型性質比較穩定，是值得推薦的建立兔肝移植瘤模型的方法[3]。

相比其他影像學檢查方法，超聲檢查方便，經濟，可以較好的篩查腫瘤的生長情況，可重復性強，超聲檢查是一種監測肝癌模型的有效手段。但是其在檢測腫瘤的壞死以及生長率等方面應用有一定的限制，由于主觀因素以及兔心臟搏動等影響，因此很難準確的測量大小等指標。若生長的肝癌比較靠近心臟，由于心臟搏動的影響，很難準確測量血流信號，難以明確腫瘤的供血情況。因此開腹種植期間，注意盡量在肝左葉遠離心臟的部位種植，同時也方便介入手術時的超選。

3.0T磁共振較1.5T磁共振具有更高的軟組織分辨率和信噪比，更適應于評價腫瘤的治療效果。磁共振功能成像是對腫瘤進行無創評價治療效果最常用的方法之一。磁共振彌散加權成像（DWI）是目前唯一能夠在體外無創性檢查組織內水分子擴散運動的方法[4]，在分子水平上評價治療效果，觀察腫瘤變化情況。b值是重要的影響因素之一，隨著b值的升高，圖像的CNR有所下降，但SNR和ADC比值卻會慢慢上升，雖然圖像質量會有所下降，但是腫瘤與周圍肝實質、腫瘤中心與周邊的對比更加明顯，這對于研究抗腫瘤藥物的療效是最為合適的[5]，通過不同b值的比較，選取800 S/mm2，是最為合適的。磁共振動態增強（DCE-MRI）技術可以動態的觀察腫瘤局部微循環的特點，反映微循環變化的病理生理過程。通過分析得到的圖像數據可以在分子層面上評價腫瘤組織生理病理信息[6]。這可以為下一步評定經血管抗腫瘤藥物的療效提供更好的參考。通過磁共振可以比較準確的測定腫瘤的體積，與病理對照，為無創性檢查評價腫瘤治療效果提供更好的依據。雖然3.0T磁共振具有極高的軟組織分辨率和信噪比，但是3.0T磁共振圖像更易受到呼吸運動以及胃腸蠕動的影響，從而造成偽影，影響評價藥物療效。因此在行此檢查時可以考慮應用沙袋加壓或者呼吸抑制藥物等減少偽影。

VX2肝移植瘤2～3周生長最旺盛，此時期為供瘤血管形成期[7，8]，是介入治療的最佳時期。由于兔血管比較細，所容納的造影劑的量是有限的[9]。注意介入治療時不要栓塞膽囊動脈，以免造成膽囊壞死。