異位性皮炎患者HLA-DRB基因多態(tài)性分析與皮膚病學(xué)研究

張作軍

（遼陽市中心醫(yī)院皮膚科，遼寧 遼陽 111000）

異位性皮炎患者HLA-DRB基因多態(tài)性分析與皮膚病學(xué)研究

張作軍

（遼陽市中心醫(yī)院皮膚科，遼寧 遼陽 111000）

目的 研究分析異位性皮炎與HLA-DRB基因多態(tài)性的相關(guān)性與臨床意義。方法 用引物序列特異性聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-SSP）擴增HLA-DR3等位基因。結(jié)果 HLA-DRB基因頻率在異位性皮炎組為14.89%，對照組為3.75%（P＜0.01）。而DR6基礎(chǔ)頻率在患者組為0，對照組為8.75%（P＜0.01），異位性皮炎組較對照組明顯為低。結(jié)論 DR3基因位點是遼寧遼陽地區(qū)患者異位皮炎的易感基礎(chǔ)，DR6基因點是遼寧遼陽地區(qū)患者異位皮炎的抗性基因。

異位性皮炎；HLA-DRB

異位性皮炎（atopic dermatitis，AD）屬Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，約有48%～79%的患者有家庭異位性疾病史，可能為多基因遺傳。HLA基因是目前已知的最具多態(tài)性的基因，它在同種器官移植排斥反應(yīng)，調(diào)節(jié)機體對抗原的免疫應(yīng)答能力，機體對部分疾病的易感性等方面發(fā)揮重要作用。本文利用分子生物學(xué)技術(shù)，對異位性皮炎患者HLA-DRB基因多態(tài)性進行了分析，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：2010年1月至2013年12月本院皮膚科門診患者，均為遼寧遼陽地區(qū)患者，男46例，女48例，平均年齡（26.89±17.78）歲，平均病程（10.98±5.1）年。160例健康對照組為健康獻(xiàn)血者、查體者。男50例，女110例，平均年齡（44.96±5.2）歲。異位性皮炎的診斷符合1994年美國Williams等提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)［1-3］。

1.2HLA-DRB基因檢測：采用低滲法分離外周血白細(xì)胞，標(biāo)準(zhǔn)的酚-氯仿法提取基因組DNA，PCR-SSP（seqence-specific Primer）擴增HLA-DRB等位基因。依據(jù)第十三屆國際HLA Workshop會議確定的HLA-DRB基因核苷酸序列，設(shè)計出特異性引物共18對。以Pbr322/Msp I DNA Markers作為分子質(zhì)量對照，通過凝膠成像儀（UVI英國）觀察結(jié)果并鑒定型別。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理：HLA-DRB等位基因兩組之間進行頻率分析，HLADRB各基因亞型采用直接計數(shù)法。HLA-DRB1基因頻率=陽性基因數(shù)/樣本數(shù)×2，HLA-DR51、DR52、DR53陽性率=陽性基因數(shù)/樣本數(shù)。兩組HLA-DRB基因頻率間的比較采用校正的四格表卡方檢驗，并計算出相對危險度（relative risk，RR）。

2　結(jié) 果

HLA-DR3基因頻率患者組為14.89%，對照組為3.75%，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析P＜0.01。而DR6基因頻率在患者組為0，對照組為8.75%，P＜0.01，結(jié)果見表1。

3　討 論

HLA分子的功能是結(jié)合經(jīng)抗原遞呈加工的內(nèi)源或外源抗原肽并遞呈給T細(xì)胞。HLA分子抗原結(jié)合凹槽中序列基序是由每個等位基因編碼的，如果等位基因的多態(tài)性改變了肽結(jié)合槽的結(jié)構(gòu)，那么它影響了MHC分子、肽和T細(xì)胞的相互作用，從而控制了對外源性乃至自身抗原免疫應(yīng)答反應(yīng)的特異性，使得不同的HLA基因型對疾病的易感性不同。本研究結(jié)果表明：HLA-DR3基因頻率在異位性皮炎組較對照組增高（14.89%：3.75%，P＜0.01），有顯著性差異。我們推測DR3基因位點是遼寧遼陽地區(qū)異位性皮炎的易感基因。而DR6基因頻率在患者組為0，在對照組為8.75%（P＜0.01），推測此基因位點是遼寧遼陽地區(qū)異位性皮炎的抗性基因。

不同的HLA-Ⅱ基因產(chǎn)物識別不同的抗原分子的特殊表位，進而激發(fā)機體的免疫應(yīng)答反應(yīng)引起疾病這一假設(shè)，目前已被證實［4-9］。因為遺傳背景和環(huán)境因素存在非常大的差異，所以選取病例也有所差別。因此其結(jié)果可能不大一致。Saeki等［9-13］報道異位性皮炎患者HLA-DR6（13）等位基因頻率高于正常對照組。因此，不同地區(qū)不同種族的HLA基因型對疾病的易感性不同。

表1　HLA-DRB等位基因在患者及健康對照組之間的頻率分布

［1］ 龍洋，江山，文杰.異位性皮炎患者HLA-DRB基因多態(tài)性分析與皮膚病學(xué)研究［J］.中華皮膚科雜志，2013，43（1）：31-33.

［2］ 蘇昌軍，江南寧，龍昌杰.特異性皮炎的臨床診斷與前瞻性研究［J］.中華皮膚科雜志，2013，43（3）：161-163.

［3］ 趙辨.臨床皮膚病學(xué)［M］.南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2008：331-339.

［4］ 顧偉程.現(xiàn)代皮膚病性病治療學(xué)［M］.北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，2006：222-227.

［5］ 顧恒，陳祥生，陳崐.特應(yīng)性皮炎診斷標(biāo)準(zhǔn)的評價［J］.中華皮膚科雜志，2012，43（4）：222-226.

［6］ 葉文虎，趙壽久，李璞.現(xiàn)代臨床遺傳學(xué)［M］.合肥：安徽科學(xué)技術(shù)出版社，2006：108.

［7］ 孔繁榮，朱學(xué)俊，陳洪，等.聚合酶鏈反應(yīng)及病理診斷尖銳濕疣的比較研究［J］.中華皮膚科雜志，2013，43（6）：340-341.

［8］ 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.臨床用藥須知［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2007：575-579.

［9］ 龍振華，張石革.性傳播疾病診斷與藥物治療學(xué)［M］.北京：北京科學(xué)技術(shù)出版社，2009：63-69.

［10］ Sacki H，Kuwata S.HLA and atopic dermatitis with serum IgE levels［J］.J Allergy Clin Immunol，2013，113（3）：575-583.

［11］ 楊國亮，王俠生.現(xiàn)代皮膚病學(xué)［M］.上海：上海醫(yī)科大學(xué)出版社，2008：397-399.

［12］ 冉玉平，蔣獻(xiàn)，周光平，等.循環(huán)醫(yī)學(xué)和皮膚性病學(xué)［M］.中華皮膚科雜志，2013，43（5）：309-311.

［13］ 陳洪鐸.皮膚性病學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：190-199.

R758.2

B

1671-8194（2015）09-0186-02