3種抗凝劑依賴性假性血小板減少癥1例

韓文君

（吉林省長春市雙陽區醫院檢驗科，吉林 長春 130600）

3種抗凝劑依賴性假性血小板減少癥1例

韓文君

（吉林省長春市雙陽區醫院檢驗科，吉林 長春 130600）

血小板；抗凝劑；假性減少；手工法

血小板假性減少在常規檢驗中經常遇到。最常見的有因采血不順、未及時混勻樣本、采血量過多（抗凝劑不足）引起血小板凝集，使血小板計數假性減少。還有EDTA依賴性假性血小板減少（PTCP），是指EDTA鹽抗凝全血在全自動血液分析儀上檢測時，誘導血小板聚集，堆積或發生衛星現象，使儀器不能確認血小板而發生假性血小板計數減少［1］。本人發現肝素和枸櫞酸鈉抗凝劑也可使個別患者的血小板發生聚集引起血小板計數假性減少。本文報道3種抗凝劑均致血小板計數假性減少1例。

1　病歷摘要

患者男性，73歲，2013年3月12日入我院。主訴，咳嗽，咳痰，惡心嘔吐，前來就診。入院時查體，體溫36 ℃，脈搏75次/分鐘，呼吸18次/分鐘，血壓120/70 mm Hg，心率75次/分鐘。經肺片檢查有肺炎，胃鏡檢查有慢性糜爛性胃炎，膽囊息肉。3月13日肝功檢查，丙氨酸氨基轉移酶（ALT）：137 U/L，天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）：150 U/L，堿性磷酸酶（ALP）：256 U/L，谷氨酰轉肽酶（r-GT）：154 U/L。血常規，白細胞計數（WBC）：12.44×109/L，紅細胞計數（RBC）：3.65× 1012/L，血紅蛋白（Hb）：124 g/L，血小板計數（PLT）：35×109/L。

2　儀器、試劑

圖1　血球儀Flags信息結果顯示

圖2　抗凝血涂片瑞氏染色鏡檢顯示×1000

我科常規使用的儀器為日本-希森美康公司生產的XT-4000i全自動五分類血球分析儀和KX-21三分類血球分析儀。室內血液質控品，購自臨床檢驗中心和儀器廠家。所用試劑為廠家配套試劑，血細胞分析用抗凝劑為EDTA-K2。質控品，配套試劑，抗凝管均在有效期內使用。顯微鏡OLYMPUS CH20，瑞氏染液購自杭州天和微生物試劑有限公司，1%的草酸銨自配。血球儀定期校準、維護保養，每日早工作前必做儀器flowcell清洗，兩個室內質控品都在控時方可檢測患者的樣本。

3　樣本的檢測

該患者的抗凝全血由專人從病房取回，樣本離體到檢驗科已經有2 h。樣本上機檢測后發現患者血小板計數結果PLT：35×109/L，血小板分布寬度PDW、平均血小板體積MPV、血小板壓積PCT均無報告數值。再次仔細查看抗凝血，未見有凝塊，采血量不超標。查看血球儀Flags信息提示，研究（R）：血小板異常分布，血小板減少，直方圖曲線波峰較低有波折，20fl處尾部抬高，見圖1。用KX-21血球儀比對，血小板計數結果PLT：32×109/L，血小板和白細胞計數結果前有*號提示，直方圖曲線波峰較低有波折，20fl尾部抬高，預示血小板有聚集。取20 μL EDTA-K2抗凝血注入到0.38 mL 1%的草酸銨溶液中，鏡下計數，可見計數池內的血小板3～5成堆或7～10成堆已無法計數。抗凝血涂片瑞氏染色鏡檢，可見血小板聚集成堆，見圖2。于是我們準備了3支抗凝管，分別是EDTA-K2抗凝管、枸櫞酸鈉抗凝管、肝素抗凝管，玻片和1%的草酸銨稀釋液，CELLPACK-血球分析儀使用的稀釋液0.5 mL。去病房肘靜脈采血3 mL，分別注入3支抗凝管各1 mL，非抗凝血推血涂片3張，吸20 μL非抗凝全血注入到0.38 mL 1%的草酸銨稀釋液中，吸20 μL非抗凝全血注入到0.5 mL CELLPACK稀釋液中。待15、60、120 min，分別上機檢測3種抗凝血的血小板數量與預稀釋法上機計數、手工法鏡下計數結果比較。見表1。

采血15 min后預稀釋法上機（KX-21血液分析儀）計數PLT：132×109/L，草酸銨手工鏡下計數血小板3次平均值為：140×109/L。非抗凝血涂片瑞氏染色鏡檢可見血小板均勻散在，無聚集。3種抗凝全血分別涂片瑞氏染色鏡檢均有血小板聚集，且隨著樣本放置時間的延長血涂片染色后鏡檢血小板的聚集越明顯。枸櫞酸鈉和肝素抗凝血，隨放置時間的延長，血小板計數數量逐漸減少，水浴后計數結果變化不大。EDTA-K2抗凝血隨放置時 間的延長，和水浴，計數結果變化不大。手工法計數和預稀釋上機計數與3種抗凝血上機計數結果差異十分明顯。

表1　3種抗凝血不同時間測得的血小板數（×109/L）

4　討　論

一般情況下，絕大多數患者的血小板遇到EDTA抗凝劑不會產生聚集，只有少數患者的血小板遇到EDTA抗凝劑后，短時間內血小板可產生聚集，但大多數在30 min后血小板開始解聚，呈分散狀態，不會影響血小板的正常計數。該患者的血小板遇3種抗凝劑均使血小板發生不可逆聚集，使血小板計數產生假性減少。37 ℃水浴10 min，是排除冷凝集和使可逆聚集的血小板解聚。預稀釋法上機計數和草酸銨手工法計數結果比較準確穩定，能正確地反應患者血液內血小板的真實數量，所以糾正血小板假性減少較佳的方法為非抗凝全血預稀釋法上機計數和草酸銨鏡下計數法。

利用血液分析儀作血小板計數，方便快捷，精確度高已無可置疑。但當樣本中有凝塊、血小板聚集、血小板體積差異較大時，儀器則不能報出準確的結果，這時就必須用手工的方法去糾正。EDTA依賴性假性血小板計數減少可能與血漿中存在的抗血小板抗體和（或）抗磷脂抗體等自身抗體有關，但無病理、生理意義，也與特殊藥物使用有關，多發生在腫瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕婦、肝病、毒血癥及一些不明原因疾病［2］，而枸櫞酸鈉、肝素抗凝劑引起血小板計數假性減少的原理本人尚不清楚，有待繼續研究探討。本病例是典型的EDTA依賴性假性血小板計數減少和原因不明的枸櫞酸鈉、肝素抗凝劑依賴性假性血小板計數減少。

在使用血細胞分析儀計數血細胞時，血小板的聚集引起血小板計數假性減少的同時還可引起白細胞計數假性增高。隨著樣本放置時間的延長，如果血小板的聚集是可逆的，則血小板的數量隨著血小板的不斷解聚會逐漸升高，而白細胞的數量會逐漸下降。平時我們工作中遇到血小板減少的患者時，要及時與臨床醫師、患者溝通，詢問查看患者是否有血小板減少的臨床表現，不能絕對相信儀器檢測的結果或僅用枸櫞酸鈉和肝素抗凝管復查，一定要用手工法復查。總之，作為一名合格的檢驗工作者，不能盲目的學會儀器的操作，一定要掌握影響儀器正確計數的諸多因素，一定要看懂直方圖和散點圖，一定要仔細查看儀器提供的Flags信息提示，并進行儀器比對復查，及時查出出現問題的原因，解除臨床醫師對檢驗數據的疑惑，取得患者對醫務人員的信任，做到不漏診、不誤診，為臨床提供科學、準確符合臨床的檢測結果。

［1］王宏，周蕓，葉琴，等.EDTA依賴性假性血小板減少誤診1例［J］.臨床檢驗雜志，2011，29（4）：275.

［2］秦俊生，史冰洋，王曉艷，等.EDTA依賴性假性血小板減少癥1例［J］.現代檢驗醫學雜志，2006，21（1）：64.

R558.2

B

1671-8194（2015）11-0225-02