植入式迷走神經(jīng)刺激器對(duì)紅藻氨酸誘導(dǎo)兔癲癇模型的影響

殷　音， 周慧英， 肖春蘭， 張新國(guó)， 周正宇， 王　婧

（1. 蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心， 蘇州215123；2. 常州瑞神安醫(yī)療器械有限公司， 常州 213000）

植入式迷走神經(jīng)刺激器對(duì)紅藻氨酸誘導(dǎo)兔癲癇模型的影響

殷音1， 周慧英1， 肖春蘭1， 張新國(guó)2， 周正宇1， 王婧1

（1. 蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心， 蘇州215123；2. 常州瑞神安醫(yī)療器械有限公司， 常州 213000）

目的 研究植入式迷走神經(jīng)刺激器（VNS）對(duì)實(shí)驗(yàn)兔癲癇模型的影響。方法 實(shí)驗(yàn)兔大腦皮層下注射紅藻氨酸，誘導(dǎo)癲癇模型。將螺旋電極安裝在實(shí)驗(yàn)兔迷走神經(jīng)上，VNS植入左側(cè)背部皮下。將18只實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為3組，A組（n=6）僅造模，假手術(shù)不植入VNS； B組（n=6）和C組（n=6）在安裝VNS 1周后進(jìn)行如下操作： B組在造模前2 h開(kāi)啟迷走神經(jīng)刺激； C組造模后立即開(kāi)啟刺激。分別觀察以上3組兔臨床反應(yīng)及腦電波，最后病理學(xué)觀察VNS與相鄰肌肉的生物相容性。結(jié)果 癲癇模型誘導(dǎo)成功，癲癇臨床表現(xiàn)明顯； VNS植入后實(shí)驗(yàn)兔存活率100%， 未見(jiàn)明顯異常。B組癲癇波減少，腦電圖逐漸平穩(wěn)，癲癇臨床表現(xiàn)緩解； 而C組癲癇癥狀有一定改善，病理學(xué)觀察未見(jiàn)VNS相鄰的肌肉組織異常。結(jié)論 植入式VNS對(duì)實(shí)驗(yàn)兔癲癇模型具有一定的干預(yù)效果，且提前開(kāi)啟迷走神經(jīng)刺激效果較好，植入式VNS生物相容性良好。

迷走神經(jīng)刺激器（VNS）； 兔； 癲癇模型

癲癇是一類高發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)疾病，僅我國(guó)就有逾800萬(wàn)癲癇病人。隨著社會(huì)的發(fā)展和人們生活水平的提高，對(duì)此類疾病的治療需求越來(lái)越迫切。近年的研究發(fā)現(xiàn)， 某些癲癇患者存在諸如抗癲癇藥物治療無(wú)效、癲癇發(fā)作頻繁、頑固不愈而又不能準(zhǔn)確定位進(jìn)行手術(shù)治療， 而體內(nèi)植入迷走神經(jīng)刺激器（vagus nerve-stimulator， VNS）是一個(gè)有效方法［1］。

植入式VNS由刺激電極、延長(zhǎng)導(dǎo)線和脈沖發(fā)生器組成。通過(guò)手術(shù)將刺激電極固定于頸部迷走神經(jīng)干， 脈沖發(fā)生器埋置在鎖骨附近皮下。脈沖發(fā)生器發(fā)出的電脈沖通過(guò)一條皮下導(dǎo)線傳到刺激電極，作用于靶點(diǎn)神經(jīng)， 脈沖發(fā)生器發(fā)出高頻電脈沖， 刺激迷走神經(jīng)，有效控制病人癥狀［2］。迷走神經(jīng)刺激不僅能夠減少癲癇的發(fā)作頻率，而且可以減少發(fā)作的時(shí)間和強(qiáng)度。具有風(fēng)險(xiǎn)小，副作用少的優(yōu)點(diǎn)［3］。

治療癲癇的置入式VNS于1997年被美國(guó)FDA批準(zhǔn)使用， 并于1999年引入我國(guó)， 目前已有27 000例患者接受了VNS手術(shù)。然而，神經(jīng)刺激系統(tǒng)的價(jià)格對(duì)我國(guó)很多普通家庭仍是難以承受的。因此，研制國(guó)產(chǎn)置入式VNS，降低患者治療投入，提出了迫切需求。

基于以上情況，作者采用一款國(guó)產(chǎn)抗癲癇VNS系統(tǒng)對(duì)紅藻氨酸誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)兔癲癇模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)。通過(guò)制作兔癲癇模型，評(píng)價(jià)了植入式迷走神經(jīng)刺激器對(duì)癲癇模型臨床癥狀和癲癇波改善效果，考察在癲癇發(fā)作前刺激和發(fā)作后刺激其應(yīng)用效果有否不同，并評(píng)估其生物相容性，為改進(jìn)國(guó)產(chǎn)植入式VNS提供參考。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

普通級(jí)實(shí)驗(yàn)兔18只，雌雄各9只，雌性無(wú)孕，2.0～2.5 kg，由蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心［SCXK（蘇）2013-0002］提供，并按照蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理指導(dǎo)規(guī)范在蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施內(nèi)開(kāi)展實(shí)驗(yàn)［SYXK（蘇）2012-0062］。

紅藻氨酸（KA）10 mg/支，購(gòu)自Sigma公司； 慶大霉素、戊巴比妥鈉注射液購(gòu)自上海第一生化藥業(yè)有限公司； 植入式VNS系統(tǒng)由常州瑞神安醫(yī)療器械有限公司提供， 產(chǎn)品批號(hào)S/N R12115040048； 全數(shù)字化視頻腦電監(jiān)測(cè)分析系統(tǒng)（型號(hào)： cogneuro）由常州博瑞康科技有限公司提供。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)兔體內(nèi)植入VNS用體積分?jǐn)?shù)2.5%戊巴比妥鈉（1.2 mL/kg）耳緣靜脈麻醉實(shí)驗(yàn)兔，使實(shí)驗(yàn)兔平躺，四肢固定，碘伏消毒手術(shù)野。術(shù)者用手術(shù)刀在實(shí)驗(yàn)兔左胸鎖乳突肌做一縱形直切口，長(zhǎng)2～3 cm，然后以此切口用彎頭止血鉗做鈍性分離，尋找左頸動(dòng)脈，迷走神經(jīng)與其伴行。用眼科鑷仔細(xì)游離迷走神經(jīng)2～3 cm，勿損傷神經(jīng)分支和營(yíng)養(yǎng)血管，并用彎頭止血鉗在神經(jīng)下穿線備用。將螺旋電極由末端開(kāi)始仔細(xì)安裝在游離的迷走神經(jīng)上，保證每個(gè)螺旋均與迷走神經(jīng)接觸。最后將螺旋電極導(dǎo)線用縫合線固定在周圍組織上，確保螺旋電極不從迷走神經(jīng)脫落（通過(guò)程控儀測(cè)定導(dǎo)線阻抗，監(jiān)測(cè)螺旋電極與迷走神經(jīng)的接觸情況）。

然后術(shù)者翻轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)兔， 使其側(cè)躺， 同樣備皮、消毒。在左側(cè)背部用手術(shù)刀做一2 cm左右切口，用直無(wú)齒止血鉗使表皮與筋膜分離，將脈沖發(fā)生器植入（電極正面朝上），通過(guò)隧道式導(dǎo)管在筋膜下分離，將螺旋電極導(dǎo)線運(yùn)輸至脈沖發(fā)生器位置，使二者連接鎖緊。脈沖發(fā)生器與神經(jīng)刺激系統(tǒng)建立通訊，用程控儀測(cè)試導(dǎo)線阻抗（需為非開(kāi)路）。測(cè)試完畢，逐層縫合術(shù)口。再次碘伏消毒，術(shù)口關(guān)閉。整個(gè)手術(shù)嚴(yán)格按照無(wú)菌手術(shù)要求操作。縫合術(shù)口后，再次對(duì)刺激系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)試（經(jīng)皮遙測(cè)）。

1.2.2迷走神經(jīng)刺激系統(tǒng)的調(diào)試及術(shù)后護(hù)理在植入VNS手術(shù)后，連續(xù)3 d肌肉注射80萬(wàn)單位慶大霉素。術(shù)后1 d、2 d、3 d分別對(duì)迷走神經(jīng)刺激系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)試。

1.2.3兔癲癇模型建立體積分?jǐn)?shù)2.5%戊巴比妥鈉經(jīng)耳緣靜脈麻醉實(shí)驗(yàn)兔。剔除實(shí)驗(yàn)兔頭部毛發(fā)，弧形剪在實(shí)驗(yàn)兔右側(cè)頂部皮膚做一個(gè)十字形切口，用磨鉆磨一直徑2 mm的骨孔至硬膜，注意勿傷及腦組織。用微量注射器取0.1%的紅藻氨酸溶液5～10 μL，做皮層下注射。緩慢抽出注射器，縫合皮膚術(shù)口。以后在需要時(shí)，可以直接經(jīng)皮穿刺注射紅藻氨酸，獲取所需要的癲癇模型［4］。

1.2.4實(shí)驗(yàn)分組、迷走神經(jīng)刺激及觀察18只實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分3組。A組： 模型組（6只）， 假手術(shù)不安裝VNS，僅造癲癇模型； B組： 造模前刺激組（6只），安裝VNS 1周，開(kāi)啟迷走神經(jīng)刺激2 d，然后用紅藻氨酸誘導(dǎo)癲癇模型； C組： 造模后刺激（6只），安裝刺激器1周，造模后立即開(kāi)啟迷走神經(jīng)刺激。

迷走神經(jīng)刺激模式設(shè)為幅度0.25 mA，脈沖開(kāi)60 s， 脈寬500 μs， 脈沖關(guān)2 min， 頻率30 Hz。啟動(dòng)刺激，測(cè)量并記錄家兔的反應(yīng)，B組C組刺激參數(shù)設(shè)置相同，啟動(dòng)時(shí)間不同。

用全數(shù)字化視頻腦電監(jiān)測(cè)分析系統(tǒng)分別對(duì)正常的家兔進(jìn)行腦電評(píng)測(cè)。電極位置： 地線在鼻上方，參考在耳后，腦電在額頂部且左右各一。安裝方法： 按照電極位置，切開(kāi)確定位置一小區(qū)域，放置盤狀電極， 并緊貼皮膚，用視頻腦電監(jiān)測(cè)分析系統(tǒng)檢測(cè)連接強(qiáng)度， 如導(dǎo)電性不佳則用無(wú)菌生理鹽水滴加在盤狀電極上增強(qiáng)導(dǎo)電性， 醫(yī)用縫合線縫合傷口。

密切觀察模型兔臨床表現(xiàn)，根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分［5，6］。并使用SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和方差檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1　模型兔臨床表現(xiàn)評(píng)分Table 1 Clinical evaluation index in model rabbits

2　結(jié)果

1.1兔癲癇模型

A組兔造模注射紅藻氨酸（5 μg） 30 min左右，兔即出現(xiàn)強(qiáng)直或陣攣肢體抽搐。間隔5～10 min，出現(xiàn)一次抽搐，呈持續(xù)性。注射10 μg，則在30 min后出現(xiàn)全身性抽搐，持續(xù)約5～20 s后恢復(fù)。頭向一側(cè)后傾，呈現(xiàn)觀星狀態(tài)。四肢肌肉張力消失，不能站立。1 h病程發(fā)展到高潮，四肢呈現(xiàn)不斷劃水狀態(tài)，頭努力后傾，四肢與軀干扭曲。2 h后，抽搐程度逐漸減輕。以后間隔1～3 h， 出現(xiàn)抽搐一次。且37.5%兔造模后4 h仍舊有四肢劃水狀態(tài)。選擇注射10 μg模型進(jìn)行評(píng)分， 臨床觀察分值為4分（圖1）。大腦頂葉皮層注射紅藻氨酸后30 min即可記錄到癲癇波，注射5 μg主要捕捉到棘波，注射10 μg，能捕捉到棘波，棘慢綜合波等多種波形，頻率從2～3 Hz到30 Hz， 腦電波波動(dòng)明顯。而正常家兔在清醒平靜狀態(tài)下， 腦電頻率為14～18 Hz，電壓波幅在20～50 mV， 腦電波平穩(wěn)（圖2）。

2.2VNS安裝手術(shù)結(jié)果與存活率

12只實(shí)驗(yàn)兔在造模前陸續(xù)安裝VNS， 安裝手術(shù)后1 h左右，家兔麻醉完全恢復(fù)， 可飲水、進(jìn)食、排便和輕微活動(dòng)。家兔術(shù)后恢復(fù)正常，傷口愈合良好。手術(shù)后1 d就可正常站立、行走和進(jìn)食。術(shù)后3 d時(shí)兔已可正常跑動(dòng)，頸部也可正常彎曲。

脈沖發(fā)生器的通訊、編程、阻抗測(cè)試等功能正常，經(jīng)測(cè)試，手術(shù)后3 d實(shí)驗(yàn)兔VNS與神經(jīng)之間導(dǎo)線阻抗多為3 kΩ，即在正常范圍，長(zhǎng)期測(cè)試沒(méi)有發(fā)生明顯變化。阻抗測(cè)試如圖1所示。手術(shù)后7 d觀察，VNS安裝后存活率100%。所有實(shí)驗(yàn)兔均健康，無(wú)明顯不適反應(yīng)。

2.3VNS干預(yù)及治療觀察

實(shí)驗(yàn)表明，經(jīng)過(guò)迷走提前刺激干預(yù)，以10 μg KA造模后實(shí)驗(yàn)兔癲癇發(fā)作程度明顯下降，肢體和身體抽搐減輕，腦袋向一側(cè)傾斜癥狀減輕并時(shí)間變短，精神狀態(tài)恢復(fù)快，四肢劃水減少，對(duì)癲癇癥狀具有明顯的抑制作用，其臨床指標(biāo)明顯降低為1.67分 （圖1，B組與A組比較P＜0.01， 與 C組比較P＜0.05）。 腦電圖逐漸平穩(wěn)，60 s后棘波減少或消失，迷走神經(jīng)刺激及腦電波如圖2所示。而造模后，再行迷走神經(jīng)刺激， 臨床指標(biāo)有所改善， 為3.33分， 與A組無(wú)顯著差異， 癲癇波未見(jiàn)明顯改善。

圖1　3組兔癲癇發(fā)作的臨床評(píng)價(jià)指標(biāo)Figure 1 The clinical evaluation indexes in 3 groups of rabbit

2.4植入式VNS生物相容性評(píng)價(jià)

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，實(shí)施安死術(shù)，取VNS相鄰肌肉組織部分， 作HE染色后進(jìn)行病理學(xué)觀察（圖3）。結(jié)果顯示植入式VNS對(duì)兔周圍機(jī)體無(wú)明顯影響， 未見(jiàn)與正常組織明顯差異。顯示VNS在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)放置具有一定的生物相容性。

圖2　造模前后迷走刺激干預(yù)后腦電波Figure 2 The epileptiform electrocorticograms after the stimulation of vagus nerve before and after modeling

3　討論

癲癇是一種嚴(yán)重危害人類健康的疾病， 每年新發(fā)病患者65～75萬(wàn)人，其中約有25%的患者發(fā)展為頑固難愈性癲癇［7］，表現(xiàn)為長(zhǎng)期自發(fā)反復(fù)出現(xiàn)癲癇發(fā)作。無(wú)法根治的主要原因在于癲癇反復(fù)發(fā)作的發(fā)病機(jī)制尚未闡明。有研究認(rèn)為癲癇是腦電異常同步所致［8］， 迷走神經(jīng)刺激可引起腦電活動(dòng)的變化［9］， 這一發(fā)現(xiàn)使體內(nèi)植入電刺激器成為極有前景的非藥物抗癇手段。

盡管刺激迷走神經(jīng)降低癲癇發(fā)作的研究已有幾十年歷史， 且經(jīng)臨床和實(shí)驗(yàn)證實(shí)均有明確的抗癲癇作用［10］，但其原理目前尚不完全明確［6］。通過(guò)兔實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，癲癇是由于異常腦電的同步性發(fā)放， VNS可以引起癲癇樣放電的腦電形式發(fā)生改變，長(zhǎng)期刺激后，能使棘波間期延長(zhǎng)。VNS治療癲癇的有關(guān)機(jī)制可能是： 一定頻率的脈沖刺激，對(duì)腦電的同步性發(fā)放造成沖擊，從而抑制異常腦電發(fā)放的同步性，改變了腦電波上的同步性放電為非同步性，這在抑制癲癇發(fā)作中起到重要作用。

KA是一種腦內(nèi)興奮氨基酸遞質(zhì)（谷氨酸）的結(jié)構(gòu)類似物，具有強(qiáng)烈的興奮性神經(jīng)毒作用，能與中樞內(nèi)特異性受體結(jié)合造成選擇性損害。本實(shí)驗(yàn)中，注射KA 30 min左右，臨床可觀察到兔即出現(xiàn)肢體抽搐，呈持續(xù)性。2 h后，抽搐程度逐漸減輕。37.5%兔造模后4 h仍舊有四肢劃水狀態(tài)。根據(jù)模型要求不同，通過(guò)控制注射KA劑量大小，可獲取不同類型的癲癇模型。5 μg KA形成單純發(fā)作模型；10 μg KA可形成復(fù)雜發(fā)作繼全身發(fā)作模型。本模型制作方法較為簡(jiǎn)便，且可改變注入KA劑量以形成不同的癲癇模型并可反復(fù)注射成模。

本實(shí)驗(yàn)中，固定植入式迷走神經(jīng)刺激參數(shù)（改變迷走神經(jīng)刺激參數(shù)實(shí)驗(yàn)已進(jìn)行， 結(jié)果未發(fā)表），在誘導(dǎo)癲癇前開(kāi)始刺激和誘導(dǎo)癲癇后開(kāi)啟刺激對(duì)抑制癲癇發(fā)作具有顯著差異。在癲癇發(fā)作前及時(shí)啟動(dòng)，可產(chǎn)生顯著縮短發(fā)作持續(xù)期的效應(yīng)，甚至可完全抑制癲癇發(fā)作。有文獻(xiàn)報(bào)道［10-12］，癲癇發(fā)作包括癲癇灶的同步放電與向全腦擴(kuò)布兩個(gè)過(guò)程，癇性發(fā)作后開(kāi)啟VNS刺激只影響后一過(guò)程，而癇性發(fā)作前即給予VNS則可干預(yù)兩個(gè)過(guò)程。這可能是預(yù)先給予VNS可產(chǎn)生完全抑制癲癇發(fā)作的原因之一。

迷走神經(jīng)刺激技術(shù)已開(kāi)展多年，但是目前國(guó)內(nèi)還沒(méi)有相關(guān)的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)生產(chǎn)商，國(guó)外主要生產(chǎn)的Cyberonics VNS，其售價(jià)往往要1～2萬(wàn)美元，電池耗盡就要更換新一套設(shè)備，這無(wú)疑既增加了手術(shù)痛苦和風(fēng)險(xiǎn)，又加重了病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而國(guó)內(nèi)的VNS研發(fā)剛剛起步，尚未有成品問(wèn)世［13］。本文通過(guò)建立癲癇兔模型，并對(duì)國(guó)產(chǎn)植入式VNS進(jìn)行測(cè)試，評(píng)價(jià)植入式VNS對(duì)癲癇兔模型的影響。兔實(shí)驗(yàn)表明，其長(zhǎng)期測(cè)試工作狀態(tài)穩(wěn)定，與體內(nèi)組織相容性好。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，在癲癇發(fā)作前開(kāi)始迷走神經(jīng)刺激，抑制癲癇癥狀效果較好，提示在實(shí)際應(yīng)用中如能在癲癇發(fā)作前提前開(kāi)啟迷走神經(jīng)刺激，可能會(huì)增強(qiáng)抗癲癇效果。如能在VNS中加裝腦電分析系統(tǒng)，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腦電癲癇波，提前開(kāi)啟迷走神經(jīng)刺激，不失為一個(gè)可行的研究思路。本實(shí)驗(yàn)的研究?jī)?nèi)容為應(yīng)用型國(guó)產(chǎn)迷走神經(jīng)刺激系統(tǒng)研發(fā)提供了一定的參考。

［1］黨雷， 徐軍， 馮周琴， 等. 迷走神經(jīng)刺激治療癲癇的實(shí)驗(yàn)和臨床研究［J］. 中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志， 1999， 6（21）：86-88.

［2］趙蘭峰， 李菁錦， 安仰原， 等. Effects of vagues nerves stimulation on seizure in animals with epilepsy［J］. 中國(guó)臨床康復(fù)， 2006， 5（15）：184-186.

［3］李菁錦， 趙蘭峰， 安仰原， 等. 迷走神經(jīng)刺激控制紅藻酸誘導(dǎo)大鼠癲癇發(fā)作的電生理學(xué)研究［J］. 中國(guó)臨床康復(fù)， 2003，7（31）：4226-4227.

［4］汪昕， 張言. 迷走神經(jīng)刺激對(duì)紅藻氨酸致癲癇大鼠孤束核內(nèi)谷氨酸受體和γ-氨基丁酸受體的影響［J］. 中華神經(jīng)科雜志， 2000， 33（4）：220-224.

［5］牛廷獻(xiàn)， 羅曉紅， 史智勇. TaqMan 探針定量PCR對(duì)癲癇大鼠腦組織GLAST、GLT- 1表達(dá)變化的研究［J］. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志， 2006， 9（16）： 522-528.

［6］肖育華， 唐云斌， 吳錦銀， 等. 實(shí)驗(yàn)性癲癇大鼠紅細(xì)胞粘附能力、IL-6 與IL- 2 受體水平變化的研究［J］. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志， 2005， 10（5）：288-290.

［7］田國(guó)紅， 段麗， 饒志仁， 等. 頸部迷走神經(jīng)干刺激對(duì)癲癇大鼠腦內(nèi) Fos 樣表達(dá)的影響［J］. 解剖學(xué)報(bào)， 32（4）：334-337.

［8］周樹瞬. 癲癇學(xué)［M］. 成都： 四川科學(xué)出版社， 1987：135.

［9］Schweitzer A， Wright S. Effects on the knee jerk of stimulation of central end of the vagus and various changes in the circulation and respiration ［J］. J Physiol， 1937， 88（3）：459- 475.

［10］ Olejniceak PW， Fisch BJ， Carey M， et al. The effect of vagues nerves stimulation on epilepsy activity recorded from hippolcamal depth electrode［J］. Epilersia， 2001， 42（9）：432-439.

［11］ Van Laerve K， Voncik K， Boon P， et al. Vagues nerves stimulation in refractory epilepsy： SPECT activation study ［J］. Nucl Med， 2000， 41（7）：1145-1154.

［12］ Cohen AA， Britain JW， Wetjen NM， et al. Neurostimulation therapy for epilepsy： current modalities and future direction ［J］. Mayo Clin Proc， 2003， 78（2）：238-248.

［13］ 呂彥恩. 迷走神經(jīng)刺激治療癲癇的電生理機(jī)制及國(guó)產(chǎn)神經(jīng)刺激系統(tǒng)研制的實(shí)驗(yàn)研究［D］. 上海： 第二軍醫(yī)大學(xué)，2006.

Effect of Implantable Vagus Nerve Stimulator on Epilepsy Models Induced by Kainic Acid in Rabbit

YIN Yin1， ZHOU Hui-ying1， XIAO Chun-lan1， ZHANG Xin-guo2， ZHOU Zheng-yu1， WANG Jing1
（1. Laboratory Animal Center， Medical College， Soochow University， Suzhou 215123， China；2. Changzhou RuiShenAn Medical Instrument Co.， LTD， Changzhou 213000， China）

Objective To study the intervention effect of implantable vagus nerve-stimulator （VNS）on epileptic rabbit model induced by kainic acid （KA）. Methods The epileptic model of adult rabbit was established through the micro-injection of kainic acid into the cerebral cortex of animal. To relieve the epilepsy by VNS， the spiral electrode was placed on the vagus nerve， while the stimulator was implanted in subcutaneous tissue of the left animal back. Then 18 rabbits were randomly divided into 3 groups including epilepsy model group （group A， n=6）， VNS pretreatment group （group B， n=6） and the VNS treatment group （group C， n=6）. In group A， none VNS was implanted in the epileptic animal. In group B and C， VNSs were implanted 7 days before the KA injection for the epilepsy induction. The electricity stimulation was performed 2 hours before epilepsy in group B. However， stimulation carried out immediately when epilepsy emerges in group C. Epileptic behaviors and electroencephalography were observed and tested subsequently in all groups. The subcutaneous tissues around VNS were also observed via H. E stain to show the biocompatibility of VNS. Results All the animals showed stable epileptic seizure induced by KA and survived after the VNS plantation without obvious anomaly. The epileptiform electrocorticogram were ameliorated and the epileptic seizure remarkably suppressed in group B and were slightly restrained in group C. The tissues around the implanted VNS showed no obvious distinctions comparing with normal animal tissues in H.E stain. Conclusion VNS could alleviate the seizure of epileptic animal and show better effect when the vagus nerve is stimulated ahead of time. The implantable VNS is also biocompatible with animal subcutaneous tissues.

Vagus nerve-stimulator（VNS）； Rabbit； Epileptic model

Q95-33

A

1674-5817（2015）06-0462-05

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.06.007

2015-05-22

蘇州市應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃（SYN201404）

殷音（1983-）， 女， 主要從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心血管、神經(jīng)模型研究。 E-mail： 108058979@qq.com

王婧（1982-）， 女， 博士研究生， 實(shí)驗(yàn)師， 職業(yè)獸醫(yī)師， 主要從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型與機(jī)體免疫研究。E-mail： wangjing82@suda.edu.cn