蔬菜中八種氨基甲酸酯類農藥殘留的SPE—HPLC分析

張建宇 黃義彬 張莉

摘要：建立了固相萃取-高效液相色譜法同時測定蔬菜中8種氨基甲酸酯農藥（涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、三羥基克百威、涕滅威、克百威、甲萘威和抗蚜威）殘留的方法。蔬菜樣品采用乙腈提取，經氨基小柱凈化，以（乙腈∶甲醇=8∶3，V/V）-水為流動相進行梯度洗脫，流速1.0 mL/min，柱溫40 ℃，C18柱分離，檢測波長220 nm。結果表明，8種農藥在蔬菜中的加標回收率為75.3%～112.5%，相對偏差小于6%。該方法簡便快速、準確度高，符合實際應用需要。

關鍵詞：蔬菜；氨基甲酸酯；固相萃取；高效液相色譜

中圖分類號：O657.7+2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）14-3510-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.14.046

Detecting Eight Kinds of Carbamate Pesticides in Vegetables by SPE-HPLC

ZHANG Jian-yu， HUANG Yi-bin， ZHANG Li

（Agricultural product quality safety supervision and Testing Center of Guiyang，Guiyang， 550004， China）

Abstract： The 8 kinds of carbamate pesticides （including aldicarb sulfoxide， aldicarb sulfone， methomyl， 3-hydroxy carbofuran， aldicarb， carbofuran， carbaryl， pirimicarb） in vegetables by solid phase extraction-high performance liquid chromatography （SPE-HPLC） was investigated. The samples were extracted by acetonitrile and purified by amino solid phase extraction column， and separated gradiently with the mobile phase consisting of acetonitrile methanol mixer（8∶3，V/V） and water on the column of C18 at 40 ℃， the flow rate was 1.0 mL/min，and the wavelengh was detected at 220 nm. The results showed that the recovery rate of 8 kinds of pesticides in vegetable was 75.3%～112.5%，RSD was less than 6%. This method is simple， rapid， accurate for detecting carbamate pesticide residues in vegetables.

Key words： vegetables； carbamate； SPE； HPLC

氨基甲酸酯類農藥是一類高效、廣譜、低毒的殺蟲劑，具有分解快、殘留期短、選擇性強等特點，使用廣泛[1-4]。目前，氨基甲酸酯類農藥的檢測方法主要為柱后衍生熒光檢測HPLC法[5-10]，但該方法需要配套柱后衍生系統和使用衍生化試劑，檢測成本居高不下。本研究運用固相萃取技術對樣品的前處理過程進行優化，以HPLC紫外檢測法建立一種蔬菜中氨基甲酸酯類農藥殘留的檢測技術。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Waters e2695 高效液相色譜儀，TOMTEC全自動勻漿機、EVAP-112氮吹儀，上海安譜CNW氨基固相萃取小柱500 mg、色譜純甲醇、乙腈和二氯甲烷（美國Tedia）。

1.2 方法

1.2.1 提取與凈化 將25.0 g經粉碎均質后的蔬菜置于勻漿機中加入50 mL乙腈，勻漿2 min后過濾，收集濾液至100 mL具塞比色管中，加入6 g氯化鈉振蕩1 min后，室溫靜置30 min。吸取上層清液10.0 mL于小燒杯中，80 ℃氮吹至近干，用2.0 mL丙酮溶解，待凈化。加樣前將氨基柱用4.0 mL甲醇+二氯甲烷（1∶99，V/V）預洗活化，當溶劑液面到達柱吸附層表面時，立即加入提取液，用15 mL離心管收集洗脫液。用2.0 mL甲醇+二氯甲烷（1∶99，V/V）沖洗燒杯后過柱，并重復 1 次，50 ℃氮吹至近干，甲醇溶解定容至2.0 mL，搖勻后過0.2 μm濾膜備用。

1.2.2 色譜條件 C18柱（250 mm×4.6 mm，5.0 μm），柱溫40 ℃，流動相為（乙腈∶甲醇=8∶3，V/V）和水，梯度洗脫見表1，流速1.0 mL/min，檢測波長220 nm。

2 結果與分析

2.1 提取液的選擇

分別比較甲醇、乙腈和丙酮的提取效果，結果表明，甲醇提取效果不佳，丙酮提取雜質較多，干擾較大；乙腈毒性小、提取效果好、干擾少、操作簡單且加標回收率較高。本試驗先用乙腈提取所需組分，再加入過量氯化鈉鹽析，使水相和有機相充分分離，從而使氨基甲酸酯農藥進入乙腈相。因此，本試驗選取乙腈作為提取液。

2.2 凈化條件的選擇

固相萃取法是一種基于液相色譜分離機制的前處理方法，已廣泛應用于農藥殘留檢測工作。本試驗采用C8、苯基柱和氨基固相柱凈化除雜，結果表明氨基固相小柱的凈化效果最佳。

2.3 色譜條件的選擇

流動相對組分分離效果影響顯著。本試驗選用甲醇-水和乙腈-水作為流動相進行梯度洗脫，結果發現無論是甲醇-水和乙腈-水體系都無法分離出8種目標物：甲醇-水體系中出峰較晚的3種物質無法有效分離，而乙腈-水體系中出峰較早的4種物質無法有效分離。筆者先試驗了不同體積比例的有機相體系（乙腈：甲醇分別為4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4），然后將有機相和水梯度洗脫，構成三元流動相體系，確定有機流動相體系為乙腈∶甲醇=8∶3，然后再和水相混合進行梯度洗脫，成功分離出8種目標物組分。

8種目標物組分有不同的最大吸收波長，經試驗分別選取216、218、220、222、224、226和228 nm。最終確定選擇220 nm。

2.4 回收率和精密度

在上述條件下，在蔬菜樣品中加入0.5、1.0和4.0 mg/kg 3種濃度水平的添加回收試驗，每種濃度水平重復3次，結果見表2。在3種添加水平上，8種氨基甲酸酯類農藥的平均回收率為75.3%～112.5%，RSD低于6%，符合農藥多殘留檢測要求。

2.5 檢出限

按S/N=3計算，9 種氨基甲酸酯殺蟲劑及其代謝物的檢出限分別為：涕滅威亞砜0.02 mg/kg，涕滅威砜0.02 mg/kg，滅多威0.01 mg/kg，三羥基克百威0.02 mg/kg，涕滅威0.005 mg/kg，克百威0.01 mg/kg，甲萘威0.01 mg/kg，抗蚜威0.02 mg/kg。

3 小結

該試驗采用乙腈提取蔬菜樣品中的目標物，經氨基小柱進行固相萃取凈化。以（乙腈∶甲醇=8∶3，V/V）-水為流動相進行梯度洗脫，流速1.0 mL/min，柱溫 40 ℃，C18柱分離，檢測波長220 nm，可實現蔬菜中8種氨基甲酸酯類農藥的檢測。該方法分離效果好、準確度和精密度高，操作簡單易行，勿需衍生和熒光檢測，適宜基層機構檢測蔬菜中多種氨基甲酸酯類農藥。

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