生鮮乳檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展

杜兵耀　臧長(zhǎng)江　馬晨　李昊　楊開倫　余雄

摘 要：優(yōu)質(zhì)的生鮮乳是奶業(yè)發(fā)展的必然方向，而生鮮乳中乳脂率、乳蛋白率、菌落總數(shù)和體細(xì)胞數(shù)是衡量?jī)?yōu)質(zhì)乳的核心指標(biāo)， 這些指標(biāo)既關(guān)系到質(zhì)量安全與消費(fèi)者的健康，又決定著牛奶的經(jīng)濟(jì)價(jià)值與核心競(jìng)爭(zhēng)力，其中乳脂肪和乳蛋白的含量與組成是牛奶營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，菌落總數(shù)是環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)，體細(xì)胞數(shù)是奶牛健康狀況指標(biāo)。近年來，國(guó)內(nèi)外牛奶質(zhì)量安全事件頻發(fā)，嚴(yán)重威脅人類健康。筆者通過對(duì)生鮮乳的檢測(cè)技術(shù)的文獻(xiàn)研究，提出相應(yīng)的建議，這對(duì)提高生鮮乳質(zhì)量安全以及保證人們的身體健康和生命安全具有十分重要的意義。

關(guān)鍵詞：生鮮乳；檢測(cè)技術(shù)；質(zhì)量安全

中圖分類號(hào)：TS252.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2015.09.018

Research Progress on Testing Technology of Fresh Milk

DU Bing-yao， ZANG Chang-jiang， MA Chen， LI Hao， YANG Kai-lun， YU Xiong

（College of Animal Science， Xinjiang Agricultural University， Urumqi，Xinjiang 830052， China）

Abstract： High-quality fresh milk is the inevitable direction of developing dairy industry， while butterfat rate， milk protein rate， the total number of colonies and the number of somatic cells in fresh milk are the core indicators of measuring high-quality milk. It involves both the quality and safety and the health of consumers， and decides the economic value and the core competitiveness of milk. The milk fat and milk protein content and composition are the main material basis of milk nutrition quality and the total number of colonies is an indicator of environmental health and the number of somatic cells is the cow health indicator. In recent years， milk quality security incidents at home and abroad occur frequently， posing a serious threat to human health. In this paper， based on the literature research of testing technology of the fresh milk， the corresponding proposal is put forward to improve the quality and safety of fresh milk and ensure people's health and life safety.

Key words： fresh milk； testing technology； quality and safety

近幾年牛奶質(zhì)量安全事件時(shí)有發(fā)生，尤其是2008年發(fā)生的“三鹿奶粉事件” ，2009 年底又出現(xiàn)多起奶制品三聚氰胺超標(biāo)案件，生鮮乳質(zhì)量安全已經(jīng)成為決定我國(guó)奶制品行業(yè)生死存亡的問題[1]。國(guó)家采取各項(xiàng)檢測(cè)措施不斷加強(qiáng)生鮮乳質(zhì)量安全監(jiān)管，體制更加健全，保障更加有力，也取得了明顯效果。本研究主要從霉菌毒素、藥物殘留、體細(xì)胞數(shù)和菌落總數(shù)等方面進(jìn)行綜述[2]。

1 生鮮乳霉菌毒素的檢測(cè)技術(shù)

霉菌毒素污染是食品質(zhì)量安全的重要問題，對(duì)人類的健康構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。目前，世界各國(guó)已經(jīng)開始積極檢測(cè)牛奶中霉菌毒素的污染狀況，大約有20種在食品和飼料中的含量較為顯著，其中的玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素、伏馬菌素、赭曲霉毒素等因具有高毒性和致癌性而備受關(guān)注。目前檢測(cè)霉菌毒素的方法主要有酶聯(lián)免疫法、薄層層析法、高效液相色譜法、超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等[3]。

1.1 酶聯(lián)免疫法在生鮮乳霉菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用

酶聯(lián)免疫法是當(dāng)今最具代表性的快速、高效的檢測(cè)方法，且方法簡(jiǎn)單易于操作，被廣泛應(yīng)用于霉菌毒素分析檢測(cè)[4]，但由于該方法易出現(xiàn)假陽(yáng)性等缺點(diǎn)限制了其進(jìn)一步應(yīng)用[5]。

1.2 薄層層析法在生鮮乳霉菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用

薄層層析法（TLC）是對(duì)霉菌毒素進(jìn)行定性或定量檢測(cè)的方法[6]，濃縮后的待測(cè)樣品提取液通過單向展開法在薄層上分離后， 對(duì)霉菌毒素的 Rf值和熒光顏色進(jìn)行觀察分辨， 再根據(jù)薄層色譜板上顯示熒光的最低檢出量進(jìn)行定量。利用薄層色譜法檢驗(yàn)得出的結(jié)果準(zhǔn)確， 操作方法簡(jiǎn)單，但該方法運(yùn)用的試劑多， 檢驗(yàn)周期較長(zhǎng)。

1.3 高效液相色譜法在生鮮乳霉菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用

高效液相色譜法較早用于霉菌毒素的檢測(cè)，經(jīng)常用的檢測(cè)器主要有熒光、二極管陣列、紫外等檢測(cè)器，是目前使用較為廣泛的霉菌毒素的檢測(cè)方法。采用高效液相-熒光檢測(cè)法檢測(cè)生鮮乳中赭曲霉素A，樣品可以跳過液-液提取的步驟，濃縮后經(jīng)過免疫親和柱洗脫，進(jìn)行檢測(cè)，不需要使用有毒試劑（有機(jī)氯等）。采用高效液相-熒光檢測(cè)法時(shí)，被檢測(cè)物要具有很好的熒光特性。該方法易于操作、靈敏性高，但是只能檢測(cè)一類或者一種霉菌毒素。

1.4 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法在生鮮乳霉菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用

隨著液質(zhì)聯(lián)用法的不斷發(fā)展和完善，超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法因其靈敏度高、特異性強(qiáng)、選擇性高等特點(diǎn)已成為霉菌毒素分析最普遍的方法。利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法可同時(shí)測(cè)定生鮮乳中黃曲霉毒素M1、赭曲霉素A、玉米赤霉烯酮、伏馬菌素B1等多種霉菌毒素。但是該方法具有儀器設(shè)備比較昂貴、可信性差、檢測(cè)成本高等缺陷，有待改進(jìn)。

2 生鮮乳中藥物殘留的檢測(cè)技術(shù)

在獸醫(yī)臨床上常用藥物治療奶牛的各種疾病，而由此引起的藥物殘留是一個(gè)全球性的問題。藥物在生鮮乳中的殘留會(huì)通過食物鏈傳播，從而嚴(yán)重危害人類的健康。生鮮乳中藥物殘留的檢測(cè)是保證生鮮乳質(zhì)量安全的重要環(huán)節(jié)，因此建立對(duì)生鮮乳中藥物的定性定量檢測(cè)方法十分重要。藥物殘留主要包括激素類藥物殘留、農(nóng)藥殘留、抗生素等。

2.1 生鮮乳中激素類藥物殘留的檢測(cè)技術(shù)

激素類藥物（Hormone drugs）是把人體或動(dòng)物激素（包括與激素結(jié)構(gòu)、作用原理相同的有機(jī)物）作為有效成分的藥物。在奶牛飼養(yǎng)過程中，為了促進(jìn)奶牛生長(zhǎng)、提升牛奶的產(chǎn)量，奶農(nóng)會(huì)違規(guī)使用激素類藥物，從而導(dǎo)致牛奶中激素的殘留。當(dāng)機(jī)體攝入含有激素類藥物的生鮮乳后，殘留的激素會(huì)對(duì)機(jī)體的健康構(gòu)成很大的威脅，殘留的激素中生長(zhǎng)激素、甲狀腺激素和性激素對(duì)機(jī)體造成的影響最大。當(dāng)食用的生鮮乳或其制品殘留有性激素時(shí)，會(huì)增加患更年期乳腺癌或者前列腺癌的幾率。在檢測(cè)生鮮乳中激素類藥物殘留時(shí)，因?yàn)榧に仡愃幬锝Y(jié)構(gòu)相似、理化性質(zhì)相近，其殘留程度和生理水平接近，所以對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性要求較高，并且需要高度靈敏的分析設(shè)備和有效的樣品前處理。因此需要利用可靠的檢測(cè)技術(shù)來測(cè)定生鮮乳中激素類藥物的殘留。目前，生鮮乳中的激素類藥物殘留的檢測(cè)方法主要分為免疫分析法和色譜質(zhì)譜分析法[7]。

2.1.1 免疫分析法檢測(cè)生鮮乳中激素類藥物的殘留 免疫分析法是利用抗體和抗原的特異性結(jié)合來檢測(cè)生鮮乳中激素類藥物殘留的方法，可分為酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）和放射免疫分析法（RIA）。酶聯(lián)免疫分析法可以滿足生鮮乳中激素殘留的檢測(cè)要求。但是該方法的檢測(cè)結(jié)果易出現(xiàn)假陽(yáng)性，當(dāng)出現(xiàn)初篩陽(yáng)性結(jié)果時(shí)要用其他方法驗(yàn)證。放射免疫分析法，是將靈敏度高的放射性示蹤技術(shù)和特異性很高的免疫化學(xué)技術(shù)結(jié)合起來，可以對(duì)微量的生理活性物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)定量，該方法將免疫分析和放射性標(biāo)記相結(jié)合，可以對(duì)極其微量的生物活性物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，具有一定的優(yōu)越性且樣品處理簡(jiǎn)單，具有高度的特異性和靈敏性，但是該方法作為單一的測(cè)定方法只可以檢測(cè)幾種特定的激素類藥物，且其半衰期較短，并具有少量輻射，從而限制了該方法的廣泛應(yīng)用。

2.1.2 色譜質(zhì)譜分析法檢測(cè)生鮮乳中激素類藥物的殘留 色譜法主要是依據(jù)待測(cè)樣品在相應(yīng)相態(tài)的合理性分配、吸附、交換、排斥滲透等性質(zhì)的不同，達(dá)到分離的作用，然后順序檢測(cè)各組的含量。主要有氣相色譜法（GC）、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）、 高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS）[8]。氣相色譜法（GC）是以氣體作為流動(dòng)相的柱色譜分離分析方法，氣象色譜分析具有高度的靈敏性和很強(qiáng)的選擇性，操作簡(jiǎn)單，但是該方法使用的樣品需要?dú)饣ㄐ阅芰Σ睿瑧?yīng)用范圍受到限制。氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）分離效能高，選擇性好，靈敏度高，定量和定性能力強(qiáng)，但是該方法使用時(shí)，樣品前處理要求高、衍生過程繁瑣、樣品需要?dú)饣⒃O(shè)備昂貴且使用范圍有限。高效液相色譜法（HPLC）分辨率高、速度快、使用范圍廣，但是該方法分離效率低、定性能力差、色譜柱易污染。液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS）不需對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行衍生處理，速度快檢測(cè)限低，操作簡(jiǎn)便，而且靈敏度高，測(cè)量范圍廣，但是該方法對(duì)樣品前處理要求高，設(shè)備昂貴。除以上目前所普遍使用的方法外，隨著科技的進(jìn)步，許多新的免疫技術(shù)逐步被開發(fā)并應(yīng)用于藥物殘留的檢測(cè)，如熒光偏振免疫法、膠體金免疫法、時(shí)間分辨熒光法、動(dòng)注射免疫法。

2.2 生鮮乳中獸藥殘留的檢測(cè)技術(shù)

獸藥在畜牧業(yè)的大量應(yīng)用，不可避免地造成生鮮乳中藥物的殘留。通過食物鏈被人們長(zhǎng)時(shí)間的攝入后，會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生較大的危害，主要表現(xiàn)以下幾個(gè)方面：（1）有些人對(duì)抗生素過敏，攝入含有抗生素的生鮮乳時(shí)會(huì)產(chǎn)生不同程度的過敏反應(yīng)，嚴(yán)重的會(huì)危及生命；（2）長(zhǎng)期攝入含有抗生素的生鮮乳等于長(zhǎng)期攝入了低劑量的抗生素，會(huì)使機(jī)體內(nèi)的細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性；（3）生鮮乳中殘留獸藥會(huì)影響其品質(zhì)，同時(shí)也影響其本身的發(fā)酵，使其深加工產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量降低，給生產(chǎn)者造成經(jīng)濟(jì)損失。

隨著生鮮乳獸藥殘留問題變得日益嚴(yán)重，獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)也得到全面的發(fā)展。目前，有關(guān)生鮮乳中檢測(cè)獸藥殘留的主要方法有：免疫分析法、微生物檢測(cè)法[9]。

2.2.1 免疫分析法在生鮮乳獸藥殘留的檢測(cè)中的應(yīng)用 根據(jù)標(biāo)記物的不同，將免疫分析法分為酶聯(lián)免疫分析法、放射性免疫分析法、熒光免疫分析法、免疫層析法等[10]。目前用于檢測(cè)獸藥殘留的免疫分析方法主要有兩類：一類是把抗原抗體識(shí)別作為核心反應(yīng)，主要是酶聯(lián)免疫吸附法，另一類是以受體配體識(shí)別作為核心反應(yīng)，利用配體受體間的特異性來進(jìn)行檢測(cè)的方法，該方法變異系數(shù)低，靈敏度高。

2.2.2 微生物檢測(cè)法在生鮮乳獸藥殘留的檢測(cè)中的應(yīng)用 微生物檢測(cè)法又稱微生物抑制試驗(yàn)（MIT），是最早應(yīng)用于檢測(cè)生鮮乳中抗生素的方法，是依據(jù)抗生素對(duì)微生物生理機(jī)能和代謝的抑制作用來定量或者定性地確定樣品中的抗生素殘留[11]。常用的微生物檢測(cè)技術(shù)有杯碟法（CP）、紙片法（PD）、氧化三苯基四氮唑法（TTC）[12]。生鮮乳中獸藥殘留的檢測(cè)以氧化三苯基四氮唑法（TTC）和紙片法（PD）為主。氧化三苯基四氮唑法是為定性檢測(cè)生鮮乳中獸藥殘留的方法，該方法簡(jiǎn)單、無(wú)特殊設(shè)備，但用該方法檢測(cè)較為耗時(shí)[13]。紙片法（PD）常用的方法有枯草桿菌紙片檢測(cè)法和嗜熱脂肪桿菌紙片檢測(cè)法[8]。枯草桿菌紙片檢測(cè)法是將濾紙圓片吸滿待測(cè)乳樣后放在接種枯草桿菌的瓊脂平皿上，然后放入一個(gè)含有標(biāo)準(zhǔn)抗生素的陽(yáng)性對(duì)照?qǐng)A片。將培養(yǎng)皿置于32 ℃下培養(yǎng)17～24 h后，觀察有無(wú)抑菌圈的出現(xiàn)，為了確定陽(yáng)性物質(zhì)是否是青霉素，需對(duì)加熱后的乳樣用青霉素酶處理，來滅活乳樣中的青霉素，然后再進(jìn)行檢測(cè)。該方法檢測(cè)的結(jié)果易出現(xiàn)假陽(yáng)性，且耗時(shí)較長(zhǎng)[12]。

2.3 生鮮乳中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)

眾所周知，農(nóng)藥是人們向環(huán)境中投放的數(shù)量大、毒性廣的一類屬于毒害性質(zhì)的化學(xué)物質(zhì)，最終直接暴露在生態(tài)環(huán)境中。殘留、富集是農(nóng)藥不可避免的環(huán)境行為。因此，農(nóng)藥殘留是造成食品質(zhì)量安全問題的重要因素之一，其化學(xué)成分對(duì)人體具有較大的毒害性，同時(shí)人們也一直重視生鮮乳的農(nóng)藥殘留問題。農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)是對(duì)復(fù)雜混合物的微量組分進(jìn)行準(zhǔn)確分析的技術(shù)，此項(xiàng)技術(shù)要求微量操作手段，特異性強(qiáng)，靈敏度高。由于農(nóng)藥品種多，性質(zhì)和化學(xué)結(jié)構(gòu)形式多樣且其組成成分復(fù)雜，有些農(nóng)藥還需要對(duì)其降解物進(jìn)行檢測(cè)。農(nóng)藥的轉(zhuǎn)換物和代謝物等也給生鮮乳中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)提出了更高的要求，需要靈敏度高、可行性好的檢測(cè)技術(shù)。目前農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)常用的方法有儀器分析法、免疫分析法、酶抑制法、生物傳感器法等[13]。

2.3.1 儀器分析法在生鮮乳農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用 氣相色譜、液相色譜分析法是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)生鮮乳中農(nóng)藥殘留最常規(guī)的方法[14-15]，此外，還有色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC/HPLC-MS）、 SFC等高效快速檢測(cè)技術(shù)已進(jìn)入實(shí)用階段。氣相色譜法（GC）是目前應(yīng)用最為廣泛的方法，大約70 %的農(nóng)藥殘留檢測(cè)是用氣相色譜法來進(jìn)行的。超臨界流體色譜法是用超臨界流體為流動(dòng)相的檢測(cè)技術(shù)，能彌補(bǔ)氣相色譜法和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的不足。儀器分析方法未大量用于生鮮乳的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，由于其對(duì)操作人員要求相對(duì)較高，儀器較為昂貴等缺點(diǎn)，使該方法的應(yīng)用受到了限制。

2.3.2 免疫分析法在生鮮乳農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用 生鮮乳中農(nóng)藥殘留檢測(cè)常用的免疫分析法有放射性免疫分析法、酶聯(lián)免疫分析法和熒光免疫分析法。由于熒光免疫分析法存在非特異性問題，放射免疫分析法污染環(huán)境，盡管這兩種方法靈敏度高，但是它們的技術(shù)程序較為復(fù)雜，需要特殊的儀器設(shè)備，因而限制它們的廣泛應(yīng)用。酶聯(lián)免疫法操作簡(jiǎn)單，但是該方法易出現(xiàn)假陽(yáng)性且不適用于大量樣品的分析。

2.3.3 酶抑制法在生鮮乳農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用 酶抑制法是較為成熟的一種生鮮乳中農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)。酶抑制法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生鮮乳中農(nóng)藥殘留的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，成為儀器分析法的有效補(bǔ)充方法。雖然目前酶抑制法只能對(duì)有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行測(cè)定，但仍是生鮮乳中農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)的首選方法之一。酶抑制法的優(yōu)點(diǎn)是快速、操作方法簡(jiǎn)單、無(wú)需儀器或儀器較為簡(jiǎn)單，適用于現(xiàn)場(chǎng)的定性和半定量測(cè)定及多樣品的篩選檢測(cè)。但該方法只適用于部分農(nóng)藥的快速檢測(cè)，并且其靈敏度和所使用的酶、顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度都有密切的關(guān)系，因此具有一定的局限性。

2.3.4 生物傳感器在生鮮乳農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用 生物傳感器是目前農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)中的研究熱點(diǎn)，使用該方法檢測(cè)的樣品一般不需要前期處理，也不需要另外添加其它的試劑；樣品的檢測(cè)和被測(cè)成分的分離可以同時(shí)完成；可以實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)樣品的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和自動(dòng)化的測(cè)量；樣品的需要量少，并且可反復(fù)多次使用。但是生物傳感器檢測(cè)的重現(xiàn)性和結(jié)果穩(wěn)定性存在著問題，影響了該技術(shù)的推廣應(yīng)用。

3 生鮮乳中體細(xì)胞數(shù)和菌落總數(shù)的檢測(cè)技術(shù)

生鮮乳體細(xì)胞數(shù)（SCC）是指每毫升生鮮乳中所含的體細(xì)胞個(gè)數(shù)[16]。體細(xì)胞數(shù)是劃分生鮮乳的品質(zhì)、保證乳制品質(zhì)量安全、診斷奶牛的乳房炎和檢測(cè)奶牛飼養(yǎng)管理水平的重要參考指標(biāo)。菌落總數(shù)（TBC）是指每毫升生鮮乳中含有的細(xì)菌個(gè)數(shù)。生鮮乳中的菌落總數(shù)是衡量生鮮乳質(zhì)量安全的一個(gè)重要指標(biāo)，它反映了生鮮乳質(zhì)量的優(yōu)劣。因此體細(xì)胞數(shù)和菌落總數(shù)的檢測(cè)具有很重要的意義。目前生鮮乳體細(xì)胞檢測(cè)常用的方法主要有鏡檢計(jì)數(shù)法、庫(kù)爾特計(jì)數(shù)儀測(cè)定法、加利福尼亞細(xì)胞數(shù)測(cè)定法（CMT）、熒光顯微鏡計(jì)數(shù)法等。

3.1 鏡檢計(jì)數(shù)法在生鮮乳體細(xì)胞檢測(cè)中的應(yīng)用

鏡檢計(jì)數(shù)法是用生鮮乳定量涂片，然后根據(jù)鏡檢換算其中每毫升乳樣中的體細(xì)胞數(shù)量，該方法準(zhǔn)確，設(shè)備要求低，可用于校正分析儀，但該方法較費(fèi)時(shí)，不能作為現(xiàn)場(chǎng)快速和大量樣品時(shí)使用[17]。庫(kù)爾特計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)法可以直接讀出每毫升樣品的生鮮乳體細(xì)胞數(shù)，此方法前處理繁瑣且時(shí)間長(zhǎng)。加利福尼亞細(xì)胞數(shù)測(cè)定法（CMT）操作簡(jiǎn)單，價(jià)格相對(duì)低廉，能夠現(xiàn)場(chǎng)快速判斷出哪個(gè)乳頭患有乳房炎。其測(cè)定原理是利用強(qiáng)堿和表面活性劑破壞體細(xì)胞膜，細(xì)胞破裂后釋放出包含的內(nèi)容物，進(jìn)而交聯(lián)或者與試劑或者乳成分相互作用生成絮狀沉淀物或者生成凝塊，根據(jù)生成的凝塊或者沉淀的數(shù)量，可以衡量生鮮乳中體細(xì)胞數(shù)的范圍。

3.2 熒光顯微鏡計(jì)數(shù)法在生鮮乳體細(xì)胞檢測(cè)中的應(yīng)用

熒光顯微鏡計(jì)數(shù)法采用的是熒光染色劑。此法相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法背景較為清晰，但制片、鏡檢過程要占用大量的時(shí)間，因此不適合于大量快速的檢測(cè)應(yīng)用。

3.3 生鮮乳中菌落總數(shù)的檢測(cè)技術(shù)

目前生鮮乳中菌落總數(shù)檢測(cè)常用的方法主要有平皿菌落計(jì)數(shù)法、Bactoscan FC法、電阻抗法、生物發(fā)光ATP法[18]。

平皿菌落計(jì)數(shù)法是常用的活菌計(jì)數(shù)法，但該方法測(cè)得的結(jié)果小于實(shí)際數(shù)值。操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，但是時(shí)間較長(zhǎng)。Bactoscan FC法是檢測(cè)分析生鮮乳的質(zhì)量和組分的一種方法。該方法是針對(duì)單個(gè)細(xì)胞計(jì)數(shù)，準(zhǔn)確、快速、耗時(shí)短，但是價(jià)格昂貴。電阻抗法檢測(cè)細(xì)菌總數(shù)是根據(jù)微生物的生長(zhǎng)代謝將培養(yǎng)基中的碳水化合物轉(zhuǎn)化成氨基酸和乳酸等，根據(jù)儀器記錄培養(yǎng)基的電阻抗波動(dòng)的DT時(shí)間來檢測(cè)微生物的數(shù)量，該方法檢測(cè)周期短、操作簡(jiǎn)便。生物發(fā)光ATP技術(shù)，細(xì)胞內(nèi)的ATP含量反映細(xì)胞的存活活力，當(dāng)細(xì)胞處于受損或死亡狀態(tài)時(shí)其ATP含量將下降或消失，生物發(fā)光ATP技術(shù)就是利用ATP生物發(fā)光細(xì)胞內(nèi)的ATP值來計(jì)算活菌的數(shù)量[19]。

4 結(jié)論與展望

隨著人們對(duì)高品質(zhì)生鮮乳及乳制品的需求，快速、高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)手段在生鮮乳及乳制品生產(chǎn)應(yīng)用中對(duì)實(shí)現(xiàn)乳業(yè)生產(chǎn)過程的便捷高效的管理以及提高乳制品的質(zhì)量具有重要意義。目前，不斷出現(xiàn)的新檢測(cè)技術(shù)因其存在的優(yōu)越性和局限性限制了它們?cè)谌橹破沸袠I(yè)中的應(yīng)用。因此，以生鮮乳及乳制品的最終消費(fèi)者為考慮對(duì)象，探索新型的檢測(cè)技術(shù)，以便捷、高效、準(zhǔn)確相結(jié)合為特點(diǎn)的檢測(cè)技術(shù)將成為未來研究的主要方向。同時(shí)，探索先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)也是提高人們生活水平和乳制品行業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力不可缺少的。

參考文獻(xiàn)：

[1] 郭利亞.淺析我國(guó)生鮮乳質(zhì)量安全監(jiān)管及對(duì)策[J].食品安全，2012，48（12）：42-45.

[2] 王加啟.牛奶質(zhì)量安全主要風(fēng)險(xiǎn)因子分析——總述[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2012，39（2）：1-5.

[3] 蒙君麗.酶聯(lián)免疫法對(duì)生鮮乳中黃曲霉毒素M1的快速檢測(cè)[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2013（40）：39-41.

[4] Ann-Kristin J N，Estelle C C A，Karin B，et al. Evaluation of the specificity of three enzyme-linked immunosorbent assays for detection of antibodies against Salmonella in bovine bulk milk [J].Acta Veterinaria Scandinavica，2013，55（1）：1-7.

[5] Sun R Y，Zhuang H S. An indirect competitive biotin-streptavidin enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of dimethyl phthalate （DMP） in milk and milk products[J].Journal of Environmental Science and Health，2015，50（4）：275-284.

[6] 王帥.牛奶中赭曲霉毒素檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2013（40）：78-81.

[7] 張敬敬.畜產(chǎn)品中激素殘留檢測(cè)方法的進(jìn)展[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2012，24（11）：1 617-1 623.

[8] 劉長(zhǎng)姣.色譜技術(shù)在檢測(cè)牛奶中激素類藥物殘留的應(yīng)用[J].食品工業(yè)科技，2014（9）：381-391.

[9] 顧欣.牛奶中青霉素殘留的微生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)研究及應(yīng)用[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005：1-36.

[10] 陳云.乳中抗生素殘留及其檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J].中國(guó)乳品工業(yè)，2012，40（9）：35-38.

[11] 寧海容.牛奶中抗生素殘留檢測(cè)研究進(jìn)展[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2012，39（8）：227-230.

[12] 趙金蓮.牛乳中抗菌類藥物、雌激素殘留檢測(cè)及其營(yíng)養(yǎng)素含量的研究[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008：1-57.

[13] 王鑫.牛奶中藥物殘留檢測(cè)方法的研究[D].成都：西華大學(xué)，2009：1-59.

[14] 王彥娟.牛乳中農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法的研究[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007：1-63.

[15] 駱洪，李秀萍，張福金，等.生鮮乳中硫氰酸根的背景調(diào)查分析[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技，2013（5）：46-47.

[16] Dosogne H. Differential leukocyte count method for bovine low somatic cell count milk[J]. Journal of Dairy Science， 2003， 86：828-834.

[17] 薛冬梅.體細(xì)胞鏡檢方法和SCC與原奶化學(xué)變化性粘度相關(guān)性研究[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009：1-67.

[18] 朱紅.生鮮乳中菌落總數(shù)的監(jiān)測(cè)與探討[J].乳業(yè)科學(xué)與技術(shù)，2014，37（4）：9-11.

[19] Griffiths M W. Applications of bioluminescence in the dairy industry[J]. Dairy Science， 1993， 76： 3 118-3 125.