1例肺表面活性物質功能障礙病例分析

趙綺

【摘要】目的：討論1例肺表面活性物質功能障礙所引起的臨床癥狀和基因表達。方法：收集在2012年廣西醫科大學第一附屬醫院基因確診的1例肺表面活性物質功能障礙患兒的臨床資料，結合其基因診斷，分析肺表明活性物質功能障礙病例的臨床特點及基因型。結果：該患兒為足月新生兒，以出生后出現持續的呼吸困難、低氧血癥為主要表現，影像學表現為雙肺彌漫性病變，基因檢測出ABCA3上存在6種突變。結論：對于伴有肺泡表面活性物質缺乏或常規化驗實驗檢查解釋不了的血氧不足的呼吸衰竭的足月新生兒，應高度懷疑存在肺表面活性物質功能障礙。

【關鍵詞】肺表面活性物質缺乏；基因突變

【Abstract】Objective：To investigate the clinical phenotype， related gene mutation and their relations of one case Inborn Errors of Surfactant Metabolism. Method：Collecting the clinical data of one case of Inborn Errors of Surfactant Metabolism in the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University， in 2012， whom diagnosed by gene ， combined with its genetic diagnosis， analysis its Clinical characteristics and genotype. Results： The child was a full-term newborn， continuing breathing difficulties after birth and hypoxemia as the main performance， imagine showed diffuse lung disease， genetic testing prensenced six kinds of mutation on ABCA3 gene. Conclusions：For the lack of pulmonary surfactant or routine laboratory experiment can not examine explain hypoxemia respiratory failure in full-term newborns， we should be highly suspected pulmonary surfactant dysfunction.

【Key words】Inborn Errors of Surfactant Metabolism； gene mutation

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1671-8801（2015）03-0027-02

肺表面活性物質（pulmonary surfactant，PS）主要成分為90%脂質和10%蛋白質類，其脂質主要有卵磷脂（PC）和二棕櫚酰磷脂膽堿（PC），其功能主要是減少肺泡表面張力，蛋白質主要包括SP-A、SP-B、SP-C、SP-D。編碼表面活性蛋白B（SP-B）和C（SP-C）以及磷脂轉膜蛋白基因ABCA3的突變與肺表面活性物質功能障礙有關。肺表面活性物質產生和功能的遺傳紊亂可導致新生兒和較大兒童的嚴重肺源性疾病，其蛋白基因的常見突變也可能是其他常見肺疾病發展和改變過程中重要的危險因素。

臨床資料及基因診斷

男，21天12小時，廣西河池市人，患兒系其母第2胎第2產，為足月剖宮產出生，出生體重3700g。生后即出現呼吸不規則，生后1分鐘Apgar評分9分（呼吸扣1分），給予吸氧處理后5分鐘、10分鐘后評分均為9分，當時患兒反應差，哭聲低弱，口周稍紫紺，無進行性呼吸困難、氣促、發熱、咳嗽等，當地醫院胸片提示兩上、中、下肺野滿布斑片狀密度不均呈增高陰影，右肺尤著。查心臟彩超示：1.三尖瓣輕微關閉不全2.卵圓孔未閉或房間隔小缺損，房水平向右分流3.輕度肺動脈高壓頭顱；B超：右側尾狀核頭部處異常強回聲性質待查，考慮室管膜下出血。住院10天，予哌拉西林舒巴坦鈉、頭孢噻肟鈉聯合抗感染，呋塞米人血白蛋白、人免疫球蛋白等對癥治療，患兒仍反復低氧血癥，離氧不耐受。為進一步治療于患兒11日齡轉入柳州市婦幼保健院治療。查血常規：白細胞：14.67×10*9/L，中性粒細胞：54.4%，淋巴細胞30.8%，血紅蛋白：116g/L，血小板：282×10*9/L。會診河池市婦幼頭顱CT提示：兩側大腦半球，額頂葉白質密度稍低，可見第五腦室形成，余未見異常。肺部CT示：兩肺可見大片實變影，密度不均，可見支氣管充氣征，邊緣毛躁，相鄰局部胸膜增厚。行纖支鏡檢查肺泡灌洗液外觀呈白色牛奶樣。予以哌拉西林他唑巴坦抗感染，腦蛋白水解物營養腦細胞等處理，后改為亞胺培南抗感染治療，癥狀反復無明顯改善。于21日齡轉入廣西壯族自治區婦產醫院治療，查腦脊液：有核細胞：8個/mm3，葡萄糖：2.32mmol/l，總蛋白0.76g/l，入院后予亞胺培南聯合大扶康抗感染、吸氧、輸液等對癥支持治療。治療效果不佳?；純河谌朐捍稳赵绯?1：00呼吸困難明顯，監測血氧降至60%，予CPAP呼吸支持處理后，呼吸困難稍緩解，為進一步治療急診轉入我院入我科。入院時體格檢查：頸軟，胸廓桶狀。兩肺呼吸音粗。可聞及少許細濕啰音。四肢肌張力偏高，原始反射減弱。呼吸困難指數：4分。休克評分：2分。完善相關檢查：白細胞計數15.70*10～9/L，紅細胞計數2.85*10～12/L，血紅蛋白92.00g/l，血小板計數347.00*10～9/L，中性粒細胞百分比0.457。ESR、CRP正常。TORCH陰性。生化：肝腎功、電解質、心肌酶檢查未見明顯異常。免疫功能：總T細胞80.20%，CD4+T細胞59.00%，CD8+T細胞19.70%，NK細胞2.23%。免疫球蛋白G11.29g/L，免疫球蛋白A0.09g/L，免疫球蛋白M1.02g/L。血清鐵蛋白402.64ng/ml。細菌毒素、真菌葡聚糖檢查陰性。血、尿CMV-DNA<5.0×10～2拷貝。胸部CT平掃+支氣管三維重建：雙肺彌漫性病變，病灶以滲出性實變為主。心超：房間隔小缺損（卵圓孔未閉可能性大）。為患兒行支氣管鏡檢查。行支氣管肺段灌洗約50ml，回收約28ml，外觀為乳白色，有絮狀物。其肺泡灌洗液細胞學檢查示：PAS染色陽性，阿辛藍及粘液卡紅染色吞噬細胞胞漿內未見陽性物質，細胞間可疑陽性。兩次痰培養結果：鮑曼不動桿菌，對頭孢他啶、頭孢曲松、氨芐西林舒巴坦、亞胺培南、哌拉西林他唑巴坦等藥物敏感，可培養出白色念珠菌。加用頭孢他啶抗感染治療7天及對癥支持處理?；純后w溫平穩，無咳嗽，停氧觀察36h患兒無紫紺、氣促、喘息等癥狀，吃奶反應較前好轉。為協助患兒診斷，經取得患兒家屬同意后，收集患兒外周血（ACD抗凝）1-2ml，提取外周血細胞總DNA，PCR擴增ABCA3的DNA，瓊脂糖膠回收純化PCR產物直接進行雙向測序。測序結果與NCBI BLAST上的的ABCA3基因序列進行比對。結果發現：患兒ABCA3基因第10外顯子上的c.1059C>T突變（F353F）以及內含子上的5種突變（c.447+24C>A、c.447+119A>G、874-377T>A、991-20C>T及1111+226A>G）。

討論

肺表面活性物質功能障礙仍屬于罕見病，近年來在國內逐漸引起重視。ABCA3基因是最常見的引起肺表面活性物質代謝異常的基因。[1]但是目前對伴有ABCA3突變的肺疾病的病理學、流行病學及在肺組織中的具體作用的分子機制尚不清楚。

ABCA3是位于16號染色體上大的基因（16p13.3），包含30個編碼外顯子，編碼1704個氨基酸。ABCA3基因的突變可發生于整個基因片段，包括錯義、框架和剪接突變以及少部分插入和突變缺失，可以確定的突變有150多種。[2]ABCA3基因異?？蓪е翧BCA3蛋白的表達缺乏、減少或功能表達的異常，影響SP-B和SP-C的加工、轉運過程，進而破壞肺泡表面活性物質的動態平衡，導致新生兒急性呼吸窘迫綜合征，同時增加肺間質性疾病的發生。在新生兒或者嬰兒期間發生呼吸困難或者呼吸窘迫綜合征的多因為肺表面活性物質缺乏。

ABCA3基因突變突變并不局限于單一民族或種族。所有的患兒表現出的臨床癥狀和影像學結果與肺表面活性物質缺乏一致。在本例患兒基因突變中。本例患兒Exon10上的1059C>T突變然后編碼序列353位上的苯丙氨酸（Phe）未改變，為國外報道的同義突變[3]，不引起相應蛋白的改變或功能缺陷，但同時檢測出了5種內含子突變，可能其中有內含子位于RNA剪切位點，影響RNA的剪切，引起ABCA3蛋白減少或功能缺失。有文獻報道電鏡顯示患兒肺部組織中出現的病理板層小體，與ABCA3基因作用的板層小體一致[4]。有研究表明，ABCA3選擇性轉運磷脂膽堿、鞘磷脂、膽固醇進入板層體，并影響版層體形成過程中的脂質合成以及板層樣結構轉化。ABCA3的異常直接影響板層體的正常結構勁兒影響磷脂轉運、及肺泡表面活性物質的合成分泌，從而導致肺泡表面活性物質的缺乏，進而引起RDS。[5，6]部分ABCA3 基因突變是非致命性的[7]，是肺部疾病包括表面活性蛋白SP-B、SP-C 的修飾基因，可影響SP-B、SP-C 的合成，進一步引起包括新生兒呼吸窘迫綜合征和隨后的疾病。

該患兒為足月新生兒，以出生后持續的呼吸困難、低氧血癥為主要表現，影像學表現為雙肺彌漫性病變，予RDS治療無明顯好轉。該患兒臨床表現缺乏特異性。ABCA3基因突變的臨床表現和影像學表現與SP-B、SP-C突變重疊。在新生兒表現為致死性RDS，其影像學改變及臨床癥狀與SP-B缺陷相同。SP-B缺陷的典型表現為足月新生兒出生時出現進行性呼吸窘迫，臨床和影像學與早產兒嚴重的RDS 相一致。本例患兒生后即刻出現呼吸不規則，缺氧反應。肺部CT顯示大片密度不均實變影。予以RDS標準治療反應不佳。

ABCA3基因突變在嬰兒或大年齡兒童和成年人表現與SP-C突變類似。ABCA3基因突變和SP-C缺陷同時存在時，病情更加嚴重。

治療上，ABCA3基因突變引起的肺疾病很少有有效手段。近年來有研究表明，大環內酯類藥物在治療各種類型慢性肺部疾病中起著有效作用[8、9]。除了抗菌，越來越多的證據表明這些分子通過抗炎作用對疾病起著有益影響。在本例病程中，患兒雖反復發生肺部感染且抗感染治療無效，但其最終好轉，可能與患兒兩次進行肺灌洗有關。是否肺灌洗對新生兒肺表面活性物質功能障礙起改善作用尚需進一步研究觀察。

對于嬰幼兒期彌漫性肺病的患兒，應高度懷疑肺表面活性物質功能障礙，基因檢測也應當成為主要診斷手段之一。開展基因檢測不僅能夠確定診斷，預測疾病的自然病程，避免不必要的侵入性檢查和治療，選擇進行肺移植。夫妻雙方在遺傳咨詢中進行相關基因檢測，可有效降低新生兒發生肺呼吸窘迫綜合征。 但這方面在國內處于認識階段，今后需要大力開展。

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