松弛素、盆底電生理與女性盆底功能障礙性疾病的相關性研究*

蔡柏岑 韓燕華 蘇園園 石賀元 姚書忠

女性盆底功能障礙性疾病為中老年女性群體常見 病，以尿失禁及盆腔器官脫垂為主。根據相關資料調查結果，女性一生中出現盆底功能障礙性疾病的幾率在11%左右，其中1/3患者修復手術次數超過1次[1-2]。目前，妊娠、絕經、陰道分娩、盆底肌肉薄弱、長期腹壓偏大（肥胖，咳嗽）等被臨床公認為該病最主要危險因素，此外營養性因素、醫源性因素及遺傳因素等也與該病有重要關系[3]。近年來，不少臨床研究證實，松弛素、盆底電生理等與女性盆底功能障礙性疾病之間有著較大相關性[4-5]。本文選擇本院收治行全子宮切除術婦科良性疾病患者進行研究，探析松弛素、盆底電生理與女性盆底功能障礙性疾病之間相關性，為疾病預防提供指導，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次選擇本院2012年5-8月收治的擬行全子宮切除術的婦科良性疾病住院患者100例進行研究，均經過詳細盆底功能檢查予以確診。年齡34~56歲，平均（48.5±7.3）歲；體重54~73 kg，平均（64.5±12.4）kg；懷孕次數1~7次，平均（3.2±0.4）次。83例患者均已絕經，其中1例合并慢性咳嗽，4例合并糖尿病，8例合并便秘、痔瘡，20例合并高血壓，9例因工作原因需長期抬重物，均無吸煙史。其中4例為子宮內膜病變，7例為卵巢良性腫瘤，10例為子宮腺肌病，13例為盆腔臟器脫垂，66例為子宮肌瘤。13例行陰式全子宮切除，26例行腹腔鏡切除，61例為開腹切除，平均手術時間（120.0±41.3）min，術中平均出血量（87.2±9.7）mL。

1.2 方法 于患者入院后了解基本病史并進行相關化驗檢查。術前1天行盆底POP-Q檢測、常規婦科雙合診，同時手檢盆底肌力明確盆底功能、盆腔臟器脫垂情況。

1.2.1 盆底肌力測定方法 應用廣州杉山公司U8盆底康復治療系統行盆底電生理檢測并測定患者盆底肌力：將肌電位探頭放進患者陰道內，另一端與治療儀相連，記錄測定結果。

1.2.2 血清采集方法 手術當天采集6 mL患者上肢靜脈血，2000 r/min速度下離心20 min后保存于-80 ℃溫度下待測。

1.2.3 組織標本收集方法 術中留取離體1 h內無菌組織標本，剪取子宮穹窿附近陰道壁組織，盡量選取未被電灼破壞部分，大小在1.0 cm×0.5 cm左右。若無多余陰道組織可剪取，可選擇穹窿附近宮頸組織。生理鹽水洗凈剪取組織并將血液與雜質漂洗去，分成2個部分放置在凍存管中并盡量轉移到液氮罐中保存。

1.2.4 血清松弛素H2的測定方法 用人松弛素H2（Relaxin H2）酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒測定血清松弛素H2。美國進口國內分裝96孔及48孔各1組，試劑盒組成包括封板膜、密封袋、酶標包被板、1800 pg/mL標準品溶液、標準品稀釋液、酶標試劑、樣品稀釋液、顯色劑A液、顯色劑B液、濃縮洗滌液及終止液。測定步驟：（1）稀釋標準品與加樣：酶標包被板上設10個標準品孔，在一、二孔中分別加入100 μL標準品，之后加入50 μL標準品稀釋液后混勻。從一、二孔中各取100 μL溶液分別加入三、四孔，同時分別加入50 μL標準品稀釋液后混勻，之后以此類推，最后在九、十孔中分別加入50 μL標準品稀釋液混勻后各取50 μL棄掉。（即是說稀釋后各孔加樣量均為50 μL，濃度依次為1200、800、400、200、100 pg/mL）。（2）加樣：分別設待測樣品孔、空白孔，于待測樣品孔中加入40 μL樣品稀釋液，之后加10 μL待測樣品，確保加樣樣品不觸及孔壁，混勻。（3）溫育：封板膜進行封板，37 ℃溫度下溫育半小時。（4）配液：30倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋30倍備用。（5）洗滌：將封板膜揭掉，棄液體后甩干，孔內加滿洗滌液，靜置半分鐘棄掉，重復5次，拍干。（6）加酶：除空白孔外每孔加入50 μL酶標試劑。（7）溫育與洗滌：操作同上。（8）顯色：每孔先加入50 μL顯色劑A，之后加入50 μL顯色劑B，震蕩混勻后于37 ℃避光下顯色15 min。（9）終止：每孔加入50 μL終止液以終止反應。（10）測定：用空白孔進行調零，加終止液15 min內450 nm波長依序測量各孔吸光度。之后計算標準物濃度、吸光度，繪制標準曲線并將樣品吸光度代入方程中計算樣品濃度乘以稀釋倍數即可得到血清松弛素H2實際濃度。

1.3 判定標準 盆底肌力分級標準：肌肉收縮持續時間為0 s，肌力為0級，持續1 s為I級，持續2 s為Ⅱ級，3 s為Ⅲ級，4 s為Ⅳ級，5 s或以上為V級；盆腔器官脫垂分度參照POP-Q分度標準：脫垂臟器最遠端位于處女膜內，距處女膜距離大于1 cm，為1度[6]；脫垂臟器最遠端在處女膜邊緣1 cm內，為2度；脫垂臟器最遠端在處女膜外，與處女膜邊緣距離超過1 cm但小于+（TVL-2 cm），為3度；下生殖道完全脫出，脫垂最遠端超過+（TVL-2 cm），為4度。

1.4 統計學處理 使用統計學軟件SPSS 19.0對所得數據進行分析與處理，計量資料以（x-±s）表示，比較采用t檢驗，計數資料用率（%）表示，比較采用 字2檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清松弛素H2水平與患者年齡及絕經情況相關性分析結果 83例絕經患者所測得血清松弛素H2水平為（157.4±263.9）pg/mL，17例未絕經患者為（212.9±355.8）pg/mL，差異無統計學意義（t=0.742，P=0.460）；患者年齡（X）與血清松弛素H2水平（Y）相關性回歸方程為：Y=2.987X+22.118，R2=0.006，差異無統計學意義（P>0.05）。

2.2 不同盆腔器官脫垂分度患者松弛素水平的比較 輕度（1、2度）松弛素水平為（175.5±69.9）pg/mL，重度（3、4度）松弛素水平為（227.6±93.4）pg/mL（t=4.023，P=0.000），分度越高，血清松弛素水平越高，提示患者血清松弛素水平與盆腔器官脫垂分度存在一定相關性。

2.3 血清松弛素H2水平與盆底電生理各參數相關性分析結果 患者血清松弛素H2水平與POP各徑線、盆底肌力等參數之間無明顯相關性，見表1。

表1 血清松弛素H2水平與盆底電生理各參數相關性

3 討論

盆腔器官脫垂主要原因為盆底支持結構缺陷、損傷進而導致功能障礙所造成，近年來有臨床研究針對其與盆底功能障礙性疾病展開分析，以妊娠期及產后婦女作為研究對象，證實松弛素與女性盆腔臟器脫垂存在一定相關性。國內婦產科中，RLX相關研究也均與妊娠有關[7]。例如，有學者對比盆腔器官脫垂患者與正常婦女，發現前者血清松弛素質量濃度為（406.7±311.2）ng/L，明顯比對照組（199.4±208.7）ng/L更高（P<0.05），同時絕經女性血清松弛素質量濃度為（172.0±197.5）ng/L，也明顯比未絕經婦女（587.5±716.8）ng/L更高（P<0.05）[8]。

松弛素在體內廣泛分布，為參與多種功能調節活性多肽，具有抗纖維化、穩定心血管系統環境、抑制肺膠原沉積、促進子宮新生血管形成、促進肌肉再生及抗炎等作用，松弛素與其受體耦聯可在盆底膠原降解過程中發揮主導作用，加快機體陰道膠原降解速度，膠原含量降低之后就會引發陰道壁松弛，支持作用隨之減弱，終而引發盆底功能障礙性疾病[9-10]，這是不少臨床專家認為其與盆底功能障礙性疾病存在相關性理論基礎。而有關研究顯示，孕晚期血清松弛素水平與產后盆底肌綜合肌力存在一定相關性[11]，檢測產后婦女進行盆底肌肉肌力后予以盆底康復治療，治療后康復組盆底肌力復測結果顯示，Ⅰ、Ⅱ類肌纖維正常率顯著高于對照組[12]。但本研究中，絕經與未絕經女性之間血清松弛素水平的比較并無顯著差異，且患者年齡與血清松弛素H2水平之間也無顯著相關性。但在盆腔器官脫垂分級方面存在一定相關性，其中輕度（1、2度）脫垂患者松弛素水平顯著低于重度（3、4度），分度越高，血清松弛素水平越高。另外，血清松弛素H2水平與患者盆底電生理Aa、Ba、C、GH、PB、TVL、肌力深Ⅰ、肌力深Ⅱ、肌力淺Ⅰ、肌力淺Ⅱ等各參數逐一進行分析，發現兩者之間也無顯著相關性。

這一結論與其他研究結果有所不同，推測原因有以下幾種：（1）血清松弛素水平與妊娠有密切關系，孕期及非孕期患者該激素水平存在較大差異，可比性低。（2）盆底功能障礙性疾病致病因素較多，單獨用血清松弛素水平進行評估難以獲得想要結果。（3）樣本本身盆腔臟器脫垂程度、BMI的不同也可能影響實驗結果[13-14]。

綜上所述，松弛素及盆底電生理與盆底功能障礙性疾病之間無顯著相關性，無法全面反映患者盆腔松弛程度，但與患者盆腔器官脫垂分度有一定關系，需進一步行大樣本研究予以證實。

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