邁瑞B C-6 900全自動血細胞分析儀血液模式的性能驗證和評價

壽爽，徐勝，呂潔，李靜云，成軍，孫長貴

(解放軍第一一七醫院檢驗科，浙江 杭州310013)

隨著科技的發展和應用，各類自動化儀器不斷更新，其性能與檢驗質量密切相關，穩定的檢測系統是保障檢驗結果質量的前提[1]。血細胞分析儀是目前實驗室最常用的檢測儀器之一，BC-6900全自動血細胞分析儀(BC-6900血球儀)是目前深圳邁瑞公司生產的國際上高檔的儀器之一，分為血液和體液兩種模式。根據《醫學實驗室--質量和能力的專用要求》[2]的要求，實驗室應確定設備(在安裝時及常規使用中)能夠達到所要求的性能標準，并且符合相關檢驗所要求的條件。為進一步了解該機性能，筆者以國際血液學標準委員會(ICSH)和美國國家臨床實驗室標準化協會(CLSI)的相關標準和指南，對血液模式各種性能進行初步評價，現將實驗結果報道如下 。

1 材料與方法

1.1 40份患者標本均是按照世界衛生組織(WHO)《靜脈采血的最佳操作》[3]采集的靜脈血液，使用EDTA-K2真空采血管。

1.2 主要儀器與試劑 邁瑞BC-6900全自動血細胞分析儀(BC-6900血球儀)、廠家配套校準品(批號：PLUS044)，高、中、低值質控品(批號：MB054H，N，L)及檢測試劑，SYSMEX XE-2100全自動血細胞分析儀(XE-2100血球儀)及相應配套檢測試劑。

1.3 方法 性能評價前用標準品進行定標，兩儀器狀態良好(XE-2100血球儀參加了全國和浙江省內全血細胞計數室間質評，成績優秀)，對BC-6900血球儀的白細胞計數(WBC)，紅細胞計數(RBC)，血紅蛋白(Hb)，血小板計數(PLT)的空白計數，攜帶污染率，精密度，準確度，線性范圍和相關性比較等方面進行性能評價。所有操作均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》[4]的要求，判斷標準參考儀器說明書。

1.3.1 空白計數 BC-6900血球儀開機后，以稀釋液為標本，連續檢測3次，取3次結果的最大值。

1.3.2 攜帶污染率 選擇高值和低值的質控品，分別在BC-6900上連續檢測高值質控品3次(H1，H2，H3)，立即檢測低值質控品 3 次(L1，L2，L3)，計算四個項目(WBC、RBC、Hb和PLT)的攜帶污染率(%)，與廠家提供的技術指標比較，其攜帶污染率計算公式：

1.3.3 精密度評價 全血高、中、低值質控品連續檢測20d，每天測兩批次，上午9時一次，下午4時一次，每批次測兩次[5]。計算四個項目(WBC、RBC、Hb及PLT)的精密度，用Sr表示批內精密度，Srr表示批間精密度，Sdd表示日間精密度，ST表示總不精密度，如果 Srr2為負數，說明批間變異幾乎都由批內變異形成，因此取值為0；如果 Sdd2為負數，說明日間變異幾乎都由批間變異形成，因此也取值為0[6]。

1.3.4準確度評價 校準品校準儀器后，重復10次測定校準品，取其均值與其靶值比較，計算四個項目(WBC，RBC，Hb，PLT)的相對偏倚(%)[7,8]：

1.3.5 線性范圍 將WBC，RBC，Hb高值標本用血漿按 100%，80%，60%，40%，20%，10%比例稀釋，每個濃度檢測兩次取均值。將PLT值為3000×109/L的標本用血漿按 5/6，2/3，1/2，1/3比例稀釋，每個濃度檢測兩次取均值；將PLT值為1000×109/L的標本用血漿按 100%，80%，60%，40%，20%，10%比例稀釋，每個濃度檢測兩次取均值。計算WBC，RBC，Hb和不同范圍PLT測定值與樣本濃度的直線回歸方程及相關系數[9,10]。

1.3.6 相關性比較 (1)兩儀器四個項目測定結果的相關性：參照CLSI EP9-A2[11]文件，在 5個工作日內，每日選擇 8份樣本，檢測參數濃度滿足文件要求，標本采集2h內，在室溫下分別在BC-6900和XE-2100血球儀上按文件要求測定順序進行測定，判斷檢測結果有效性后，進行相關分析。(2)白細胞分類儀器法與顯微鏡法的相關性：參照CLSI H20-A[12]文件內容進行白細胞分類相關性評價。取40份患者EDTA-K2抗凝靜脈血標本在BC-6900血球儀上重復測定2次取均值。同時取5μl血樣45度角推片，制成符合質控標準的血涂片3張，1張備用，2張瑞氏染色后由兩名經驗豐富的主管技師采用雙盲法進行白細胞分類：每張血涂片在油鏡下計數200個白細胞進行中性粒細胞(N)，淋巴細胞(L)，單核細胞(M)，嗜酸性細胞(E)，嗜堿性細胞(B)分類，每張血涂片每人分類3次，計算兩張血涂片各類細胞百分比均值，以顯微鏡法為參照與儀器結果進行相關性分析[13]。

1.4 統計學處理 應用Microsoft Excel2007軟件中的統計學函數及SPSS 12.0統計軟件包對數據進行線性回歸分析。

2 結果

2.1 空白計數 四個項目的空白計數結果均符合標準要求，見表1。

表1 空白計數結果

2.2 攜帶污染率 四個項目的攜帶污染率分別為WBC：0.199%，PLT：0.4%，RBC，Hb均為 0%， 均在1.0%以下(廠家標準)。

2.3 精密度評價 按照CLSI指南要求進行精密度測定和計算，結果見表2。

表2 精密度評價結果

2.4 準確度評價 四個項目測定結果的相對偏倚均符合行業標準，結果見表3。

2.5 線性范圍 四個項目在覆蓋醫學決定水平范圍內的線性回歸方程及相關系數結果見表4。

2.6 相關性

2.6.1 BC-6900和XE-2100血球儀測定四個項目的相關性結果見表5，兩儀器間測定值的相對偏倚WBC≤3%，RBC，Hb，PLT均≤2%。

2.6.2 BC-6900血球儀與顯微鏡分類所得五類細胞的百分比結果相關性分別為N%：0.9927；L%：0.9839；M%：0.9070；E%：0.9858；B%：0.7835。

表3 準確度試驗結果

表4 線性回歸方程結果

表5 BC-6900(X)與XE2100血球儀(Y)的相關性

3 討論

BC-6900血球儀將流式細胞儀普遍采用的熒光技術引入到白細胞、網織紅細胞和有核紅細胞的檢測中，利用激光流式細胞術結合熒光染色技術手段，可以將細胞中核酸含量的多少通過熒光強度表現出來，結合細胞體積或者細胞內部復雜信息來區分各種細胞類型，使其提高了對幼稚細胞和原始細胞的精準識別和檢測[14]。該儀器血液模式能夠提供準確、全面的血細胞分析結果，有利于血液系統疾病的早發現、早治療。

從保證檢驗質量考慮，檢驗工作者在使用新的儀器和檢測系統進行患者標本檢測前，應當評價和驗證檢測系統的基本性能指標，只有檢測系統的各項性能指標符合臨床使用要求，才可以將檢測系統用于常規工作。本次對BC-6900血球儀的評估試驗結果如下：WBC，RBC，Hb和 PLT4項參數空白計數結果良好，各項指標均合格。攜帶污染率均在允許范圍內，達到了廠家的技術要求。精密度評價，四個項目參數的總精密度除低值Hb外，均低于廠商提供的精密度，說明儀器的重復性較好，基本符合儀器的設計標準；低值的重復性相對稍差，而且主要由批內不精密度較大造成，說明儀器對低值的測定重復性有待改進。準確度評價，校準品的相對偏倚均符合行業標準，說明儀器有較高的準確性。采用覆蓋醫學決定水平的臨床標本評價線性范圍，四個項目的相關系數均大于0.99以上，線性誤差均小于2%，表明儀器實測值和理論值具有良好的相關性(檢測濃度與稀釋倍數呈線性相關)。在與XE-2100血球儀進行結果比較時，相關系數均大于0.99以上，具有良好的相關性，說明BC-6900血球儀與同類血球儀具有可比性；與手工鏡檢進行分類比較時，儀器對中性粒細胞、淋巴細胞、嗜酸性細胞的分類效果較好，相關性高且均在手工分類測定值99%區間內，而單核細胞和嗜堿性細胞的分類效果稍差，此結果與其它類型血球儀類似[15]。單核細胞雖然比一般淋巴細胞體積大，核酸含量高，熒光方向和側向散色光位置高，但與大淋巴細胞、顆粒型淋巴細胞、單核型異性淋巴細胞接近，是否容易引起計數誤差，值得探討；嗜堿性細胞可能因為細胞少比例低，手工鏡檢計數的細胞與儀器分析幾千個細胞相比誤差較大。各項結果表明該儀器比BC-5380有更好的性能[16]。

總之，通過對BC-6900血液細胞分析儀空白計數、攜帶污染率、精密度、準確度、線性范圍、儀器比對和手工白細胞分類比對的初步性能評價，筆者認為該儀器具有良好的性能。可以為臨床診斷提供快速、準確的血細胞分析結果，適合各大中型醫院檢驗科使用。

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