IL－10基因－592A／C單核苷酸多態性對替西羅莫司干預的膀胱癌患者預后的影響

肖 郁

（長春市中心醫院，吉林長春130051）

IL－10基因－592A／C單核苷酸多態性對替西羅莫司干預的膀胱癌患者預后的影響

肖 郁

（長春市中心醫院，吉林長春130051）

在我國的泌尿生殖系腫瘤中，膀胱癌發病率占第一位［1］。膀胱癌具有多發病灶和術后高復發率的特征，而術后灌注化療可有效降低術后復發率，改善患者預后和提高生存率［2］。膀胱癌患者的復發與膀胱癌治療過程中出現的耐藥性有相關性［3］。替西羅莫司（CCI－779）作為雷帕霉素抗癌衍生物，對癌癥有顯著的療效［4］。因此，通過檢測膀胱癌IL－10單核苷酸基因多肽性，對不同基因型的患者的生存率進行分析及其對預后的影響。

1 材料和方法

1.1 組織標本

2011－2013年長春市中心醫院泌尿外科膀胱癌患者組織標本46例，以病理為基礎分組，其中手術治療組18例，術后化療治療組28例。

1.2 實驗方法

通過PCR方法檢測組織樣本中提取的全基因組DNA，IL－10基因啟動子區序列。

PCR引物：

antisense：5′－TGAGAAATAATTGGGTCCCC－3′

sense：5′－CCTGTGACCCCGCCTGTC－3′

擴增片斷為：285bp［5］。

PCR體系10μl，循環參數：95℃預變性5min，94℃變性45s、61℃復性45s、72℃延伸5min，循環25次，72℃延伸10min，4℃停止。產物通過軟件Chromas處理。測序后，－592位點發現A／C突變。

1.3 統計學分析

用SPSS11.5軟件包進行統計學分析。組間數據比對采用方差分析，雙側檢驗P＜0.05為統計學有顯著差異。通過Kaplan-Meier分析方法，研究不同基因型對生存時間的影響，log－rank檢驗存活率的組間比較，患者生存期的計算以第一次手術為起始。

2 結果

2.1 膀胱癌IL－10基因型分析

對46例膀胱癌患者組織檢測IL－10基因啟動子區－592位點的基因多態性，發現27例（59%）為A／C基因型，19例患者（41%）為C／C基因型，未檢測出A／A基因型，結果見表1。

表1 A／C單核甘酸多態性測序結果

2.2 IL－10基因－592 A／C多態性對膀胱癌患者生存期的影響

經對46例膀胱癌患者尋訪，平均生存期為20.5月。手術治療的患者18例平均生存期16.9月，術后替西羅莫司治療的患者28例平均生存期為23.6月（P＜0.05）。經測序后，發現IL－10－592A／C基因型與IL－10－592C／C基因型患者的平均生存期分別為24.6月、17.5月（P＝0.161）。根據數據顯示：IL－10基因的－592位點A／C基因型與C／C基因型相比，A／C基因型對膀胱癌患者的生存期影響更大。

2.3 IL－10基因－592 A／C多態性對CCI－779治療的膀胱癌患者的生存期影響

在28例CCI－779治療的患者的組織中，IL－10－592A／C基因型為15例，IL－10－592C／C基因型為13例，兩組的平均生存期分別為24.2月、15.1月（P＝0.046）。根據數據顯示：IL－10－592A／C基因對術后進行CCI－779化療的患者生存期有顯著的統計學意義。

3 討論

膀胱癌是成人泌尿系常見的、極具侵襲性的腫瘤，診斷為膀胱癌的患者的平均生存期不超過五年［6］。膀胱細胞的癌變是一個復雜的過程［7］。手術治療是膀胱腫瘤最有效方法，化療是重要的輔助治療手段，對放療敏感的患者，化療也是很好的聯合方法［8］。盡管，替西羅莫司在臨床的應用中有較良好反應，但也具有同其他化療藥物一樣的耐藥性。

本研究提示IL－10－592A／C基因型對膀胱癌患者的生存期有較大的影響。在28例替西羅莫司治療的患者組織中，A／C基因型與C／C基因型患者的組織樣本相對平衡（分別為15、13例），并經統計學分析，顯示兩組生存期有顯著統計學意義（P＝0.046）。在46例膀胱癌患者的組織研究中，IL－10－592A／C基因型顯著增高，不能排除這種現象是由樣本數量較少或種族差異引起。

盡管在少量樣本中進行單核苷酸多肽性分析，其效果可能不能充分顯現，然而在相對平衡、前后對比的樣本數據中，卻有利于對影響患者生存期的因素分析。

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2014－01－26）

1007－4287（2015）02－0279－02