塞北紫堇化學成分的研究*

李懷平，馬 斌，任松鵬，李 麗

1山東阿如拉藥物研究開發有限公司，山東 濟南 250101；2山東大學藥學院

塞北紫堇化學成分的研究*

李懷平1，2，馬 斌2，任松鵬1，李 麗1

1山東阿如拉藥物研究開發有限公司，山東 濟南 250101；2山東大學藥學院

目的：對塞北紫堇的化學成分進行研究。方法：通過硅膠柱層析和重結晶法進行分離，根據理化性質及ID-N M R、ESI-M S等波譜方法進行結構鑒定。結果：從塞北紫堇中共分離得到5種生物堿類單體化合物，分別為：α-比枯枯靈、原阿片堿、黃紫堇明堿、β-hydrast i ne、β-比枯枯靈。結論：α-比枯枯靈、原阿片堿、β-hydrast i ne為首次從該藥材分離得到。

塞北紫堇；化學成分；結構鑒定

1 材料

1.1 儀器 600 MHz核磁共振儀(BRUKER公司)； API400(AB公司)；UV-2450型紫外可見分光光度計(島津)；EYELA-M-1100型旋轉蒸發器(上海愛郎儀器有限公司)；AUW220D型電子天平(島津)；5200B型超聲波清洗機(昆山市超聲儀器有限公司)；HH-2恒溫水浴鍋(常州博遠試驗分析儀器廠)；YRT-3型熔點儀(天津市光學儀器廠)。

1.2 試藥 藥材來自金訶藏藥股份有限公司，經青海省藏醫首席專家尼瑪教授鑒定為罌粟科紫堇屬植物塞北紫堇藥材，所用部位為除去根的地上部位。

1.3 試劑 甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、正己烷(天津市富宇精細化工有限公司)；氫氧化鈉(天津市博迪化工股份有限公司)；硅膠G板、柱層析硅膠(100-200目)(青島海洋化工廠)；所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 提取分離 取塞北紫堇藥材粗粉10kg，堿性乙醇回流提取，減壓濃縮，干燥，干燥物經酸堿處理后得堿水液，堿液經過二氯甲烷萃取，萃取液回收溶劑并干燥，得到塞北紫堇總生物堿粗提物34 g。稱取塞北紫堇總生物堿25 g，以硅膠50 g拌樣，加入600 g硅膠濕法裝柱(100～200目，Φ75× 1 000 mm)，以正己烷與乙酸乙酯為洗脫溶劑，進行梯度洗脫(98∶2，90∶10，80∶20，70∶30，60∶40，50∶50，40∶60，30∶70，20∶80，10∶90)，流分以TLC法檢測，合并相同的流分，共得到10個部分(Fr.1～10)。Fr.1 (98∶2)500mg，TLC見明顯的斑點，二氯甲烷重結晶得到橙紅色粉末Ⅲ(85 mg)；Fr.2(90∶10)1 200 mg，TLC見兩個明顯的斑點其中一個斑點比較小，采用甲醇重結晶得到白色粉末Ⅰ(800mg)。Fr.3(80∶20) 1100mg，采用甲醇重結晶得到白色粉末Ⅱ(536mg)。Fr.4(70∶30)為黃色膏狀物，采用甲醇重結晶得到淡白色粉末Ⅳ(30 mg)，Fr.7(40∶60)為淺棕色物，采用三氯甲烷重結晶得到白色粉V(23 mg)。其余Fr.5(60∶40)，Fr.6(50∶50)Fr.8(30∶70)，Fr.9(20∶80)Fr.10(10∶90)，5個部分得到的組分較少，未能得到單體物質，未做進一步研究。

2.2 結構鑒定

2.2.1 化合物Ⅰ 分子式為C20H17NO6，白色粉末，溶于苯、三氯甲烷、乙酸乙酯，微溶于乙醇和乙醚。m.p.215～218℃，ESI-MS顯示分子離子峰368.3 (M+H)m/z。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ∶4.05(1H，d，J=2.4Hz，H-1)，6.63(1H，s，H-5)，6.90(1H，s，H-8)，5.77(1H，d，J=2.4Hz，H-11)，7.23(1H，dd，J=7.8，7.8Hz，H-16，17)，5.94(2H，d，J=9.6Hz，OCH2O)，6.22(2H，d，J=13.8Hz，OCH2O)，2.23(3H，s，N-CH3)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6)δ∶64.7(s，C-1)，50.3(s，C-3)，26.6(s，C-4)，108.2(s，C-5)，145.8(s，C-6)，145.6(s，C-7)，107.4(s，C-8)，130.1(s，C-9)，126.5(s，C-10)，84.6(s，C-11)，167.0(s，O=CO)，109.2(s，C-13)，143.8(s，C-14)，148.5(s，C-15)，113.5(s，C-16)，115.8(s，C-17)，141.5(s，C-18)，100.8(s，OCH2O)，103.3(s，OCH2O)，44.7(s，N-CH3)，根據以上數據，通過與文獻報道［8］235數據對照基本一致，故確定化合物Ⅰ為α-比枯枯靈(α-Bicuculline)。

2.2.2 化合物Ⅱ 分子式為C20H19NO5，為白色粉末，溶于三氯甲烷、乙醚，微溶于甲醇，幾乎不溶于水。m.p.206～208℃。ESI-MS顯示分子離子峰354.4(M+H)m/z。1H-NMR(600 MHZ，DMSO-d6)δ∶6.95(1H，s，H-1)，6.81(1H，s，H-4)，6.73(1H，d， J=7.8Hz，H-14)，6.69(1H，d，J=8.4Hz，H-15)，1.81 (3H，s，NCH3)。13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ∶107.5 (s，C-1)，145.9(s，C-2)，147.4(s，C-3)，110.5(s，C-4)，30.6(s，C-5)，57.5(s，C-6)，194.8(s，C=O)，132.8(s，C-9)，136.1(s，C-10)，50.8(s，C-11)，118.4(s，C-12)，129.8(s，C-13)，125.1(s，C-14)，106.4(s，C-15)，145.3(s，C-16)，145.4(s，C-17)，46.1(s，C-18)，101.2(s，OCH2O)，100.8(s，OCH2O)，41.2(s，NCH3)。根據以上數據，通過與文獻報道［8］692數據對照基本一致，故確定化合物為原阿片堿(Protopine)。

2.2.3 化合物Ⅲ 分子式為C22H23NO4，橙紅色粉末，溶于丙酮、乙酸乙酯、甲醇等。m.p.190～193℃，ESI-MS顯示分子離子峰366.3(M+H)m/z。1H-NMR (600MHZ，DMSO-d6)δ：6.15(1H，s，H-1)，6.62(1H，s，H-2)，3.42(2H，d，J=19.8Hz，H-8)，3.35(2H，t，J=6.6Hz，H-8)，7.20(1H，d，J=8.4Hz，H-11)，6.88 (1H，t，J=13.8Hz，H-12)，1.99(3H，s，NCH3)，3.71 (3H，d，J=7.8Hz，OCH3)，3.45(3H，s，O-CH3)，5.66 (2H，s，=CH2)，4.72(2H，s，=CH2)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：111.2(s，C-1)，147.3(s，C-2)，147.7(s，C-3)，110.5(s，C-4)，126.2(s，C-4α)，29.9(s，C-5)，37.1(s，C-8)，123.6(s，C-8α)，142.9 (s，C-9)，148.1(s，C-10)，108.3(s，C-11)，114.0 (s，C-12)，136.0(s，C-12α)，155.5(s，C-13)，71.5 (s，C-14)，136.8(s，C-14α)，38.9(s，NCH3)，101.6 (s，OCH2O)，55.9(s，OCH3)，55.7(s，OCH3)、106.6(s，=CH2)，根據以上數據，通過與文獻報道［8-9］數據對照基本一致，故確定化合物Ⅲ為：黃紫堇明堿［(+) -Ochotensimine］。

2.2.4 化合物Ⅳ 分子式為C21H21NO6，淡白色粉末，溶于丙酮、乙酸乙酯等，m.p.130～133℃，ESI-MS顯示分子離子峰384.3(M+H)m/z。1H-NMR(600 MHZ，DMSO-d6)δ∶4.04(1H，d，J=2.4Hz，H-1)，2.27(3H，s，NCH3)，2.54(2H，d，J=2.4Hz，H-3)，2.95(2H，m，J=11.4Hz，H-4)，2.40(2H，m，J=11.4Hz，H-4)，6.85 (1H，s，H-5)，6.61(1H，s，H-5)，5.70(1H，d，J=2.4 Hz，H-1′)，7.43(1H，d，J=8.4Hz，H-6′)，7.38(1H，d，J=8.4Hz，H-7′)，5.92(2H，s，OCH2O)，5.89(2H，s，OCH2O)，3.81(3H，d，J=4.8Hz，OCH3)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6)δ∶64.7(s，C-1)，44.6(s，NCH3)，50.3(s，C-3)，26.9(s，C-4)，126.4(s，C-4α)，108.2(s，C-5)，145.8(s，C-6)，145.5(s，C-7)，107.3(s，C-8)，130.0(s，C-8α)，82.6(s，C-1′α)，167.6(s，O=CO，119.0(s，C-3′α)，146.5(s，C-4′)，152.0(s，C-5′)，119.3(s，C-6′)，118.4(s，C-7′)，141.4(s，C-7′α)，100.7(s，OCH2O)，61.6(s，OCH3)，56.6(s，-OCH3)。根據以上數據，通過與文獻報道［10］數據對照基本一致，故確定化合物Ⅳ為：β-hydrastine。

2.2.5 化合物Ⅴ 分子式為C20H17NO6，白色粉末，溶于三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯等，m.p.194～196℃，ESI-MS顯示分子離子峰368.3(M+H)m/z。1H-NMR(600MHZ，DMSO-d6)δ：4.09(1H，s，H-1)，6.71(1H，d，J=14.4Hz，H-5)，6.73(1H，d，J=14.4Hz，H-8)，5.77(1H，d，J=4.2Hz，H-11)，6.10(1H，d，J=4.2Hz，H-16)，7.14(1H，d，J=7.8Hz，H-17)， 5.97(2H，d，J=7.8Hz，OCH2O)，6.10(2H，d，J=4.2Hz，OCH2O)，2.44(3H，s，NCH3)。13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ∶64.8(s，C-1)，48.8(s，C-3)，26.3(s，C-4)，108.3(s，C-5)，146.3(s，C-6)，145.5(s，C-7)，107.9(s，C-8)，130.4(s，C-9)，125.0(s，C-10)，84.2(s，C-11)，166.7(s，O=CO)，109.5(s，C-13)，144.0(s，C-14)，148.7(s，C-15)，113.5(s，C-16)，115.5(s，C-17)，140.4(s，C-18)，100.9(s，OCH2O)，103.4(s，OCH2O)，44.9(s，NCH3)，根據以上數據，通過與文獻報道［8］347，693數據對照基本一致，故確定化合物Ⅴ為β-比枯枯靈(β-Bicuculline)。

以上5種生物堿化合物的結構見圖1。

圖1 5種生物堿的化學結構

3 討論

本文采用酸堿法制備總生物堿粗提物，并通過常規的硅膠柱色譜法對其塞北紫堇總生物堿進行了系統研究，以TLC法檢測不同流份，合并相同流份，再經過進一步重結晶，分離得到5個化合物，鑒定其結構，均為生物堿類化合物，其中原阿片堿、α-比枯枯靈、β-hydrastine為從本藥材中首次分離得到。

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Research on Chemical Constituents of SaiBei ZiJin

LI Huaiping1,2,MA Bin2,REN Songpeng1,LI Li1
1 Shandong Arura Drug Research and Development Company,Ltd,Jinan 250101,China;
2 Pharmacy College of Shandong University

Objective:To study chemical constituents of SaiBei ZiJin[Corydalis impatiens(pall.)Fisch.]. Methods:SaiBei ZiJin was abstracted by silica column chromatography method and recrystalization method,structure identification were performed according to physicochemical property,ID-NMR,ESI-MS and other spectral methods.Results:Five alkaloid monomer compounds were extracted from SaiBei ZiJin,they were:α-bicuculline, protopine,ochotensimine,β-hydrastine and β-bicuculline.Conclusion:α-bicuculline,protopine and β-hydrastine are isolated from medicinal materials for the first time.

SaiBei ZiJin;chemical constituents;structure identification塞北紫堇為罌粟科紫堇屬植物塞北紫堇Corydalis impatiens(Pall.)Fisch.的干燥全草。收載于《中華本草》藏藥卷，藏語名稱為“帕下嘎”(或譯為“帕夏嘎”或“巴夏嘎”)，具有除熱消腫、活血散瘀功效，用于熱性諸癥［1-5］。塞北紫堇分布在青海、西藏、甘肅、四川等地，為藏成藥中常用藥材，應用非常廣泛，數據統計顯示有25%的藏成藥中含有該藥材。現代研究中，對塞北黃堇化學成分的報道甚少，因紫堇屬植物中含多種生物堿，具有多方面的藥理作用［6-7］，故筆者提取制備了塞北紫堇總生物堿，并進行了分離，得到5個生物堿類成分，分別為原阿片堿、α-比枯枯靈、黃紫堇明堿、β-hydrastine、β-比枯枯靈。

R284.1

A

1004-6852(2015)10-0043-03

2014-09-27

藏醫藥產業技術創新服務平臺(編號2060503)。

李懷平(1980—)，男，碩士學位，工程師。研究方向：民族藥質量標準制定及藏藥新藥研究開發。