HPLC法測定頭孢呋辛鈉中EDTA含量

摘 要：目的：建立反相離子對高效液相色譜法，測定頭孢呋辛鈉中乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）的含量。方法：色譜柱為Venusil XBP C18 （4.6mm×250mm，5.0μm）；流動相pH6.5四丁基氫氧化銨溶液，乙腈（80：20）；檢測波長為254 nm；柱溫為30℃。結果 EDTA二鈉的質量濃度在0.66ug/ml-4.95ug/ml （r=0.9992 0，n=6）范圍內與峰面積線性關系良好；平均回收率為100.5%（n=9）。結論：該方法快速、靈敏，結果準確可靠，可用于頭孢呋辛鈉中EDTA的檢測。

關鍵詞：頭孢呋辛；HPLC；EDTA

頭孢呋辛鈉是第二代頭孢抗生素，對多種革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌有效，臨床多用于敏感菌所致的呼吸道，耳鼻喉，尿道，軟組織，骨骼關節，產科等感染[1]。華北制藥集團河北華民藥業有限責任公司在生產頭孢呋辛鈉的過程中使用EDTA作為絡合劑，EDTA對人體有害，根據WHO規定，EDTA二鈉的每日允許攝入量為0-2.5mg/kg。測定不同介質中EDTA的方法有比色法[2]、滴定法和高效液相色譜法[3]、離子色譜法[4]等。滴定法和比色法會受到頭孢呋辛鈉的干擾，測定結果不能令人滿意。高效液相色譜法是通過檢測EDTA的金屬絡合物EDTA - Cu對EDTA進行測定，本文通過對EDTA- Cu進行測定，來檢測EDTA在頭孢呋辛鈉中的殘留量。

1 儀器與試劑

1.1 儀器。安捷倫1260液相色譜儀，梅特勒托利多XS105電子天平。

1.2 試劑。頭孢呋辛鈉，華北制藥河北華民藥業有限責任公司提供，批號C2091306001；EDTA，優級純，含量99.9% ；四丁基氫氧化銨，離子對試劑；乙腈，色譜純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件。色譜柱Venusil XBP C18 （4.6mm×250mm，5.0μm）；柱溫30℃；檢測器波長254nm，流速1.5ml/min。在此情況下，樣品中EDTA獲得了良好的分離。結果見圖1。

2.2 對照品溶液制備。精密稱取EDTA二鈉約33mg，置100ml量瓶中，加水使溶解并定量稀釋成0.33mg/mlEDTA對照品儲備液。

2.3 樣品溶液制備。精密稱取頭孢呋辛鈉供試品約1.0g，置100ml量瓶中，加水適量使溶解，加1%硫酸銅溶液5ml，加水稀釋至刻度，過濾，即得。

2.4 線性關系。精密量取貯備液0.2ml、0.5ml、0.8ml、1ml、1.2ml、1.5ml至100ml容量瓶中，加1%硫酸銅溶液5mL用純化水稀釋至刻度，得濃度為0.66μg/ml、1.65μg/ml、2.64μg/ml、3.3μg/ml、3.96μg/ml、4.95μg/ml溶液，依次進樣20μl，按照上述色譜條件測定。以EDTA濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程為y=8.3559x-0.2102，R2=0.9992。當信噪比（S/N）為3：1時，EDTA的濃度為0.1674μg/ml。

2.5 中間精密度。按照色譜條件，采用不同人不同時間進行樣品測定，測得EDTA檢測結果分別為3.35、3.32、3.32、3.33、3.34、3.32，RSD為0.4%。

2.6 回收率實驗。準確稱取0.5g樣品，分別加入不同濃度的對照品，按照上述色譜條件進行檢測的回收率結果見表1。

3 討論

3.1 本實驗建立了HPLC檢測頭孢呋辛鈉中EDTA的含量，以外標法進行計算，該方法具有檢測限低，準確度及精密度高，樣品檢測時間短的優勢。

3.2 由于本法進樣量較大，容易使色譜柱過載，在樣品檢測完后，應及時沖洗色譜柱。

參考文獻：

[1]陳新謙，金有豫，湯光主編.新編藥物學（第15版）[M]北京：人民衛生出版社，2003：59-60.

[2]劉海玲，謝瑞容. 動力學光度法測定微量乙二胺四乙酸[J].分析化學2000，28（8）.

[3]施炎炎，丁紅梅，汪晶晶，張霞.淺析食品中乙二胺四乙酸二鈉檢測[J].福建分析測試，2013，22（3）.

[4]朱巖，陳治強，俞建國，王素芬.離子色譜法測定洗滌劑中乙二胺四乙酸、磷酸鹽[J].化學世界，1998（9）.

作者簡介：陳秀紅，女，1982年7月出生，籍貫，內蒙古，漢族，畢業于成都理工大學，在華北制藥集團河北華民藥業有限責任公司工作，從事藥品檢測方面的研究。