長白山區人參銹腐病發生危害調查及殺菌劑田間藥效試驗

李昕月 付俊范 魏曉兵 李自博 車喜慶 周如軍

摘要：就長白山區人參銹腐病發生危害進行調查，并選用新型殺菌劑對人參銹腐病菌的毒力及田間防效進行了測試，以期為生產上安全高效防治該病提供理論依據。采用菌絲生長速率法測定11種殺菌劑對人參銹腐病菌的毒力，并進行田間防效試驗。室內毒力測定結果表明10%世高水分散粒劑、18.7%凱特水分散粒劑和60%百泰水分散粒劑對人參銹腐病菌毒力最強，其EC50/sub>值分別為1.19、20.56、27.77mg/L。田間試驗結果表明10%世高WG、18.7%凱特水分散粒劑和60%百泰水分散粒劑對人參銹腐病防效達50%以上。人參銹腐病發病盛期為6月上旬至7月下旬，10%世高水分散粒劑、18.7%凱特水分散粒劑和60%百泰水分散粒劑是目前防治人參銹腐病的有效藥劑。

關鍵詞：人參銹腐??；殺菌劑；毒力測定；田間防效；毀滅柱孢菌

中圖分類號：S4

文獻標志碼：A

論文編號：casb14100086

0引言

人參（Panax ginseng C.A.Meyer）是中國傳統的名貴中草藥，具有極高的藥用和經濟價值，主要分布在中國東北地區長白山麓。由毀滅柱孢菌[Cylindrocarpon destructans （Zinns.） Scholten]引起的人參銹腐病是人參產區分布最廣和發病時間最長的地下病害，從播種到各參齡都有發生，嚴重影響人參的產量和品質，在遼寧和吉林參區發病率一般為20%～30%，造成25%～30%產量損失。近年來盡管對人參銹腐病的研究較多，但國內僅限于對人參銹腐病病原菌的生物學特性、改良參地土壤和拮抗菌篩選等一些比較基礎的研究，并未從根本上解決問題，尤其是在防治方面。目前人參銹腐病主要以化學藥劑防治為主，由于缺乏系統防控技術研究，盲目用藥及濫用農藥現象時有發生，極易導致人參產品農藥殘留超標。本研究對長白山區人參銹腐病田間發生危害進行了系統調查，并在植物病害預防與控制相結合的理論指導下，從人參銹腐病發病植株上分離得到致病菌株，針對其生物學特性選用國內外11種新型低毒低殘留殺菌劑對人參銹腐病菌進行室內毒力測定及田間防效試驗，以期為人參銹腐病高效低毒低殘留藥劑篩選提供理論依據。

1材料和方法

1.1田間發生危害調查

2012-2014年陸續對長白山區的遼寧桓仁、清原、新賓、寬甸和吉林集安、撫松等人參主產區進行了人參銹腐病發病危害調查，調查方法是每塊參田隨機選取5個小區，每小區選100株，調查病株率。

1.2供試菌株

人參銹腐病病樣于2013年6月上旬采自吉林省集安市人參基地，在室內對其病原菌進行分離純化，獲得試驗所用的人參銹腐病菌株。

1.3供試藥劑

50%阿克白可濕性粉劑、18.7%凱特水分散粒劑、50%凱澤水分散粒劑、60%百泰水分散粒劑、30%翠澤水劑、70%代森聯水分散粒劑，50%翠貝水分散粒劑，上述7種新型殺菌劑均由巴斯夫（中國）有限公司生產；80%代森錳鋅可濕性粉劑（陶氏益農農業科技（中國）有限公司）；10%世高水分散粒劑（先正達（中國）投資有限公司）；50%腐霉利可濕性粉劑（江蘇瑞邦農藥廠有限公司）；50%多菌靈可濕性粉劑（江陰市農藥二廠有限公司）；75%百菌清可濕性粉劑（利民化工股份有限公司）。

1.4抑菌實驗

采用生長速率法進行真菌對藥劑的敏感性測定。在無菌條件下將人參銹腐病菌轉接至PDA培養基，20C恒溫培養10天后，在菌落邊緣打5.0mm的菌餅備用。分別吸取一定體積的不同濃度藥液加入融化冷卻至45℃的PDA培養基中，配成使用濃度，以無菌水作為對照，凝固后，將菌餅接種在含有相對應濃度藥劑的PDA平板上，每個濃度設3次重復。20℃恒溫培養10天后，對照菌落直徑超過5.0cm時用十字交叉法測量菌落直徑，計算出該濃度下化學藥劑的相對抑菌率。

抑制率=[（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/對照菌落直徑]xl00%…………………………………… （1）

統計出各藥劑不同濃度對各供試病原菌的抑菌效果。

1.5田間藥效試驗

試驗在沈陽農業大學中草藥園中進行，種植前采用刺傷法進行病原菌侵染，共設7個處理（藥劑及質量濃度見表2，清水處理為對照），每個處理3次重復，初期采用參根蘸藥方式進行防治，1周后再進行灌根給藥處理。種植后15天檢測出苗率，秋后按照對角線采樣抽取每個重復的20株人參進行染病情況調查，對數據進行統計分析。人參銹腐病病害分級標準參照王士杰等：0級，參根無?。虎窦?，病斑占參根表面積的10%以下；Ⅱ級，病斑占參根表面積的10%-30%；Ⅲ級，病斑占參根表面積的30%-50%；Ⅳ級，病斑占參根表面積的50%以上。通過公式計算銹腐病的病情指數（公式2）和藥劑防治效果（公式3）。

病情指數=∑（發病級別×各級病根數）/（調查參根數×最高病級值）×100………………………………（2）

防治效果=（對照區病情指數-處理區病情指數）/對照區病情指數×100%………………………………（3）

2結果與分析

2.1發生危害調查

田間調查發現，人參銹腐病是發生最普遍、危害最嚴重的人參根部病害之一，可為害各齡參根，田間發病率為15%-30%。6月上旬至7月下旬為發病盛期，也是人參連作的主要障礙（圖1）。

該病從早春參苗出土至枯萎期或休眠期均有不同程度的感染或發病。發病初期在侵染點呈現黃褐色小斑點，后隨病情擴展，表現為近圓形或不規則形病斑，病部邊緣稍隆起、中部略凹陷，病健部界限明顯。發病較輕時，參根表皮完好，僅表皮下幾層細胞受害，不深入根肉內部；當受害嚴重時，表皮破壞呈現銹斑狀，且深入根肉組織成褐色病變，病斑處積聚大量銹粉狀物，呈現干腐狀，使側根，甚至主根橫向腐爛，最終可腐爛死亡。越冬幼芽受害后，呈褐色小斑點，后逐漸擴大至內部，使其不能出土，在地下腐爛死亡，形成嚴重缺苗（圖2）。

2.2抑菌試驗

利用11種殺菌劑對人參銹腐病菌菌絲生長抑制對比試驗，經統計分析得出每種藥劑的相關系數、EC₅₀值和毒力回歸方程，如表l所示。供試藥劑對人參銹腐病菌都表現出一定的抑制作用，但不同的藥劑之間有明顯差異，并且不同藥劑在不同濃度下抑菌效果不同，在較高濃度下，多數藥劑均有一定的抑菌作用。其中10%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG對病原菌抑制效果相對較好，以10%世高WG防治效果為最好，在濃度為100mg/L時抑菌率達到87.47%，其EC₅₀值為1.19mg/L；其次是60%百泰WG和18.7%凱特WG，抑菌率分別為73.83%和64.33%，EC₅₀值分別為20.56mg/L和27.77mg/L；而50%凱澤WG對病原菌的抑制效果最差，500mg/L的濃度下抑菌率僅為12.44%，其EC₅₀值達到552694280mg/L。

2.3田間藥劑防治效果

經過染病處理的苗栽經過蘸藥和l周后的灌根給藥處理后人參出苗率有一定的提高，但沒有達到完全預防的作用，其中使用10%世高WG和18.7%凱特WG的試驗處理與其他5組比較差異顯著，出苗率在80%以上，其他藥劑都在60%～80%之間，清水對照的出苗率為46.67%（表2）。試驗結果表明人參銹腐病病原菌可以侵染芽孢從而影響人參的出苗率，降低人參產量。表2中7組藥劑處理病情指數在40左右，其中10%世高WG的病情指數較低為26.08，防效達到60.15%（與其他6組比較差異顯著），但還是比較低的，沒有達到預期的防治效果。這種現象可能由多種因素引起，表明給藥方式對防治效果有較大影響，同時也說明經分離得到的人參銹腐病病原菌有較強的致病力。

3結論與討論

本試驗采用菌絲生長速率法室內測定了11種殺菌劑對人參銹腐病菌的抑制作用，從中篩選出10%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG 3種對人參銹腐病菌抑制效果較好的藥劑，其EC₅₀值較低。田間藥效試驗結果表明10%世高WG和18.7%凱特處理出苗率最高為83.33%，世高防效最好達60.15%。其中10%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG 3種藥劑在生產上對人參銹腐病防治未見報道。

人參銹腐病是發生普遍、危害嚴重、防治最難的人參根部病害之一，可為害各齡參根，是人參連作的主要障礙。目前尚無防治人參銹腐病的專用特效農藥，因此本研究篩選新型殺菌劑防控該病對發展無公害人參生產具有重要意義。本研究表明l0%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG 3種藥劑對人參銹腐病具有較好防效，雖然防效偏低僅為50%以上，藥效結果不夠理想，還需做復配試驗等更多嘗試，但對極難防治的該病仍具有較大指導意義。Yu等認為引起人參銹腐病的主要原因在于土壤中有害微生物的大量繁殖，前期苗床無害化處理非常關鍵。因此提前對土壤進行消毒，并且在人參移栽過程中蘸藥處理防治銹腐病侵染，是人參生產中的重要措施。試驗所用藥劑均為低毒農藥，在使用化學農藥防治人參銹腐病的過程中應合理輪換、交替或混合使用，以避免抗藥性的產生，本研究可為實際生產中人參銹腐病的防治工作提供更好的借鑒。