腦脊液白蛋白和免疫球蛋白IgG檢測在兒童病毒性腦炎診治中的應用

[摘要] 目的 探討病毒性腦炎患兒腦脊液白蛋白比值（QAlb）、IgG和IgG指數變化與疾病嚴重程度的相關性。方法 研究對象分病毒性腦炎組和對照組，病毒性腦炎組按臨床特點分為輕癥病毒性腦炎組和重癥病毒性腦炎組，采用免疫散射比濁法測定血清和腦脊液的白蛋白、IgG， 計算QAlb和IgG 指數，判斷病毒性腦炎患兒血腦屏障功能狀態及免疫球蛋白鞘內合成情況與臨床嚴重程度的關系。結果 病毒性腦炎組的QAlb高于對照組；重癥病毒性腦炎組的QAlb較輕癥病毒性腦炎組和對照組增高，差異有統計學意義（P<0.05）。重癥病毒性腦炎組腦脊液IgG、IgG指數比輕癥病毒性腦炎組和對照組增高，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 重癥病毒性腦炎組患兒的血腦屏障功能損害程度、鞘內IgG合成情況與臨床病情嚴重程度相關。檢測腦脊液和血清中白蛋白、IgG，計算QAlb和IgG指數能反映病毒性腦炎患兒血腦屏障功能狀態及IgG鞘內合成情況，為判斷病毒性腦炎臨床病情的嚴重程度提供相關依據。

[關鍵詞] 腦脊液白蛋白； IgG指數；病毒性腦炎；血腦屏障

[中圖分類號] R725.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2015）05（c）-0187-03

[Abstract] Objective To study the correlation between the value changes of albumin index（QAlb） and IgG index in cerebrospinal fluid（CSF） and the severity in children with viral encephalitis. Methods The studied subjects were divided into two group： group of encephalitis and group of control case. The group of encephalitis was divided into two group ：group of patients with mild viral encephalitis and group of patients with severe viral encephalitis .Albumin ，IgG in serum and CSF of these patients were synchronal detected by using nephelomertry. QAlb and IgG index were calculated by formulas.To evaluate the correlation between the value changes of QAlb， IgG index and the severity in children with viral encephalitis. Results The levels of OAlb in group of encephalitis were higher than those in the control group . The levels of OAlb in group of patients with severe viral encephalitis were significant higher than those in the group of patients with mild viral encephalitis and the control group（P<0.05）.The levels of IgG and The levels of IgG index in group of patients with severe viral encephalitis were significant higher than those in the group of patients with mild viral encephalitis and the control group（P<0.05）. Conclusion There are the relationship between the blood-brain barrier damage ， intathecal Ig synthesis and the severity in children with viral encephalitis. It is clinical significance to analysis the value of albumin ，IgG ， QAlb and IgG index of patients with viral encephalitis ，and have an important value to diagnosis and evaluate the severity in children with viral encephalitis.

[Key words] Blood-brain barrier； Iintathecal Ig synthesis； Albumin； IgG index； Cerebrospinal fluid； Viral encephalitis

病毒性腦炎（Viral encephalitis，VE）是兒童常見的中樞神經系統感染性疾病，病毒感染后在中樞神經細胞中繁殖可直接引起神經細胞破壞，同時刺激機體的免疫應答，導致腦組織破壞和血腦屏障（Blood-brain barrier，BBB）功能障礙。BBB的通透性可通過白蛋白比值（QAlb=CSF Alb/Seru Alb）來反映，在BBB功能障礙時，BBB通透性增加，白蛋白順濃度梯度從高濃度的血中進入腦脊液中，測定白蛋白比值的變化可以反映血腦屏障功能的狀態。

免疫球蛋白的鞘內合成是中樞神經系統體液免疫反應應答的重要標志。腦脊液免疫球蛋白IgG、IgG指數及免疫球蛋白合成率可以定量地反映中樞神經系統鞘內合成的免疫球蛋白情況。IgG指數增高、IgG合成率增高提示存在中樞神經系統內的IgG合成。通過檢測腦脊液和血清中白蛋白、免疫球蛋白IgG，測算出白蛋白比值和IgG指數可以幫助確定BBB功能狀態和免疫球蛋白IgG鞘內合成情況，對探討中樞神經系統疾病的診斷、治療及預后有一定的臨床意義[1-2]。

該研究整群選取2009年5月1日—2014年7月31日昆明醫科大學第一附屬醫院兒科住院的患兒為研究對象，通過檢測病毒性腦炎患兒的腦脊液免疫球蛋白（IgG）、白蛋白比值和IgG指數，來檢測BBB功能及鞘內IgG合成情況，探討病毒性腦炎患兒的中樞神經系統免疫反應與疾病嚴重程度的相關性。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 病毒性腦炎組 病例79例，來自于2009年5月1日—2014年7月31日昆明醫科大學第一附屬醫院兒科住院的患兒。男51例，女28例，年齡3個月～14歲，平均年齡為（7.49±5.68）歲。所有患兒均符合病毒性腦炎的診斷標準。

病毒性腦炎組病例納入診斷標準[3]：①急性起病，有發熱、頭痛、驚厥、意識障礙，和/或神經系統定位體征；②腦電圖異常（背景波異常，彌漫性雙側慢波增多，和/或癲癇樣放電）；③MRI正常，和/或腦膜強化，和/或MRI呈多發性、對稱性大腦皮層和皮層下核團呈長 T1長T2信號，或累及基底節區、小腦和腦干；④腦脊液檢查提示白細胞數增高，早期以多形核細胞為主，24～48 h后淋巴細胞為主，蛋白輕度增 高（0.5-1.5g/L），糖和氯化物正常；⑤經抗病毒、支持治療后病情緩解；⑥除外合并其他病原體所致顱內感染、顱內占位性病變、顱腦外傷、顱內出血、中毒性腦病、遺傳代謝性腦病、癲癇等病例。

1.1.2 79例病毒性腦炎患兒按照臨床表現分為 EV輕癥組（48例），EV重癥組（31例）。EV重癥組診斷標準為：臨床頻繁驚厥發作（>3次）或一次驚厥持續時間30 min以上，伴有明顯意識障礙者；病程中出現昏迷，嚴重顱內壓增高，呼吸循環障礙者；經治療病情反復、病程長、腦脊液恢復較慢者。其余為EV輕癥組。

1.1.3 對照組患兒 15例，均為2009年5月1日—2014年7月31日人院時疑診為中樞神經系統感染，有腰穿指征。經腦脊液檢查無異常，腦電圖檢查正常、經臨床觀察和治療后排除中樞神經系統感染的患兒。男9例，女6例，年齡14個月～14歲，平均年齡為（6.98±4.15）歲。對照組與病毒性腦炎組的患兒性別及年齡構成比差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 79例病毒性腦炎患兒于人院3 d內行腰穿，對照組入院時進行腰穿，留取腦脊液標本送驗常規，生化、免疫球蛋白、微量白蛋白、涂片、細胞學檢查。在抽取CSF的當日早晨，抽取空腹靜脈血查血清白蛋白、免疫球蛋白，剔除溶血的標本。

1.2.2 檢測方法 采集所有受試者的血4 mL、腦脊液2 mL，用德國西門子公司的全自動程序化分析儀（西門子 BN II）以及配套試劑，采用免疫散射比濁法測定受試者腦脊液和血清中IgG 、白蛋白的含量。根據每個患兒血、腦脊液中IgG 、白蛋白的含量代入公式，計算QAlb和IgG指數。相關檢測指標的計算公式[1，2，4]。

gG Index =IgG CSF（mg/L）：IgG Seru（mg/L）/Alb CSF（mg/L）：Alb Seru（mg/L）

Serum Albumin Index（QAlb）=Alb CSF （mg/L）/Alb Seru（mg/L）

1.2.3 QAlb和IgG指數的評價標準 IgG指數>0.7，提示有腦脊液免疫球蛋白鞘內IgG的合成。

QAlb≤7 提示血腦屏障功能正常；7～14 為血腦屏障功能輕度損傷；14～30為血腦屏障功能中度損傷；30～100 為血腦屏障功能重度損傷；>100 為血腦屏障功能完全損傷。

1.3 統計方法

采用SPSS 19.0統計軟件對數據進行處理，所有計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料用χ2檢驗，P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

①病毒性腦炎組患兒的QAlb明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）；病毒性腦炎組患兒腦脊液IgG較對照組增高，但差異無統計學意義（P>0.05）；病毒性腦炎組患兒腦脊液IgG指數高于對照組患者，但差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

②EV重癥組腦脊液QAlb比EV輕癥組腦脊液QAlb明顯增高，差異有統計學意義（P<0.05）；EV重癥組腦脊液QAlb和EV輕癥組腦脊液QAlb分別與對照組比較，均有增高，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

重癥病毒性腦炎組患兒腦脊液IgG、IgG指數較輕癥病毒性腦炎組和對照組明顯增高，差異有統計學意義（P<0.05）；輕癥病毒性腦炎組患兒腦脊液IgG、IgG指數較對照組增高，但差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。

3 討論

QAlb能更準確地反映BBB的功能狀態，該研究顯示病毒性腦炎患兒的QAlb較正常對照組增高，其中重癥病毒性腦炎組患兒的QAlb增高較輕癥病毒性腦炎組增高更明顯（P<0.05），表明病毒性腦炎患兒BBB的完整性有破壞，尤其重癥病毒性腦炎的血腦屏障功能呈中度損傷，可以將QAlb用作評估病毒性腦炎患兒臨床病情嚴重程度的一個相關依據。維護腦脊液內環境穩定的基礎是血腦屏障功能的穩定，較早地檢測到血腦屏障功能的損壞程度對中樞神經系統疾病的診斷具有重要意義[1-2]。

朱偉等[1.2，4]的研究顯示，腦脊液的免疫球蛋白的變化可以反映中樞神經系統體液免疫應答的情況。免疫球蛋白IgG不在中樞神經系統內合成，正常兒童腦脊液中IgG的含量很低。單純測定腦脊液的免疫球蛋白IgG含量不能準確反映其來源。計算IgG 指數可以除外血清IgG 對腦脊液IgG 水平的影響，研究發現IgG指數是反應鞘內異常體液免疫應答的重要指標，能為反映鞘內IgG的合成提供依據。艾洪武等[6-7]研究亦提示病毒性腦炎患兒腦脊液中免疫球蛋白IgG游離輕鏈Qκ、Qλ均明顯增高，說明病毒性腦炎患兒有不同程度的血腦屏障損傷，但游離輕鏈在兒童病毒性腦炎中與鞘內免疫球蛋合成的關系尚不能明確。該研究結果說明，重癥病毒性腦炎患兒不僅存在BBB完整性的破壞，還存在鞘內IgG的合成；而輕癥病毒性腦炎患兒雖有BBB功能障礙，但輕癥病毒性腦炎患兒卻少有鞘內IgG的合成。該研究表明重癥病毒性腦炎患兒的血腦屏障功能損害程度、其鞘內IgG合成情況與患兒病情的嚴重程度相關。在病毒性腦炎的臨床診治過程中，檢測腦脊液和血清中白蛋白、免疫球蛋白IgG，計算QAlb和IgG指數能反映病毒性腦炎患兒血腦屏障損傷和IgG鞘內合成的情況，可以為判斷病毒性腦炎患兒病情的嚴重程度提供客觀的實驗室依據。

[參考文獻]

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[2] 朱偉，趙合慶，程慶璋，等.Protis 軟件在分析中樞神經系統疾病血腦屏障完整性及鞘內免疫球蛋白合成中的應用[J]. 蘇州大學學報：醫學版，2010，30（4）：804-807.

[3] 陳勇，吳華平.小兒病毒性腦炎的診斷與治療[J].實用兒科臨床雜志，2012，27（24）：1863-1865.

[4] Yael Hacohen， Rahul Singh， Vhari Forsyth，et al. CSF albumin and immunoglobulin analyses in childhood neurologic disorders[M].Neurology： Neuroimmunology Neuroinflammation，2014：1-5.

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[7] 艾洪武，邱艷，張家云，等.游離輕鏈在兒童病毒性腦炎中的檢測及應用[J].檢驗醫學，2012，27（11）：929-931.

[8] 陳莎，黃永國，李長振.中樞神經系統感染患兒免疫學檢測、腦電圖及影像學分析[J].實用兒科臨床雜志，2012，27（21）：1677-1678.

（收稿日期：2015-02-25）