2014年血培養病原菌分布及耐藥性分析

黨好，張任飛，潘淑，馬瑜珊，張婧

(綿陽市第三人民醫院檢驗科，四川 綿 陽 6 21000)

血流感染(bloodstream infections，BSI)是由各種病原菌及毒素侵入血液引起的，是一種嚴重的全身感染性疾病，病情復雜、進展迅速，死亡率高，達20%～50%[1]。近年來，由于呼吸機應用、血液透析、內鏡檢查等侵入性檢查、創傷性治療的廣泛開展、免疫缺陷人群的出現及抗菌藥物的濫用，血流感染的發病率呈逐年上升的趨勢[2]。血培養是診斷血流感染的“金標準”[3]，監測血培養中分離出的病原譜和耐藥現狀，對指導臨床合理用藥、有效控制血流感染具有重要意義。現對綿陽市第三人民醫院2014年血培養病原菌的分布及耐藥情況進行分析，結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2014年1月至2014年12月我院各科2724例患者送檢血培養標本，分離病原菌324株(剔除同一患者相同部位標本相同的菌株)。

1.2 儀器與材料 Bactec 9120全自動血培養儀與血培養瓶均為美國BD公司產品，VITEK-2 Compact

微生物分析系統為法國生物梅里埃公司產品，藥敏紙片及M-H干粉均為英國Oxoid公司產品，血平板、中國藍及巧克力平板為廣州迪景公司產品。

1.3 方法

1.3.1 標本的采集及培養 無菌操作采集具有血培養指征的靜脈血，采集量一般為成人8～10ml注入需氧和厭氧瓶各1份，兒童1～3ml注入兒童瓶，在患者發熱初期或有感染癥狀時抽取立刻送微生物室。置Bactec 9120全自動血培養儀中培養，儀器報警提示有陽性時立即轉種相應培養基，同時進行初步革蘭染色并電話報告危急值，分離培養18～24h后進行細菌鑒定，嚴格按試劑盒操作說明書進行；若5d儀器未報警，涂片革蘭染色未見細菌則報告陰性。

1.3.2 藥敏試驗 采用Kirby-Bauer瓊脂擴散法作體外藥敏試驗，按CLSI 2014年版標準[4]判讀結果。標準菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、銅綠假單胞菌ATCC27853、陰溝腸桿菌ATCC70023、糞腸球菌ATCC29221、白念珠菌ATCC10231，購自衛生部臨檢中心。

1.5 統計分析 數據采用WHONET 5.6軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 血培養病原菌分布情況 2724例患者的血液標本中培養分離出病原菌324株，檢出陽性率為11.9%。病原菌分布見表1。

2.2 血培養科室分布情況 2724例患者血培養，共分布于36個病房，主要送檢科室有兒科(400份)、呼吸內科(379份)、消化內科(334份)、腎病科(165份)、神經內科(158份)等。菌株分出率居前的科室呼吸內科(40 株，12.35%)，腎病科(32 株，9.88%)，兒科(30 株，9.26%)，消化內科(29 株，8.95%)。

2.3 細菌耐藥情況

2.3.1 常見革蘭陽性球菌對常用抗菌藥物的耐藥情況 見表2。

表1 血流感染患者病原菌分布及構成比(%)

表2 主要革蘭陽性球菌對常用抗菌藥物的耐藥率(%)

2.3.2 常見革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物的耐藥情況 在革蘭陰性桿菌中以腸桿菌科為主，其中大腸埃希菌占大多數，見表3。

3 討論

從病原菌分布情況來看，我院2014年血培養陽性率為11.9%，與近年報道血培養陽性率＞10.0%相似[5,6]，其中革蘭陰性桿菌171株(52.78%)，革蘭陽性球菌147株(45.37%)，與文獻報道的革蘭陰性桿菌分離率高于革蘭陽性球菌一致[7,8,9]。表1可見，大腸埃希菌是我院血流感染的重要致病菌，檢出率最高，與國內報道一致[10,11]。分離的革蘭陽性病原菌主要為葡萄球菌屬，其中以凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)占大多數。CNS是分布于人體皮膚與黏膜的正常菌群，由于采血不規范、單瓶或單套陽性、患者無臨床感染癥狀等，可懷疑為污染，但近年來隨著各種侵入性診療的不斷增加、長期應用廣譜抗生素等，CNS也可成為血流感染的病原菌。有學者發現血培養中CNS有27%引起BSI，37%可能引起感染，36%為污染菌[12]。應綜合報警時間、多套血培養結果和患者對治療的反應來對致病CNS和污染CNS作進一步的判斷，同時也要規范血培養標本的采集，嚴格無菌操作降低污染率，減少對污染CNS抗菌藥物的使用。

表3 主要革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率(%)

由血培養陽性科室分布情況可見，檢出病原菌居前列的是呼吸內科和腎病科，原因可能是患者基礎疾病多，免疫力低下，侵入性檢查和創傷性治療手段多，住院時間較長及廣譜抗生素使用增多。而神經內科、老年精神科、ICU和血液科等科室送檢標本多，但檢出病原菌較少，原因可能是采血不及時或未能準確判斷血培養指征，導致陽性率較低。Skvarc M等[13,14]研究顯示僅有30%~40%的血流感染者可以通過培養的方式發現致病菌，而血培養具有能準確、直觀檢出病原菌的優點，因此應重視提高血培養的陽性率。

本文分離的病原菌以革蘭陰性桿菌為主，藥敏結果顯示亞胺培南和美羅培南、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星對血培養檢出的革蘭陰性桿菌仍保持高度的敏感性，臨床應結合血培養及藥敏結果合理選用抗菌藥物。國內已發現對碳青霉烯類耐藥的腸桿菌科細菌[15]，目前本院尚未發現此類病原菌，作為革蘭陰性桿菌的最后防線，臨床應謹慎使用此類抗生素并監測耐藥性。陰溝腸桿菌對氨芐西林/舒巴坦、第三代頭孢的耐藥性均較高，對第四代頭孢、哌拉西林/他唑巴坦、喹喏酮類的耐藥性則較低，與王潔等[16]的報道一致，這主要是陰溝腸桿菌為產誘導型頭孢菌素酶的細菌，部分菌株產生質粒型β－內酰胺酶，給治療帶來困難。我院血培養未發現耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌，未發現對利奈唑胺、萬古霉素、替考拉寧耐藥的葡萄球菌，應與我院抗菌藥物的合理使用，耐藥細菌監測活動等有關。提示萬古霉素和利奈唑胺可作為葡萄球菌引起血液感染的首選用藥，但應注意耐甲氧西林葡萄球菌的產生，嚴格掌握萬古霉素的使用適應癥。

綜上所述，本院血培養標本分離的病原菌分布較廣，耐藥性較強。臨床應按照血培養指征及時送檢血液標本，快速、規范化的血培養可準確地檢出病原菌及藥敏結果，向臨床提供更可靠的早期診斷及合理用藥依據。

[1]倪語星,尚紅.臨床微生物學與檢驗[M].第4版.北京:人民衛生出版社,2007:559-561．

[2]Almirante B,Rodriguez D,Park BJ,et al.Epidemiology and predictors of mortality in cases of Candida bloodstream infection:results from population-based surveillance,Barcelona,Spain,from 2002 to 2003[J].JClin Microbiol,2005,43(4):1829-1835.

[3]關幼華，周金鳳，區云枝.血培養菌株分布與陽性報警時間的意義[J].檢驗醫學,2013,28(4):263-266.

[4]CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Twenty-Fourth Informational Supplement.CLSI document M100-S24.Wayne,PA:Clinical and Laboratory Standards Institute;2014.

[5]趙英妹,張玨,喬昀.血培養陽性病原菌分布及耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(7):884-885.

[6]崔惠景,張芳,常軍霞.血培養主要病原菌分布及耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(7):874-875.

[7]肖新利,雷金娥,何弦.血培養分離病原菌分布特點以及耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(14):1888-1890.

[8]芮勇宇,蔡貞.1602株血培養病原菌種類及耐藥性分析[J].檢驗醫學與臨床,2013,10(12):1495-1497.

[9]吳紹蓮,胡辛蘭,池春燕.血培養常見病原菌的變遷和耐藥性分析[J].實驗與檢驗醫學,2013,31(2):138-163.

[10]林曉暉,梁衛芳,嚴智敏，等.275例血培養陽性標本的病原菌構成及耐藥性分析[J].中國抗生素雜志,2011,36(12):943-947.

[11]強雪芹,張爽,辛力華.2011-2012年血培養病原菌分布及耐藥性變遷[J].中華醫院感染學雜志,2014,24(1):36-38.

[12]Healy CM,Baker CJ,Palazzi DL,et al.Distinguishing true coagulase-negative Staphylococcus infections from contaminants in the neonatal intensive care unit[J].JPerinatolm,2013,33(1):52-58.

[13]Skvarc M,Stubljar D,Rogina P,et al.Non-culturebased methods to diagnose bloodstream infection：does it work[J].Eur JMicrobiol Immunol(Bp),2013,3(2):97-104.

[14]Afshari A,Schrenzel J,Ieven M,et al.Bench-to-bedside review:rapid molecular diagnostics for bloodstream infection-a new frontier[J].Crit Care,2012,16(3):222.

[15]劉燁華,穆紅,張堅磊.血培養菌譜調查及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志,2011,21(13):2807-2809．

[16]王潔,劉方久,熊武芳.3164份血液標本中病原菌的分布及耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(24):3385-3387.