血漿內毒素定量檢測臨床應用探討

胡建華，萬向農，周蔚，張茜，黃建平

(武警江西總隊醫院檢驗科，江西 南 昌 3 30030)

對內毒素血癥，革蘭陰性菌敗血癥和革蘭陰性菌感染，早期發現患者是否合并感染，可進行革蘭陰性菌細胞壁上的內毒素檢測。血漿內毒素定量檢測，對疾病的嚴重程度及全身炎癥反應水平、預后，指導臨床使用更合理抗菌方案，也有重要臨床意義。本文對血漿內毒素定量檢測臨床應用進行綜合分析，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測對象 選擇2013年11月至2015年2月我院收治入院患者。其中急性膽管炎患者35例；燒傷患者32例；肝硬化患者36例；對照組為門診健康體檢者60例。

1.2 方法 用無熱原肝素鈉抗凝真空采血管采集待檢患者靜脈血2ml以上，立即送檢，采用動態濁度法檢測原理，鱟試驗微生物檢測系統ELx808型上檢測，嚴格按操作說明進行。鱟試驗微生物檢測系統、鱟試驗及配套質控品，由廈門鱟試劑實驗廠有限公司提供。試驗所用器皿均去除外源性的細菌內毒素，不宜用搪瓷、不銹鋼類器具，因鐵、鋁離子均可降低內毒素活性，產生假陰性結果。

1.3 統計學處理 采用SPSS13.0統計軟件處理。指標檢測結果采用均數±標準差(x±s)表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 結果見表1、表2。

表1 各組血漿內毒素測定陽性率統計

表2 各組血漿內毒素測定水平(±s)

表2 各組血漿內毒素測定水平(±s)

組別 例數 內毒素水平(Eu/ml)急性膽管炎組燒傷組肝硬化組對照組35 32 36 60 0.2853±0.0967 0.4358±0.0891 0.3043±0.0837 0.0512±0.0206

2.2 以血漿內毒素水平0.1Eu/ml標準臨界值。樣本內毒素含量≥0.1Eu/ml時，表明該樣本有細菌內毒素存在，但并不表示該樣本一定存在革蘭陰性菌活菌。病變組與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.01)。

3 討論

濁度法是根據內毒素與鱟試劑反應在形成凝膠過程中的濁度變化進行定量檢測的一種體外實驗方法，具有快速、簡捷、定量準確等優點[1]，克服了凝膠法主觀人為判斷等因素影響，結果準確。國內臨床應用較多的是血液內毒素的測定，方法已比較成熟[2]。

正常人體中檢測不到或僅有極低水平的內毒素。腸道內細菌分解產生大量內毒素，在全身炎癥反應等情況下，腸道黏膜屏障功能損傷導致腸道內毒素通過損傷的腸道黏膜易位入門靜脈至體循環，產生內毒素血癥。內毒素/脂多糖(LPS)是革蘭陰性菌外膜的主要成分，已證實它是介導膿毒癥的主要致病因素之一[3]。

當微生物侵入血液迅速繁殖超出機體免疫系統清除這些微生物的能力時形成菌血癥或真菌血癥(統稱血流感染)，并可感染血管外組織，屬臨床醫學急癥[4]。入侵到人體內臟和體循環的細菌或細菌代謝產物包括內毒素可被肝臟網狀內皮吞噬系統破壞。當肝臟功能受損，特別是在肝內瘀滯膽紅素、膽汁酸時，枯否細胞吞噬滅活內毒素功能受到明顯抑制[5]。肝硬化時內毒素血癥發生率甚高[6]。急性膽管炎時膽道壓力增高，造成毛細血管破裂、壞死，膽汁中革蘭陰性菌裂解釋放出的內毒素可經肝細胞屏障直接進入肝血流而導致內毒素血癥。

燒傷后常伴有感染，尤其是大面積嚴重燒傷，感染后細菌釋放大量內毒素，引發內毒素血癥。

各種疾病都有比較高的檢出率(見表1、表2)，由此提示定量檢測人血漿中內毒素水平有助于明確病情判斷。值得注意的是,抗生素在殺菌的同時也會誘導細菌類毒素的釋放，嚴重時將導致炎癥介質的大量釋放和級聯放大效應，造成組織損傷和器官功能受損害[7]。因此判斷革蘭陽性菌或革蘭陰性菌感染可通過鱟試驗檢測細菌內毒素，作為選擇使用更合理抗菌藥物方案，針對性用藥，防止二重感染。

臨床上，由于多方面因素的影響，血培養陰性結果并不能排除不存在細菌感染，而血漿內毒素測定不受體內細菌存活，抗生素的使用等影響，方法簡便、快捷、有一定的臨床使用價值。

[1]狄亞敏,沈娟,王燕,等.動態濁度法檢測刺五加注射液中的細菌內毒素[J].解放軍藥學學報,2006,22(2):142-144.

[2]徐修禮,詹遠長,張建芳,等.尿液內毒素定量測定快速診斷革蘭陰性菌尿路感染的研究[J].中華檢驗醫學雜志,2006,29(10):929-930.

[3]Trent MS,Stead CM,Tran AX,et al.Diversity of endotoxin and its impact on pathogenesis[J].J Endotoxin Res,2006,12(4):205-223.

[4]喬亞峰,葉振東,張國雄,等.血培養常見病原菌的分布及耐藥分析[J].實驗與檢驗醫學,2011,29(2):136-144.

[5]彭科軍,池萍,曹英浩,等.不同程度肝硬化患者肝移植圍手術期血漿內毒素的變化[J].臨床麻醉學雜志,2013,29(12):1149-1151.

[6]張艷,雷鳴,孫慶芳.肝硬化患者血漿內毒素、內皮素-1和-氧化氮水平變化及相關性研實 [J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(21):2572-2575.

[7]郭毅斌,鄭江,曹紅衛,等.蜂毒肽MP-1體外拮抗內毒素作用及其機制[J].中華創傷雜志,2009,25(2):164-168.