高效液相色譜法測定注射用炎琥寧含量

錢永健，陳永壯

(廣州市婦女兒童醫療中心，廣東 廣州 510623)

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高效液相色譜法測定注射用炎琥寧含量

錢永健，陳永壯

(廣州市婦女兒童醫療中心，廣東 廣州 510623)

目的：建立高效液相色譜法測定注射用炎琥寧的含量。方法：采用DiamonsilTMC18柱(4.6mm×200mm,5μm)，流動相為甲醇-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀溶液(pH=3.00), 流速為1.0mL/min，檢測波長為251nm。結果：在40.2～281μg/mL范圍內，炎琥寧峰面積與測定濃度線性范圍為0.520～0.157mg·mL-1，呈現良好的線性關系(r=0.999 9)，平均回收率為99.9%，重復性試驗RSD為0.49%。結論：采用高效液相色譜法測定注射用炎琥寧含量方法準確，簡便快速，重現性好，值得在測定注射用炎琥寧制劑中推廣應用。

注射用炎琥寧；高效液相色譜法；含量

炎琥寧主要用于治療病毒性肺炎和病毒性上呼吸道感染，由穿心蓮提取物經脫水、醋化、成鹽精制而成，可特異性興奮垂體-腎上腺皮質功能和抑制早期毛細血管通透性增高，具有體外滅活腺病毒、呼吸道病毒及流感病毒等作用[1]。臨床通常采用紫外分光光度法測量炎琥寧含量，精密度低，重現性差，處理較為繁瑣。為更好地控制產品質量，本文采用高效液相色譜法測定注射用炎琥寧的含量，該方法準確，簡便快速，重現性好，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

高效液相色譜儀器(美國安捷倫)；磷酸二氫鉀(分析純，山東省化工研究院)；甲醇(色譜純，天津四友生物醫學技術有限公司)[2]；脫水穿心蓮內脂琥珀酸半脂對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：111598-200301)；注射用炎琥寧(湖北德益醫藥有限公司，批號：H20044463)。

1.2 色譜條件

DiamonsilTMC18柱(4.6mm×200mm,5μm)，流動相為甲醇-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀溶液(pH=3.00), 流速為1.0mL/min,檢測波長為251nm，柱溫：室溫。在上述條件下，注射用炎琥寧與其他組分能達到基線分離。見圖1。

圖1 注射用炎琥寧高效液相色譜

2 結果

2.1 線性關系

選取10.03mg脫水穿心蓮內脂琥珀酸半脂對照品，精密稱取放置25mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并定容，用流動相稀釋至刻度，搖勻。取濃度分別為0.6、0.9、1.2、1.5、1.8mg·mL-1溶液各20μL注入液相色譜儀，記錄峰面積變化。以峰面積(A)為縱坐標、濃度(C，mg·mL-1)為橫坐標，繪制標準曲線，回歸方程為：A=8.278×103C-9.295，r=0.999 1。試驗結果表明：在40.2～281μg/mL范圍內，炎琥寧峰面積與測定濃度線性范圍為0.52～0.157mg·mL-1，線性關系良好(r=0.999 9)。

2.2 溶液穩定性

取相當于炎琥寧20mg的本品適量，精密稱取后放置10mL容量瓶中，用流動相溶解稀釋至刻度，搖勻；按“1.2”項色譜條件分別于0、2、4、6、8h進樣20μL，所測峰面積的平均RSD為1.36%，試驗結果表明，在8h內供試品溶液中炎琥寧穩定。

2.3 干擾試驗

按處方規定對空白輔料溶液進行配制，選取15mg甘露醇精密稱量，放置25mL容量瓶中，用流動相溶解稀釋至刻度，搖勻。精密量取1mL，放置25mL容量瓶，用流動相溶解稀釋至刻度，搖勻。在液相色譜儀中注入20μL，并記錄色譜圖。試驗結果表明：樣品不受空白輔料溶液影響。

2.4 重復性試驗

取相同批次樣品，根據處方規定配制6份供試品溶液，按“1.2”項色譜條件測定計算含量，RSD為0.49%。見表1。

表1 樣品重復性測定結果 (%)

2.5 回收率試驗

選取適量脫水穿心蓮內脂琥珀酸半脂對照品和98.44%本品，精密稱取置于10mL容量瓶中，用流動相溶解稀釋至刻度，搖勻，選取5mL放置100mL量瓶中，用流動相溶解稀釋至刻度，測定得平均回收率為99.9%。見表2。

表2 炎琥寧回收率試驗結果

3 討論

高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)，又稱高分離度液相色譜、高壓液相色譜，以液體為流動相，是色譜法的一個重要分支。該方法主要采用高壓輸液系統將不同極性的單一溶劑或緩沖液等流動相泵裝入固定相色譜柱，各成分在柱內被分離后進入檢測器檢測，分析試樣[3-4]。高效液相色譜法主要特點為：①高速：載液速度快，分析速度快，快于傳統色譜法速度，1個樣品可在15～30min內完成測量，有些樣品僅需5min即可完成；②高壓：流動相為液體，流經色譜柱時受到較大阻力，故對載液加高壓才能迅速通過色譜柱；③高靈敏度：進樣量為10-9數量級，紫外檢測器可達0.01ng；④應用范圍廣：高效液相色譜可分析70%以上的有機化合物，尤其對大分子、高沸點及熱穩定性化合物優勢最為明顯。

近年來，高效液相色譜法已成為藥物研制開發、藥品檢驗部門及醫院臨床檢驗等各個領域藥物質量控制中的重要技術和方法。采用該方法測定藥物含量可消除藥物制劑中附加劑、共存藥物或雜質對測定的干擾，因此高效液相色譜法廣泛應用于藥物成分含量的測定[5]。注射用炎琥寧化學名稱為19-二琥珀酸半酯鉀鈉鹽一水物,14-脫羥-11,12-二脫氫穿心蓮內酯-3，化學結構式為C28H34KNaO10·H2O，輔料為甘露醇和碳酸氫鈉，主要用于治療病毒性肺炎和病毒性上呼吸道感染疾病。本文采用高效液相色譜法測定注射用炎琥寧，炎琥寧保留時間約為6.65min，有較好的主峰對稱，具有準確、簡便等特點，適用于炎琥寧及其制劑的生產及臨床質量控制。

綜上所述，采用高效液相色譜法測定注射用炎琥寧含量方法準確，簡便快速，重現性好，值得在測定注射用炎琥寧制劑中推廣應用。

[1] 韋曦,歐陽小琳,許盈,等.炎琥寧的含量測定及其與常用輸液和藥物的配伍變化[J].兒科藥學雜志,2012,18(8):28-31.

[2] 史明,鄭芳,李鵬,等.注射用頭孢尼西鈉與注射用炎琥寧配伍穩定性考察[J].醫藥導報,2011,30(2):254-256.

[3] 趙敏.反相高效液相色譜法測定注射用炎琥寧與注射用更昔洛韋的配伍使用[J].中外健康文摘,2012,09(22):135-136.

[4] 林恒寬,林恒道.氯霉素注射液與注射用炎琥寧的配伍穩定性[J].臨床醫學,2013,33(3):102-104.

[5] 楊勝利.注射用炎琥寧與注射用頭孢拉定的配伍穩定性分析[J].中西醫結合心血管病電子雜志,2014(5):48-48.

(責任編輯：李嵐春)

2014-10-30

錢永健(1980-)，男，廣州市婦女兒童醫療中心主管藥師，研究方向為臨床藥理。

R284.2

A

1673-2197(2015)04-0043-02

10.11954/ytctyy.201504019