摘要:目的 探討常規(guī)切片時(shí)間長(zhǎng),放置蠟塊的冰盤易化成水,使蠟塊變軟,使切片速度變慢及影響切片質(zhì)量的方法。方法 分別在-10℃冷臺(tái)、冰盤各放置50個(gè)待切蠟塊,按照平常的工作方式進(jìn)行常規(guī)切片,并鏡下觀察比較切片質(zhì)量。結(jié)果 采用冷臺(tái)的切片速度和質(zhì)量?jī)?yōu)于采用冰盤的。結(jié)論 使用冷臺(tái)可以加快切片速度及更好切片,使切片質(zhì)量得到更好的提高。
關(guān)鍵詞:可調(diào)控溫度;冷臺(tái);病理切片;應(yīng)用
1 材料與方法
1.1材料 選取汕頭市中心醫(yī)院病理科2014年5月12日常規(guī)手術(shù)切除標(biāo)本,按規(guī)范[1]進(jìn)行取材、固定、脫水、透明、浸蠟、包埋過(guò)程,制作成石蠟蠟塊,進(jìn)行挑選蠟塊100個(gè),蠟塊的挑選按照盡量同一病例同一部位的腫瘤組織各取兩個(gè)的原則,這樣才有更好的可比性,并按照相對(duì)應(yīng)的標(biāo)本進(jìn)行編號(hào)。
1.2方法
1.2.1分別在預(yù)設(shè)好溫度-10℃冷臺(tái)(維格斯CP380型)、冰盤上各放置組織相對(duì)應(yīng)50個(gè)蠟塊,都凍上15min,冰盤的蠟塊放于冰箱冷藏室內(nèi)。
1.2.2將冷臺(tái)、冰盤凍好的蠟塊分別由兩組技術(shù)人員,按照平時(shí)方式,進(jìn)行常規(guī)切片[2],并對(duì)各自50個(gè)蠟塊切片的時(shí)間,同時(shí)進(jìn)行計(jì)時(shí)。
1.2.3將兩組切片,都放在60℃烤箱烤60min。
1.2.4最后在櫻花全自動(dòng)染色封片一體機(jī)上進(jìn)行常規(guī)HE染色,封片,由同一個(gè)醫(yī)生鏡下觀察每張切片質(zhì)量,并做好切片質(zhì)量報(bào)告。
2 結(jié)果
采用-10℃冷臺(tái)的切片時(shí)間為22min,切片效果相對(duì)較好、滿意;采用冰盤的切片時(shí)間為28min,較久,切片效果剛開始的蠟塊切片的效果還是較滿意,后面蠟塊的開始慢慢變軟,切的效果一般,稍厚。
3 討論
在傳統(tǒng)的病理切片過(guò)程中,包括許多大醫(yī)院采用冰盤來(lái)冷凍蠟塊,使蠟塊的硬度適宜,好切,但冰盤隨之在室內(nèi)放置的時(shí)間越來(lái)越久,尤其是夏天,容易化成水溫度降低,沒法使蠟塊達(dá)到適宜的硬度,無(wú)法切出完整的切片或是切出的切片出現(xiàn)皺折,大大降低了切片的速度和質(zhì)量[3]。本次實(shí)驗(yàn)通過(guò)可調(diào)控溫度冷臺(tái)與冰盤在病理切片的比較分析,覺得冷臺(tái)的實(shí)用性是優(yōu)于冰盤的。
冷臺(tái)在病理科較普遍應(yīng)用于包埋過(guò)程中,置于包埋機(jī)旁邊,用于速凍剛包埋好的模蠟塊,讓石蠟與組織凝固、不易變動(dòng)位置,以便更快的做好蠟塊;小型的冷凍臺(tái)還應(yīng)用于快速冷凍切片機(jī)里面,加快組織與OCT的凝結(jié),達(dá)到快速冷凍組織,進(jìn)行快速冰凍切片等。
本次實(shí)驗(yàn)采用可調(diào)控溫度冷臺(tái)應(yīng)用于病理切片,其主要原理是采用壓縮機(jī)制冷系統(tǒng),臺(tái)面結(jié)滿冰霜,表面平整均勻,使蠟塊快速冷卻;冷臺(tái)可一次性容納70個(gè)蠟塊,可以縮減更換蠟塊冷凍的次數(shù);可自由設(shè)定溫度(室溫到零下15℃),本試驗(yàn)冷臺(tái)采用的是-10℃,是參考相關(guān)文獻(xiàn)資料[4]和實(shí)踐工作中得出的,如下所述:冷臺(tái)處于-5℃時(shí),蠟塊的切片效果一般,而對(duì)于纖維組織多、致密、富含脂肪組織者, 在這個(gè)溫度下的蠟塊的硬度是不夠的, 無(wú)法切出完整的切片或是切片出現(xiàn)皺折;冷臺(tái)處于-10℃時(shí),對(duì)大多數(shù)的標(biāo)本蠟塊來(lái)說(shuō), 切片的效果是較為滿意,此時(shí)蠟塊的硬度適宜, 比較容易切出滿意的切片, 但是對(duì)于含脂肪組織較多的組織蠟塊, 有時(shí)仍難以切出令人滿意的片子;冷臺(tái)處于-15℃時(shí), 蠟塊會(huì)變硬易碎,也就是蠟塊出現(xiàn)凍裂現(xiàn)象,則難以切出完整的片子, 特別對(duì)于含纖維組織較少的蠟塊, 如前列腺組織,甲狀腺組織,宮內(nèi)膜組織等, 切出的片子在顯微鏡下觀察常有裂隙現(xiàn)象,即蠟塊出現(xiàn)凍裂。不同的溫度的蠟塊對(duì)于病理切片還是有影響的,所以可調(diào)控溫度冷臺(tái)在病理切片起了很大的作用,它可以根據(jù)組織的不同而選擇適宜的溫度,但同一溫度下的蠟塊,標(biāo)本不同,其組織結(jié)構(gòu)、成分不同, 其物理性狀也不同,切片效果也是不盡相同的。因此,不能一概而論的說(shuō),采用同一適當(dāng)溫度的冷臺(tái)就可以切出好的片子,要看許多因素的。
可調(diào)節(jié)溫度的冷臺(tái)應(yīng)用于病理切片中,既能達(dá)到保持蠟塊的硬度適宜和整個(gè)切面都充分凍均勻,又解決冰盤化成水、表面凹凸不平很難將整個(gè)蠟塊切面充分凍均勻,需要反復(fù)換冰盤的問(wèn)題,加快了切片的速度和提高了切片質(zhì)量;而且冷凍臺(tái)的面積大,可放置較多的待切蠟塊,尤其是做免疫組化的蠟塊,切片質(zhì)量甚是滿意。但由于冷臺(tái)的體積都相對(duì)較大,在我們國(guó)內(nèi)許多的病理科空間都較狹小,切片臺(tái)的面積都不打,擺放還是較難,有待病理科技術(shù)室的規(guī)模空間擴(kuò)大的情況下,可調(diào)節(jié)溫度的冷臺(tái)會(huì)廣泛應(yīng)用于病理切片過(guò)程中。
凍好每個(gè)蠟塊,保證蠟塊的硬度適宜,在病理切片過(guò)程中是影響切片質(zhì)量的重要因素,很多技術(shù)員沒給予重視,因此可調(diào)節(jié)溫度冷臺(tái)是值得在我們病理實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用的,尤其是在病理切片中的應(yīng)用。
參考文獻(xiàn):
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[3]方慶全,陳宏.病理切片常出現(xiàn)的問(wèn)題及對(duì)策[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2010,17(6):568-569.
[4]張同海,樊克武.不同的溫度在病理切片制作中的影響[B].實(shí)用醫(yī)技雜志,2006,13-14.
編輯/成森