微柱凝膠技術(shù)提高輸血安全性和有效性的應(yīng)用評(píng)價(jià)

摘要：目的 探討微柱凝膠技術(shù)提高臨床輸血安全性和有效性的應(yīng)用價(jià)值。方法 用微柱凝膠和凝聚胺配血法同時(shí)對(duì)臨床血樣進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，陽(yáng)性結(jié)果用傳統(tǒng)抗球蛋白試驗(yàn)鑒定比對(duì)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 微柱凝膠技術(shù)具有更高的檢出配血不合不完全抗體的敏感性，與傳統(tǒng)抗球蛋白配血法有更高的符合性。結(jié)論 微柱凝膠技術(shù)應(yīng)用于臨床輸血工作中具有更多優(yōu)勢(shì)，適合各級(jí)醫(yī)院廣泛使用。

關(guān)鍵詞：微柱凝膠技術(shù)；交叉配血；不完全抗體

交叉配血是臨床輸血前必須做的紅細(xì)胞系統(tǒng)的配合性試驗(yàn)，以確定受者和供者血液中沒(méi)有可測(cè)的不相配合的抗原和抗體成分。鹽水配血法僅用于檢查ABO血型系統(tǒng)的IgM血型抗體是否相配，不能檢出不相配的IgG血型抗體。凝聚胺法是臨床常用的配血方法，傳統(tǒng)的抗人球蛋白法被認(rèn)為配血結(jié)果最準(zhǔn)確，本次研究用新型的微柱凝膠配血法與凝聚胺法作比較，并使用傳統(tǒng)抗球蛋白法作對(duì)比鑒定，判斷其臨床價(jià)值。

1材料與方法

1.1儀器與試劑 微柱凝膠抗人球蛋白配血卡、專用離心機(jī)及孵育器為長(zhǎng)春博迅公司產(chǎn)品，廣譜抗人球蛋白由上海血液中心提供，凝聚胺試劑來(lái)自珠海貝索生物技術(shù)公司。普通血清離心機(jī)，EDTA-K2抗凝真空采血管。

1.2標(biāo)本 為附院2014年7月～2015年2月需輸血患者600例，其中男353例，女247例，年齡 16～82歲，平均年齡為（41.6±8.5）歲，用含有抗凝劑的真空采血管采集靜脈血2 ml。供血者血樣由市中心血站提供。

1.3方法 微柱凝膠卡配血操作為制備受血者和供血者1.0%的紅細(xì)胞懸液；凝膠卡編號(hào)主測(cè)加供者紅細(xì)胞懸液和患者的血漿， 次測(cè)加受者紅細(xì)胞懸液和供者的血漿，37℃于孵育器中孵育15 min，之后將其放入專用卡式離心機(jī)中離心5 min并判讀結(jié)果。離心后紅細(xì)胞在微柱中間或上方沉積為陽(yáng)性， 離心后紅細(xì)胞沉積在微柱底層為陰性。凝聚胺法和傳統(tǒng)抗人球蛋白配血參照試劑說(shuō)明書(shū)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 16.0軟件，組間比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

微柱凝膠配血有16例（2.67%）主測(cè)或次測(cè)出現(xiàn)凝集，凝聚胺配血有11例（1.83%）主測(cè)或次測(cè)出現(xiàn)凝集。對(duì)所有配血不合血樣用傳統(tǒng)抗球蛋白法配血對(duì)比凝聚胺法均為陽(yáng)性，微柱法有15例配血符合。結(jié)果表明微柱凝膠配血法在不完全抗體配血不合檢出率上高于凝聚胺法；微柱法配血有一例假陽(yáng)性經(jīng)查為標(biāo)本因素，微柱凝膠卡法與傳統(tǒng)抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3討論

在交叉配血中要求所用檢測(cè)方法可將具有臨床意義的所有抗體成功檢出，從而為輸血安全型提供保證，而抗人球蛋白法和凝聚胺法是我國(guó)目前最常采用的可將IgG與IgM抗體同時(shí)檢出的交叉配血方法[1]。抗人球蛋白法是現(xiàn)階段不規(guī)則抗體經(jīng)典測(cè)定方法，具有較高準(zhǔn)確性[2]，然而操作較繁瑣，需多次洗滌，需要時(shí)間長(zhǎng)，試劑較貴，故始終未能成為臨床常規(guī)的配血檢測(cè)手段。

凝聚胺法是臨床上使用的新型試驗(yàn)方法，具有操作簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)[3]。其原理為凝聚胺是一種高價(jià)陽(yáng)離子季銨鹽多聚物，溶解后產(chǎn)生正電荷，可中和紅細(xì)胞表面帶負(fù)電荷的唾液酸，減少細(xì)胞間排斥力，使紅細(xì)胞發(fā)生非特異性凝集。正常紅細(xì)胞可引起非特異性凝集為可逆性的，如果是抗體致敏紅細(xì)胞被凝聚胺凝集，則是特異性的不可逆的凝集。但如果紅細(xì)胞被相應(yīng)的抗體致敏，則會(huì)被凝聚胺凝結(jié)，凝集就不會(huì)散開(kāi)，試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性。但凝聚胺法會(huì)受到肝素、冷凝集等因素影響，操作人員在判斷結(jié)果時(shí)需具備一定經(jīng)驗(yàn)，靈敏度較低， 同時(shí)對(duì)操作者技術(shù)要求也較高，這就導(dǎo)致判斷結(jié)果時(shí)具有一定不確定性，在一些時(shí)候還需借助于抗人球蛋白法確認(rèn)結(jié)果[4]。

微柱凝膠技術(shù)可以篩查不規(guī)則抗體的存在，大大提高臨床用血安全，成為國(guó)際公認(rèn)的安全輸血的推薦方法[5]。其原理是抗原抗體反應(yīng)和凝膠過(guò)濾技術(shù)結(jié)合而成， 通過(guò)對(duì)凝膠濃度加以調(diào)節(jié)， 對(duì)凝膠間隙大小進(jìn)行控制， 促使其間隙只能通過(guò)游離紅細(xì)胞， 致使聚集紅細(xì)胞與游離紅細(xì)胞充分分離。如果離心后紅細(xì)胞在凝膠管中間或上部聚集， 說(shuō)明其已凝聚， 檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性， 若其只出現(xiàn)在凝膠管底部， 則說(shuō)明其未出現(xiàn)凝集凝聚， 檢測(cè)結(jié)果為陰性。但在具體操作中應(yīng)注意一些因素影響，如受者血漿含有纖維蛋白原或供者血液抗凝不好含有凝集小塊通過(guò)微柱時(shí)可導(dǎo)致假陽(yáng)性[6]。

本次研究表明微柱凝膠檢出不相配合血液敏感性高于凝聚胺法，與傳統(tǒng)抗球蛋白法符合性更高，且具有操作簡(jiǎn)單、易于標(biāo)準(zhǔn)化、對(duì)檢驗(yàn)技能要求低、結(jié)果穩(wěn)定、易于保存且可自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，適合各級(jí)醫(yī)院廣泛使用。

參考文獻(xiàn)：

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[2]周建月，韋喜敢，梁春峰，等.血小板抗體檢測(cè)及交叉配血結(jié)果分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2011，40（34）：3503-3505.

[3]許麗影.觀察微柱凝膠技術(shù)在臨床配血標(biāo)本檢測(cè)及臨床輸血中的價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，11（33）：66-67.

[4]劉靜.微柱凝膠技術(shù)在交叉配血中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2014，9（17）：271-272.

[5]王華玲.卡式微柱凝膠試驗(yàn)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用.中國(guó)社區(qū)醫(yī)師（醫(yī)學(xué)專業(yè)），2012，14（35）：216.

[6]馬海龍.微柱凝膠配血影響因素分析.中國(guó)社區(qū)醫(yī)師（醫(yī)學(xué)專業(yè)），2012，14（6）：254-255

編輯/張燕