苦蕎茶對(duì)衰老小鼠腎組織SOD和MDA的影響

摘要：目的 探討苦蕎茶對(duì)衰老小鼠腎組織酶的影響。方法 采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法對(duì)D-半乳糖所致衰老的雄性小鼠腎組織超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果 衰老模型組小鼠腎組織的SOD活性明顯低于空白對(duì)照組和苦蕎茶中、高劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；衰老模型組小鼠腎組織的MDA含量明顯高于空白對(duì)照組和苦蕎茶各劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論 苦蕎茶可有效提高D-半乳糖所致衰老小鼠SOD活性，降低MDA含量。

關(guān)鍵詞：苦蕎茶；SOD；MDA；衰老小鼠

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

Abstract：Objective To study tartary buckwheat tea on enzymes in kidney tissue of aging mice induced by D-galactose. Methods To use animal experimental method of Superoxide dismutase （SOD），malondialdehyde （MDA） in male mice after debilitating. Results Activity of SOD in kidney tissue of the aging model mice was signi？cantly lower than that of blank control group and the tartary buckwheat tea middle and high dose groups；content of MDA in kidney tissue of the aging model mice was signi cantly higher than the blank control group and the experimental groups. Conclusion Tartary buckwheat tea had significantly improved the activity of SOD of aging mice induced by D-galactose，decreased the content of MDA significantly.

Key words：Tartary buckwheat tea；SOD； MDA；Aging mice

苦蕎主要分布在我國(guó)的西南云貴高原以及北方的陜西、山西、河北、內(nèi)蒙一帶[1]。苦蕎味苦，性平寒，能實(shí)腸胃，益氣力，續(xù)精神，利耳目，煉五臟渣穢，主治胃脘脹痛、消化不良、痢疾、腰腿痛、跌打損傷、癰腫惡瘡、狂犬咬傷等癥。研究表明，苦蕎黃酮具有較強(qiáng)的抗氧化作用，具有清除自由基的能力，相關(guān)研究認(rèn)為其清除超氧化陰離子自由基的能力要遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于茶多酚[2]。本研究通過(guò)建立動(dòng)物模型，了解苦蕎茶對(duì)衰老小鼠腎組織SOD、MDA的影響，探討苦蕎茶的抗衰老作用。

1 資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為昆明種雄性小鼠，體重（20.89±2.62）g，購(gòu)自內(nèi)蒙古大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，為清潔級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)：SCX（蒙）2002-0001。

1.1.2實(shí)驗(yàn)主要試劑 D-半乳糖、批號(hào)060227、美國(guó)Amresco公司，超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)試劑盒，批號(hào) 20130205，南京建成生物工程研究所；丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒，批號(hào)20130104，南京建成生物工程研究所；苦蕎茶，包頭市某食品有限公司生產(chǎn)。

1.1.3主要儀器設(shè)備 高速臺(tái)式離心機(jī)TGL-16B，儀表恒溫水浴鍋，S-Z型快速混勻器，T6分光光度計(jì)，電光分析天平TG328A。

1.2 方法

1.2.1動(dòng)物分組及處理 將60只健康昆明種雄性小鼠按體重隨機(jī)分為5組，每組12只，分別為空白對(duì)照組、衰老模型組、苦蕎茶低劑量組、苦蕎茶中劑量組和苦蕎茶高劑量組。其中苦蕎茶低、中和高劑量組分別按苦蕎茶2.5g/kg、5g/kg、10g/kg的劑量給予。實(shí)驗(yàn)期間空白對(duì)照組每日腹腔注射生理鹽水0.12g/kg，其余4組每日腹腔注射D-半乳糖0.12g/kg，連續(xù)6w，適應(yīng)性喂養(yǎng)4w開始灌胃，空白對(duì)照組和衰老模型組以涼白開進(jìn)行灌胃（5g/kg）/d，其余組按相應(yīng)的苦蕎茶劑量進(jìn)行灌胃，連續(xù)進(jìn)行6w。實(shí)驗(yàn)期間，1次/w稱體重。第42d斷頭處死小鼠，稱體重，取小鼠的腎組織測(cè)定其SOD活性和MDA含量。

1.2.2腎組織勻漿的制備 處死小鼠后，迅速取出小鼠的腎組織，采用手工勻漿，刨離干凈，用冷生理鹽水沖洗，出去血液，并用濾紙吸干，放在5ml的小燒杯中，用移液管向盛有臟器的燒杯中加入4.5ml的冷生理鹽水，然后用眼科小剪迅速剪碎組織，放入玻璃勻漿管，補(bǔ)足冷生理鹽水制成10%組織勻漿，然后用離心機(jī)3500轉(zhuǎn)/min，離心10min，取適量上清液進(jìn)行腎組織SOD活性和MDA含量測(cè)定。

1.3數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析 實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)以表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，用方差分析比較其組間差異。

2 結(jié)果

2.1各組小鼠體重變化情況 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組小鼠體重均有增加，空白對(duì)照組與苦蕎茶3個(gè)劑量組之間平均體重之間變化無(wú)差異（P>0.05），而衰老模型組與其他4組之間平均體重有顯著性差異（P<0.01），說(shuō)明D-半乳糖對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)有明顯影響見表1。

2.2各組小鼠腎組織SOD測(cè)定結(jié)果比較 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，衰老模型組與空白對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），與苦蕎茶中、高劑量組比較，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），而苦蕎茶低劑量組與其比較SOD活性提高但趨勢(shì)不明顯。提示苦蕎茶飲用到一定劑量后可明顯提高衰老小鼠腎組織SOD活性見表2。

2.3各組小鼠腎組織MDA含量測(cè)定結(jié)果比較 與空白對(duì)照組相比，衰老模型組小鼠MDA含量顯著增加，而苦蕎茶低、中、高劑量組均可明顯降低衰老小鼠MDA含量，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見表3。

3 討論與結(jié)論

衰老是人體正常新陳代謝的結(jié)果，主要與機(jī)體內(nèi)部機(jī)能的減退有關(guān)，隨著年齡的增長(zhǎng)，身體的生理功能和形態(tài)結(jié)構(gòu)不斷退化，最終表現(xiàn)為衰老。當(dāng)前，眾多學(xué)者致力于衰老原因與機(jī)制的研究，關(guān)于衰老的學(xué)說(shuō)，學(xué)術(shù)界眾說(shuō)紛紜，最終認(rèn)為衰老主要與自由基學(xué)說(shuō)有關(guān)，即通過(guò)改變體內(nèi)的氧化防御系統(tǒng)來(lái)消除自由基，最終起到抗衰老的作用。衰老模型的建立是進(jìn)行衰老研究的關(guān)鍵，給動(dòng)物注射大劑量D-半乳糖（D-Gal）后，會(huì)引起全身代謝紊亂，不能被細(xì)胞進(jìn)一步代謝，因而堆積在細(xì)胞內(nèi)，影響正常滲透壓，使多器官功能衰退，最終導(dǎo)致衰老的發(fā)生[3]。大量實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)了自由基的致衰老作用， D-半乳糖衰老模型也得到了自由基衰老學(xué)說(shuō)的支持和驗(yàn)證[4]，其衰老趨勢(shì)在發(fā)展過(guò)程中與自然衰老趨勢(shì)基本一致[5]。本研究顯示，在對(duì)小鼠連續(xù)6w注射D-半乳糖后，衰老模型組各項(xiàng)指標(biāo)與空白對(duì)照組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示造模成功。

SOD是體內(nèi)唯一1種能夠清除氧自由基的酶，一般情況下，對(duì)維持體內(nèi)氧化體系的平衡意義重大[6]。長(zhǎng)期以來(lái)，SOD被作為研究衰老與抗衰老的經(jīng)典指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：苦蕎茶能明顯提高D-半乳糖所致衰老小鼠腎組織SOD活性，清除多余的自由基，這說(shuō)明飲用苦蕎茶可以使機(jī)體中的SOD升高，使其抗氧化能力提高，清除自由基，對(duì)機(jī)體的抗氧化及抗衰老有促進(jìn)作用。

MDA作為脂質(zhì)過(guò)氧化的降解產(chǎn)物，它的含量可間接反映細(xì)胞受自由基損傷的程度，隨著機(jī)體的衰老，MDA含量會(huì)逐漸增加，也是公認(rèn)的衰老指標(biāo)[7]。本實(shí)驗(yàn)中，苦蕎茶低、中、高劑量組均可明顯降低衰老小鼠MDA含量，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，起到延緩衰老的作用。

綜上所述，苦蕎茶可對(duì)D-半乳糖所致衰老小鼠腎組織的SOD活性的下降有一定的回升作用，對(duì)MDA含量升高有一定抑制作用，具有抗氧化功能，延緩衰老。其抗衰老機(jī)制很可能與其提高衰老小鼠機(jī)體抗氧化能力，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化有關(guān)。這為今后苦蕎茶抗衰老作用的研究提供了一定依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]姜忠麗，趙永進(jìn).苦蕎麥的營(yíng)養(yǎng)成分及其保健功能[J].糧食與食品工業(yè)，2003（4）：33-35.

[2]王敏，魏益民，高錦明.苦蕎黃酮的抗脂質(zhì)氧化和紅細(xì)胞保護(hù)作用研究[J].中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2006，6（1）：278-283.

[3]許揚(yáng)，吳濤，顧佳黎，等. D-半乳糖誘導(dǎo)衰老動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2009，13：1710-1713.

[4]龔國(guó)清，徐黻本.小鼠衰老模型研究[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1991，22（2）： 101-103.

[5]洪亮，方勝.三種不同方法建立小鼠衰老模型的比較[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2010，18：2607-2608.

[6]高良才，陳婉容.自由基與衰老[J].生物學(xué)教學(xué)，2001，26：8-10.

[7]肖政華，張光奇.益氣聰明湯對(duì)D-半乳糖衰老小鼠抗自由基作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，33（1）：91-933.編輯/馮焱