正交試驗法優化胃舒口服液中山楂的提取工藝研究

摘 要：比較了兩種從山楂中提取總黃酮苷的方法，最終選擇了用水作提取劑，水提山楂的方法。用正交試驗法選擇最佳工藝條件為：加10倍量的水煎煮提取2次，每次2h。該工藝操作簡單，穩定可行。

關鍵詞：胃舒；山楂；總黃酮；正交試驗法

中圖分類號：R282.4文獻標識碼：A文章編號：2095-7394（2015）02-0060-05

0 引言

胃舒方劑由山楂、麥芽、陳皮、瓜蔞、香櫞、檳榔等六味藥材組成，具有消食導滯、除積消脹、調理腸胃的作用，臨床上用于腹脹、泛酸、惡心或嘔吐、消化功能欠佳等癥狀的治療。方劑中山楂含有的山楂紅色素中含有果膠、果酸、可溶性糖以及黃酮類物質，有開胃助消化的功效。

山楂最早出現在《本草衍義補遺》中，又名紅果、山里紅，歷史悠久，是人們在日常生活中經常食用的一種開胃助消化的果品。山楂中含有山楂紅色素，化學成分研究表明里面含有可溶性糖、果膠、果酸和黃酮類物質，色素屬于天然花青素類，具有抗氧化以及消除自由基的作用。在山楂中總黃酮的含量約為5%，是一種天然產物，目前廣泛應用于醫藥衛生。總黃酮主要活性成分為牡荊素鼠李糖甙和牡荊素葡萄糖甙等，能夠增強心肌的收縮力，增大心輸出量，從而最終將心率減慢。對總黃酮提取工藝的研究，對開發和利用山楂、增加經濟效益具有重要的意義。

1 前處理

山楂：本品為薔薇科植物山里紅或山楂的干燥葉。夏、秋二季采收晾干。

炮制：取原藥材，除去雜質及脫落的核，篩去灰屑。

2 山楂不同提取方法的比較

2.1 提取方法

水煎法。稱取山楂藥材20 g，放入圓底燒瓶中加入水250 ml，浸泡60 min后，加熱回流提取3次，每次2 h，收集濾液，將其濃縮至20 ml，待用。

乙醇回流提取法。稱取山楂藥材20 g，加入8倍量的95%的乙醇回流提取3次，每次提取2 h，合并濾液，濃縮后調節至20 ml，待用。

2.2 不同提取方法的薄層對比

2.2.1 材料與試劑

FA 220413電子天平；

旋轉蒸發器：R系列，上海申生科技有限公司；

SHZ-DⅢ循環水式多用真空泵：鞏義市予華儀器有限責任公司；

CMC-Na及其他試劑均為分析純。

2.2.2 薄層條件

層析板：用0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）制成，大小：5 cmx10 cm，活化0.5 h后，置于干燥器內待用。

展開劑：環己烷-乙酸乙酯-甲酸（20：20：1）

2.2.3 對照藥材溶液的制備

稱取制成一定規格的山楂粉末1.0 g，加入10 ml甲醇并進行超聲處理15 min過濾，收集的濾液作為對照品溶液。

2.2.4 供試品溶液的制備

各量取水煎法和乙醇回流提取兩種方法制得的濃縮液1 ml，分別加入甲醇10 ml后進行超聲處理15 min，取上層的甲醇液作為供試品溶液，標記為a和b。

2.2.5 薄層實驗的結果

各吸取以上a、b液2μl，分別點在同一塊層析板上，用展開劑環己烷-乙酸乙酯-甲酸（20：20：1）展開，取出晾干后，噴以顯色劑（2%的三氯化鐵-乙醇），在105℃下加熱直至斑點顯色清晰。結果顯示，在與對照藥材色譜相應的位置上，供試品的色譜顯示出了同一顏色的主斑點。結果見圖1。

根據以上實驗的結果，可以看出，用水煎法提取出來的樣品顯示的斑點在同一位置比用乙醇提取的樣品顯示的斑點顏色要深，因此，用水煎法可以將山楂中起到開胃助消化的有效成分提取出來。

3 山楂加水提取工藝的研究

由試驗可知，四個因素即加水量、浸泡的時間、煎煮的時間和煎煮的次數都會影響到干膏量、山楂總黃酮的量，因此以這四個因素為依據，進行分析，最終選擇出最合理的提取工藝。

3.1 儀器、材料與試藥

藥材：山碴、瓜蔞、萊菔子等藥材購于江蘇省徐州市敬修堂大藥房。

對照品：蘆丁標準品，購于中國藥品生物制品檢定所。

3.2 對照品溶液的制備

準確稱取蘆丁對照品50 mg，置于250 ml容量瓶中，加65%的乙醇至刻度定容，精密吸取對照品液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 ml，分別置于25 ml容量瓶中，然后分別加入1.0 ml 5%亞硝酸鈉，混勻后，放置10 min，然后加入1.0 ml 10%硝酸鋁，混勻后再放置10 min，加入10.0 ml l.0 mol/L氫氧化鈉溶液，加入65%乙醇至刻度，搖勻，放置20 min。用顯色劑作空白，于504 nm處測其吸收度。以吸光度A（X）對濃度（Y）進行回歸，得線性回歸方程：Y=0.871X+0.007 2（r=0.999 8），在0.008 0～0.056mg/ml范圍內線性關系較好。

3.3 供試品溶液的制備

取水煎提取的樣品液4 ml，加入無水乙醇使成10 ml，振搖混勻，離心10 min，取上清液。精密吸取3 ml，置于25 ml量瓶中，按相應的方法顯色，于504nm處測其吸收度，按照3.2測定方法求出樣品中黃酮含量（以蘆丁計）。

水煎提取工藝的設計方案如下。

稱取山碴、瓜蔞、萊菔子、檳榔等4味藥材共計450 g，在設計的條件下進行提取，收集濾液，濃縮成1 000ml，即為水提取液。量取200ml該濃縮液，放在蒸發皿中水浴蒸干，干燥至恒重，冷卻后精密稱定重量，即為干膏的量。

上表四個研究的因素中，以干膏的量為評價依據時，最合理的提取工藝為A2B2C3D2，以干膏中山楂總黃酮的含量為評價依據時，最佳的提取工藝為A3B2C3D2，；由方差分析知只有D因素（提取的次數）對干膏量以及山楂總黃酮的含量影響較大，而其余因素對干膏量以及山楂總黃酮的含量都影響不大；最終確定水煎的提取工藝為A2B2C3D2。

4 結論

確定山楂的提取工藝如下：山楂加10倍量水浸泡2h，煎煮二次，每次2h，煎液收集后濾過取上清液。

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Abstract：This paper compares two methods of Extracting Total Flavonoids from hawthorn，ultimately chose water as extracting agent，the method of water extraction of hawthorn.Orthogonal test method was used to select the best extraction conditions were as follows：10 times amount of water extracting for 2 times，each time 2h.The process is simple，stable and feasible.

Key words：Weishu；hawthorn；total flavonoids；orthogonal test

責任編輯 祁秀春