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蕎麥花葉黃酮對腸道平滑肌活動的影響

2015-04-26 09:09:24吳立國韓淑英石雪靜石亞靜開灤醫療集團錢家營醫院河北唐山06330河北聯合大學河北唐山063000
亞太傳統醫藥 2015年11期
關鍵詞:黃酮劑量

吳立國,韓淑英,石雪靜,張 英,石亞靜,錢 莊(.開灤醫療集團錢家營醫院,河北 唐山 06330; .河北聯合大學,河北 唐山 063000)

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蕎麥花葉黃酮對腸道平滑肌活動的影響

吳立國1,韓淑英2*,石雪靜2,張 英2,石亞靜2,錢 莊2
(1.開灤醫療集團錢家營醫院,河北 唐山 063301; 2.河北聯合大學,河北 唐山 063000)

目的:研究蕎麥花葉黃酮(FBFL)對腸道平滑肌活動的影響及其作用機制。方法:采用炭末推進法觀察不同劑量FBFL對正常大鼠腸道活動的影響。結果:FBFL能促進正常大鼠炭末推進率,但作用弱于硫酸鎂(P<0.01),并能拮抗阿托品對腸蠕動的抑制作用,呈劑量依賴性(P<0.01)。結論:FBFL對腸平滑肌有興奮作用,其作用機制可能與激動M受體有關。

蕎麥花葉黃酮;腸道平滑??;收縮;阿托品

1 資料與方法

1.1 一般資料

蓼科(Polygonacea)蕎麥屬(FagopyrumMill.)植物在全世界有15種,廣泛分布于亞洲和歐洲,我國有10個種1個變種,有2個種為栽培種[1]。常見的有蕎麥(FagopyrumesculentumMoench)、苦蕎麥(F.tataricum(L.) Gaertn.)和金蕎麥(F.dibotrys(D. Don) Hara),目前對苦蕎麥、金蕎麥的研究較多,而蕎麥主要用作食品,對其研究較少。蕎麥中主要作為糧食應用的成分是蕎麥種子,結果造成大量的花葉被廢棄。蕎麥花葉黃酮(flavones of buckwheat flower and leaf,FBFL) 為其花葉中提取的黃酮類成分。近年來有研究表明FBFL具有降血糖[2]、降血脂[3]、抗氧化[4]等多種生物學作用,但其對腸道平滑肌活動的影響尚未見報道。本實驗旨在研究FBFL對腸道平滑肌活動的影響,并探求其作用機制。

1 材料

1.1 蕎麥花葉黃酮的制備

自然干燥的蕎麥花葉,粉碎,用去離子90℃加熱提取2次,合并濾液,濃縮, 加離劑( 酸性殼聚糖) 攪拌,趁熱過濾,濾液靜置沉淀,過濾得黃色沉淀物為總黃酮,用紫外分光光度法,以蘆丁為標準,測得黃色沉淀物中總黃酮含量為95%[5]。1.2 藥品與試劑

蕎麥花葉:采自內蒙古庫倫旗, 經河北聯合大學中醫學院鑒定確認。硫酸阿托品(Atropin)注射液(貴州光正制藥有限責任公司生產,批號100806);硫酸鎂。墨汁的配制:準確稱取阿拉伯樹膠100g,加水800mL,煮沸至溶液透明,稱取活性炭粉50g加入上述溶液中煮沸3次,待溶液涼后加水定容至1 000mL[6]。

1.3 實驗動物

正常健康大鼠,體重180~220g。雌雄兼有,合格證號 SCXK<津>2011-0002。

2 方法

2.1 FBFL對大鼠腸道蠕動的影響

2.1.1 FBFL對正常大鼠腸道蠕動的影響 取大鼠50只,隨機分為五組。各組大鼠禁食12h給藥:空白對照組,灌胃生理鹽水20mL/kg;陽性對照組,灌胃10%硫酸鎂20mL/kg(2g/kg);FBFL低、中、高劑量組,分別灌胃FBFL 50、100、200mg/kg,容積為20mL/kg。給藥后30min,各組大鼠均灌胃給予墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠),0.4mL/只,30min 后脫頸椎處死大鼠,立即剖腹,分離腸系膜,剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管,置于托盤上,輕輕將小腸拉成直線,測量從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”,再測量從胃幽門到回盲部的距離為小腸總長度,計算墨汁推進率。墨汁推進率(%)=墨汁推進長度(cm)/小腸總長度(cm)×100%。2.1.2 FBFL對阿托品致大鼠腸道蠕動抑制的影響 取大鼠50只,適應飼養1周后,禁食12h,隨機分為:正常對照組,灌胃生理鹽水20mL/kg;阿托品對照組,灌胃0.1%阿托品20mL/kg(20mg/kg),10min后灌胃生理鹽水20mL/kg;FBFL低、中、高劑量組,灌胃0.1%阿托品20mL/kg(20mg/kg),10min分別灌胃FBFL 50、100、200mg/kg,容積為20mL/kg。給FBFL后30min,各組大鼠均灌胃給予墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠),0.4mL/只,30min后脫頸椎處死大鼠,按“2.1.1”項下方法計算墨汁推進率。2.2 統計學方法

3 結果

3.1 FBFL對正常大鼠腸道蠕動的影響

由表1可見,與對照組比較,中、高劑量蕎麥花葉黃酮組均能顯著促進正常大鼠炭末推進率(P<0.01),且對大鼠腸道蠕動的促進作用呈劑量依賴性,但低、中、高劑量組對大鼠腸道蠕動的促進作用均明顯弱于硫酸鎂組(P<0.01)。

表1 FBFL對正常大鼠腸道蠕動的影響

注:與對照組比較,**P<0.01;與硫酸鎂組比較,△△P<0.01。

3.2 FBFL對阿托品抑制大鼠腸道蠕動的影響

由表2可見,阿托品組對碳末推進率明顯低于對照組,并抑制腸蠕動(P<0.01),不同劑量FBFL能拮抗阿托品對腸管蠕動的抑制作用,且呈劑量依賴性,FBFL中、高劑量組作用更明顯(P<0.01)。

表2 FBFL對阿托品抑制大鼠腸道蠕動的影響

注:與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與阿托品組比較,△△P<0.01。

4 討論

蕎麥富含高生物價的蛋白質、維生素、礦物質元素等,最為重要的是含有極為豐富的生物活性成分黃酮類化合物,這是其他谷類糧食所不具有的,是黃酮類化合物的重要膳食來源[7-8]。蕎麥中的黃酮成分,不僅可以作為抗氧化劑和功能性食品的原料,而且具有降低毛細血管脆性、改善微循環的作用,在臨床上可用于糖尿病、高血壓等的輔助治療[9]。作為食品,蕎麥已經占有一席之地,但是作為藥品使用它還沒有引起足夠重視。在臨床應用中,最理想的藥物是高效低毒的藥品,食品作為日常生活中的必需品,較為安全,而具有藥用價值的食品是相對較為安全的藥品,藥物或多或少都具有一定的毒副作用,中藥相對于西藥,毒副作用相對較小。在治療疾病時,選用藥食同源且具有高效低毒作用的植物作為藥品是最佳選擇。蕎麥作為藥食同源的植物,具有低毒作用,但是目前還未實現高效利用,尚需用科學、先進、現代的研究手段來實現。蕎麥種子主要作為糧食應用,而大量的花葉被廢棄。研究發現,蕎麥花葉中含有豐富黃酮類成分,并具有抗氧化、降糖、降脂、免疫調節等作用[10-11],但其對腸道平滑肌活動的影響尚未見報道。本實驗進行了FBFL對腸平滑肌收縮功能的影響研究,結果發現,FBFL的作用是興奮腸管平滑肌,顯示FBFL對大鼠腸道蠕動具有顯著的促進作用(P<0.01),但弱于硫酸鎂(P<0.01); FBFL能拮抗阿托品對大鼠腸管蠕動的抑制作用,并呈劑量依賴性(P<0.01)。

本實驗結果顯示,FBFL能促進正常大鼠炭末推進率,呈劑量依賴性(P<0.01)。但FBFL對正常大鼠腸道蠕動的促進作用明顯弱于硫酸鎂(P<0.01),表明FBFL促進腸蠕動作用較緩和,引起腹瀉的可能性不大;進一步研究顯示,FBFL能拮抗阿托品對腸蠕動的抑制作用,阿托品為M膽堿受體拮抗劑,而FBFL能有效拮抗阿托品對大鼠腸道蠕動的抑制作用,表明FBFL對腸道平滑肌收縮的促進作用與激動M膽堿受體有關。但FBFL的作用機制是否與影響腸平滑肌的其他因素有關,需進一步研究;黃酮類成分很多,具體是哪一成分發揮作用,有待探索。

綜上所述,FBFL對大鼠腸道蠕動有促進作用,其興奮腸管的作用可能與激動M受體有關。

[1] 中國植物志編輯委員會. 中國植物志[M]. 第25卷. 北京: 科學出版社, 1998.

[2] 白靜,姜妍,韓婷,等.蕎麥花葉黃酮對2型糖尿病C57小鼠糖脂代謝及胰島素抵抗的影響[J].廣東醫學,2012,33(13):1876.

[3] 韓淑英,王志路,儲金秀,等.蕎麥花葉黃酮對2型糖尿病大鼠胰島素抵抗及肝組織PTP1B的影響[J].中國中藥雜志,2009,34(23):3114.

[4] LI-SHA ZHU, XIN-CHAO MA, SHU-YING HAN, et al. Effect of total flavones of buckwheat leaf on blood lipid and lipid peroxides[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2004,8(25):5178.

[5] 韓淑英,張博男,張靜怡,等.蕎麥花葉黃酮對2 型糖尿病大鼠血糖穩態的影響[J].第三軍醫大學學報,2013,35(23):2597-2599.

[6] 陳奇.中藥藥理研究方法[M].北京:人民衛生出版社,1993,333-334.

[7] 王紅育, 李穎. 蕎麥的研究現狀及應用前景[J]. 食品科學,2004,25(10):388-391.

[8] 王安虎, 熊梅, 耿選珍,等. 中國蕎麥的開發利用現狀與展望[J]. 作物雜志,2003(3):7-8.

[9] 文平, 陳進. 紅蕎麥蘆丁的研究進展[J]. 中國糧油學報,2006,21(3):108-111.

[10] 王樹華,韓淑英,耿菲, 等.正交試驗法優選甜蕎麥花葉中蘆丁的提取工藝[J].遼寧中醫雜志,2011,38(6):1178-1179.

[11] 馬俊利,李春鋼,張博男,等.甜蕎麥花葉化學成分研究[J].中國實驗方劑學雜志,2010,16(13):94-96.

(責任編輯:宋勇剛)

Effects of Total Flavones of Buckwheat Flower and Leaf on Intestinal Smooth Muscle Activities

Wu LiGuo1,Han ShuYing2*,Shi Xuejing2,Zhang Ying2,Shi YaJing2,Qian Zhuang2
(1.Qianjiaying Hospital of Kailuan Hospital Group, Hebei 063301,China;2.College Student of Hebei United University,Hebei 063000,China)

Objective:To study the effects of total flavones of buckwheat flower and leaf on intestinal smooth muscle activities and its menchanism.Methods:Effects of different doses of FBFL on normal intestinal in mouse were detected by Propulsive method.Different concentrations.Results:FBFL could promote propulsive rate of the normal mice. But the effect of TFBFL was weaker than Magnesium sulfate(P<0.01). Antagonism of TFBFL show dose dependently on atropine inhibition in intestinal peristalsis. (P<0.01), showed dose dependent (P<0.01).Conclusion:FBFL has excitatory effects on the intestinal smooth muscle. The mechanism may be related with the activation of the M receptor.

Total Flavones of Buckwheat Flower and Leaf(TFBFL);Intestinal Smooth Muscle; Shrinkage;Atropine

2015-01-08

河北省唐山市“十二五”重點科技支撐項目(10130203-3)

吳立國(1981-),河北省開灤醫療集團錢家營醫院主治醫師,研究方向為心腦血管疾病。

韓淑英(1959-),女,河北聯合大學教授,碩士生導師,研究方向為中藥藥理學。E-mail:shuyinghan59@126.com

R285.5

A

1673-2197(2015)11-0014-02

10.11954/ytctyy.201511005

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