四季感冒片中甘草薄層鑒別方法研究

李 敏

(遼寧興海制藥有限公司，遼寧 盤(pán)錦 124013)

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四季感冒片中甘草薄層鑒別方法研究

李 敏

(遼寧興海制藥有限公司，遼寧 盤(pán)錦 124013)

目的：通過(guò)對(duì)供試品溶液的制備處理及展開(kāi)劑和點(diǎn)樣量的篩選研究，確定四季感冒片中甘草薄層鑒別方法。方法：以甘草對(duì)照藥材為對(duì)照，甘草陰性對(duì)照，采用薄層色譜法進(jìn)行鑒別研究。結(jié)果：供試品色譜中，相同位置檢查出與甘草對(duì)照藥材相同顏色的斑點(diǎn)；甘草陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)論：采用薄層色譜方法斑點(diǎn)清晰，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，可作為該制劑的甘草質(zhì)量控制方法。

四季感冒片；甘草；薄層

四季感冒片執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為YBZ17702006，無(wú)甘草鑒別項(xiàng)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)擬在標(biāo)準(zhǔn)中增加甘草鑒別，達(dá)到更嚴(yán)格的質(zhì)量控制。四季感冒片，由桔梗、連翹、甘草等藥味組成，具有清熱解表的作用，用于治療四季風(fēng)寒感冒引起的發(fā)熱頭痛、鼻流清涕、咳嗽口干、咽喉疼痛、惡心厭食等疾病。為提高藥品的質(zhì)量控制要求，擬采用薄層色譜法對(duì)處方中甘草進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

電熱恒溫干燥箱、層析缸、水浴鍋、蒸發(fā)皿、冷凝管、超聲波清洗器。

1.2 試劑

甲醇、乙酸乙酯、乙醚、冰醋酸、碳酸鈉、硫酸、乙醇、正己烷、正丁醇、鹽酸、試劑均為分析純；硅膠G薄層板(青島海洋化工有限公司生產(chǎn))。甘草對(duì)照藥材，批號(hào)：120904-201318，中國(guó)食品藥品檢定研究院提供。四季感冒片，批號(hào)：20140801、20140802、20140803，遼寧興海制藥有限公司提供。

2 方法

2.1 供試品溶液制備方法篩選

第一法：取本品5片，除去薄膜衣，研細(xì)，加甲醇30mL，加熱回流30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL溶解，采用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液；采用2%碳酸鈉試液振搖提取3次，每次25mL，合并堿液；加HCl調(diào)pH至1～2，采用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL溶解，作為供試品溶液。

第二法：取本品5片，除去薄膜衣，研細(xì)，加水飽和正丁醇30mL，超聲處理(功率160W，頻率50Hz)20min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5mL，作為供試品溶液[1]。

2.2 對(duì)照藥材溶液制備

取甘草對(duì)照藥材1.5g，加乙醚50mL，加熱回流30min，乙醚液棄去，藥渣揮干，加甲醇2mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。

2.3 甘草陰性對(duì)照溶液制備

四季感冒片按處方中除去甘草，根據(jù)處方工藝比例制成甘草陰性對(duì)照樣品。按供試品制備處理第一法制成陰性對(duì)照溶液。

2.4 點(diǎn)樣量篩選

供試品溶液點(diǎn)樣量分別選用5μL、8μL、10μL點(diǎn)樣；對(duì)照藥材溶液分別選用1μL、2μL、5μL點(diǎn)樣。

2.5 展開(kāi)劑配制方法篩選

第一種展開(kāi)系統(tǒng)：乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)。

第二種展開(kāi)系統(tǒng)：正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶2∶0.4)[2]。

2.6 顯色劑

顯色劑為10%硫酸乙醇溶液，顯色條件為加熱105℃至斑點(diǎn)顯色清晰。

3 結(jié)果

3.1 薄層色譜結(jié)果

用乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)展開(kāi)，選用供試品制備方法第一法，供試品、陰性對(duì)照、對(duì)照藥材點(diǎn)樣量篩選結(jié)果見(jiàn)圖1。

供試品溶液制備采用第一種及第二種制備方法，展開(kāi)劑選用正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶2∶0.4)，結(jié)果見(jiàn)圖2。

3.2 供試品制備方法篩選

展開(kāi)劑用乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)，供試品制備方法為第一法和第二法，對(duì)照藥材點(diǎn)樣量篩選為10μL、15μL，結(jié)果見(jiàn)圖3、圖4。

圖1 第一種展開(kāi)系統(tǒng)薄層色譜

圖2 第二種展開(kāi)系統(tǒng)薄層色譜

圖3 供試品制備方法篩選(一)

圖4 供試品制備方法篩選(二)

3.3 三批供試品薄層圖譜

供試品制備采用第一法，供試品及陰性點(diǎn)樣量為8μL，對(duì)照藥材為2μL，展開(kāi)劑為乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)，三批供試品的薄層圖譜見(jiàn)圖5。

圖5 三批供試品薄層圖譜

4 討論

由圖1可見(jiàn)，采用第一種展開(kāi)系統(tǒng)薄層色譜斑點(diǎn)清晰，采用第二種展開(kāi)系統(tǒng)薄層色譜斑點(diǎn)幾乎未顯現(xiàn)，因此選擇第一種展開(kāi)系統(tǒng)鑒別四季感冒片中甘草薄層；圖1、圖2同時(shí)分別對(duì)點(diǎn)樣量進(jìn)行篩選，供試品點(diǎn)樣量篩選為5～10μL。由圖1可見(jiàn)，8uL點(diǎn)樣量斑點(diǎn)清晰可見(jiàn)，因此供試品點(diǎn)樣量暫定為8μL，陰性對(duì)照定為10μL，繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

圖3、圖4為供試品制備方法篩選，供試品采用第一種制備方法斑點(diǎn)更為清晰，因此供試品制備方法采用第一法；圖3、圖4供試品點(diǎn)樣量為8μL，斑點(diǎn)清晰，重現(xiàn)性好、陰性對(duì)照為10μL，陰性無(wú)干擾，對(duì)照藥材為8μL斑點(diǎn)清晰可見(jiàn)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)方便及節(jié)省資源原則將對(duì)照藥材點(diǎn)樣量定為2μL。四季感冒片供試品制備方法定為第一法，供試品點(diǎn)樣量定為8μL，對(duì)照藥材點(diǎn)樣量定為2μL，陰性對(duì)照點(diǎn)樣量定為10μL，展開(kāi)劑定為第一系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5，可見(jiàn)三批供試品斑點(diǎn)清晰、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好。因此，四季感冒片中甘草薄層鑒別方法定為取本品5片，除去薄膜衣，研細(xì)，加甲醇30mL，加熱回流30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，采用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液；采用2%碳酸鈉試液振搖提取3次，每次25mL，合并堿液；加HCL調(diào)pH至1～2，采用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL溶解，作為供試品溶液。

同時(shí)，取甘草對(duì)照藥材1.5g,加乙醚50mL，加熱回流30min，乙醚液棄去，藥渣揮干，加甲醇2mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。按薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液8μL，對(duì)照藥材溶液2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板，以乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱105℃至斑點(diǎn)顯色清晰。與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，供試品色譜中顯示相同顏色的斑點(diǎn)。

[1] 石克,冉海琳.桑菊感冒沖劑中連翹、甘草的薄層色譜鑒別[J].海峽藥學(xué)，2009,21(9):43-44.

[2] 劉敬,趙斌,王瓊.克咳膠囊中甘草薄層鑒別方法的改進(jìn)[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥,2012(8):39-40.

[3] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[M].一部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

(責(zé)任編輯：李嵐春)

2014-12-18

李敏(1978-)，女，遼寧興海制藥有限公司工程師，研究方向?yàn)樾滤幾?cè)與研發(fā)。

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1673-2197(2015)08-0026-02

10.11954/ytctyy.201508013