甜地丁藥理作用研究

崔春婷

(鄭州市第一人民醫院，河南 鄭州 450004)

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甜地丁藥理作用研究

崔春婷

(鄭州市第一人民醫院，河南 鄭州 450004)

目的：研究甜地丁的藥理作用。方法：將40只昆明種小鼠分為甜地丁高、中、低濃度組和空白對照組各10例，考察甜地丁對小鼠溶血素抗體生成、耳廓腫脹度、醋酸致扭體反應的影響。結果：甜地丁高、中、低濃度組小鼠OD值均顯著高于空白對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；高、中、低濃度甜地丁水煎液組、乙酸乙酯萃取物組小鼠15s內扭體次數、耳廓腫脹度均顯著低于空白對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；高、中濃度水煎液組小鼠扭體次數、耳廓腫脹度顯著低于低濃度組，差異具有統計學意義(P<0.05)；水煎液組小鼠扭體次數、耳廓腫脹度顯著低于乙酸乙酯萃取物組，差異具有統計學意義(P<0.05)。結論：甜地丁水煎液和乙酸乙酯萃取物均具有良好的免疫活性、抗炎活性、鎮痛作用，且乙酸乙酯萃取物活性強于水煎液。

甜地丁；免疫活性；抗菌作用；抗炎活性

甜地丁是豆科植物米口袋Gueldenstaedtiaverna(Georgi) A. Bor.的干燥全草。近年來，關于甜地丁的藥效學研究報道越來越多，但對其清熱解毒的藥理作用研究則相對較少[1]。為此，本研究對甜地丁的免疫、抗炎、鎮痛活性進行研究，明確其消腫涼血、清熱解毒的物質基礎，現報道如下。

1 材料與儀器

1.1 實驗動物

昆明種小鼠，雌雄各半，體重20～24g，均由山東中醫藥大學實驗動物中心提供。

1.2 試劑

雞紅細胞懸液(5%)、氯化鈉注射液、1%剛果紅、二甲苯、乙酸乙醇、乙醇、伊文思藍、醋酸均為分析純；阿司匹林片、羧甲基纖維素鈉、甜地丁藥材粗粉等。

1.3 儀器

電子天平、灌胃器、1mL注射器、吸量移液管、試管(10mL、5mL)、分光光度計、低速離心機、玻璃鉛筆、鑷子、血球吸管、旋轉蒸發器、恒溫真空干燥箱等。

2 方法

2.1 甜地丁免疫活性研究

2.1.1 藥液制備 根據《藥典》規定的甜地丁人正常用量(9～15g)，計算出小鼠的等效劑量，高劑量為等效劑量的8倍。將甜地丁藥材粗粉放入10倍量清水中浸泡30min，然后進行煎煮，持續煮沸30min，過濾，在濾渣中加入8倍量清水繼續煎煮30min，濾出藥液，合并兩次所得藥液，水浴濃縮，分別制成高、中、低三種濃度的甜地丁水煎液(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)備用。

2.1.2 實驗方法 將40只雄性小鼠隨機分為4組，分別采用高、中、低濃度甜地丁水煎液及生理鹽水灌胃，劑量均為0.02mL/g，每日1次，持續灌胃1周。于灌胃前1天腹腔注射雞紅細胞0.2mL，進行刺激免疫。灌胃結束后第1天，取小鼠眼球血，離心后取上層血清，加入NS稀釋。取1mL稀釋血清，加入0.5mL雞紅細胞、0.5mL補體(10%)，混合均勻后恒溫水浴(30℃)，在冰水中終止反應。然后離心，取上層清液，使用分光光度計進行比色，檢測OD值，以OD值評價血清溶血素水平。

2.2 甜地丁鎮痛作用研究

2.2.1 藥液制備 取甜地丁藥材粗粉適量，放入10倍量清水中浸泡30min，煮沸后煎煮30min，濾出藥液，在濾渣中加入8倍量水繼續煎煮30min，合并兩次濾液，濃縮、蒸干，以CMC-Na溶液(0.5%)溶解，制成高、中、低三種濃度(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)藥液。

取甜地丁藥材粗粉適量，放入10倍量乙醇(70%)提取3次，合并濾液，濃縮蒸干，以水分溶解浸膏，再以石油醚、乙酸乙酯萃取，濃縮蒸干，在所得干膏中加入CMC-Na溶液(0.5%)溶解，制成高、中、低三種濃度(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)藥液。

2.2.2 實驗方法 將80只雄性小鼠分為8組，分別采用高、中、低濃度甜地丁水煎液、乙酸乙酯萃取液、生理鹽水、阿司匹林灌胃，劑量均為2mL/g，每日1次，持續灌胃5天。末次給藥0.5h后，腹腔注射醋酸(0.5ml/L)，劑量為0.01mL/g。記錄各組小鼠注射后20min內的扭體次數。

2.3 甜地丁抗炎活性實驗研究

藥液制備方法、動物分組及灌胃方法均同鎮痛作用實驗研究，連續灌胃7天，末次給藥1h后，于小鼠右耳兩面涂抹二甲苯致炎，2h后處死。使用打孔器(8mm)在小鼠兩耳相同部位打孔，取耳片，計算耳片腫脹度(右耳片質量與左耳片質量的差值)。

2.4 統計學方法

3 結果

3.1 免疫活性實驗結果

高、中、低濃度甜地丁水煎液組小鼠OD值均顯著高于空白對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；高、中、低濃度甜地丁水煎液三組小鼠OD值比較差異無統計學意義(P>0.05)。 4組小鼠OD值比較見表1。

表1 4組小鼠OD值比較

注：表示與空白對照組比較，*P<0.05。下表同。

3.2 鎮痛作用實驗結果

高、中、低濃度甜地丁水煎液組、乙酸乙酯萃取物組小鼠15秒內扭體次數均顯著低于空白對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；高、中、低濃度乙酸乙酯萃取物組小鼠扭體次數比較差異無統計意義(P>0.05)；高、中濃度甜地丁水煎液組小鼠扭體次數顯著低于低濃度組，差異具有統計學意義(P<0.05)；水煎液組小鼠扭體次數顯著低于乙酸乙酯萃取物組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 各組小鼠扭體次數比較

3.3 抗炎活性實驗結果

甜地丁水煎液各組、乙酸乙酯萃取物各組、阿司匹林組小鼠耳腫脹度均顯著低于空白對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；乙酸乙酯萃取物各組小鼠耳腫脹度比較差異無統計學意義(P>0.05)；甜地丁水煎液中、高濃度組小鼠耳腫脹度顯著低于低濃度組，差異具有統計學意義(P<0.05)；甜地丁水煎液各組小鼠耳腫脹度均顯著低于乙酸乙酯萃取物各組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表3。

4 討論

甜地丁為米口袋屬豆科植物，其化學成分以黃酮、揮發油、有機酸類、甾醇、萜為主[2]。現代藥理學研究顯示[3]，米口袋屬植物具有抗炎、抗菌、抗氧化等作用，主要用于治療腹瀉、腸炎、化膿性炎癥、闌尾炎、痢疾等，其不僅是民間常用藥，更是多種中成藥的重要原料。

表3 各組小鼠的耳腫脹度比較

甜地丁含有皂苷、多糖、氨基酸、黃酮等活性物質，具有補益功效[4]。一般來說，中藥的治療效果是整體有效成分群共同作用的結果，甜地丁多以水煎液形式入藥，故在免疫活性實驗研究中選用了水煎劑。血清溶血素水平是反映機體非特異性免疫功能的重要指標，通過測定溶血值，可了解B細胞增殖分化情況以及體液在補體結合后的溶血素分泌能力，監測給藥與未給藥小鼠的溶血素值，可反映甜地丁對機體免疫功能的影響[5]。研究結果顯示，高、中、低濃度甜地丁水煎劑組小鼠OD值均顯著高于空白對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)，但組間比較無統計學差異(P>0.05)。提示甜地丁水煎液能有效刺激B細胞分化增殖，使之轉變為漿細胞，從而增強機體免疫功能。

甜地丁具有消癰散癤、清熱解毒的功效，是治療癰疽疔疫、丹毒、黃疸、目赤腫痛等證的常用藥[6]。小鼠醋酸致扭體實驗結果顯示，不同濃度甜地丁水煎劑、乙酸乙酯提取物均能有效減少扭體次數，對化學致痛具有良好的止痛效果，且以甜地丁水煎劑的鎮痛效果更優。

甜地丁作為民間常用中草藥，被廣泛用于腹瀉、闌尾炎、腸炎、痢疾等多種炎癥的臨床治療，其抗炎作用廣泛。炎癥是機體的一種防御性反應，在人類疾病中十分常見，組織增生、血管反應、局部組織損傷等均屬于炎癥范疇。小鼠耳廓腫脹實驗結果顯示，甜地丁乙酸乙酯提取物、水煎液均能有效抑制小鼠耳廓腫脹，表明甜地丁可有效抑制局部組織損傷引起的炎癥反應，具有良好的抗炎活性。

綜上所述，甜地丁水煎液和乙酸乙酯萃取物均具有良好的免疫活性、抗炎活性、鎮痛作用，且乙酸乙酯萃取物活性強于水煎液。

[1] 劉英姿,安娜,周鐵忠,等.中藥主要免疫活性成分的藥理學研究進展[J].中國畜牧獸醫,2009,36(12):128-132.

[2] 劉永琦,吳曉晶,范萍,等.中藥特征與神經免疫效應的關系分析及其Logistic回歸模型[J].時珍國醫國藥,2010,21(6):1508-1510.

[3] 劉紅燕,張永清.甜地丁脂溶性成分的GC-MS分析[J].中國實驗方劑學雜志,2012,18(2):121-123.

[4] 李佳,劉紅燕,劉謙,等.甜地丁總黃酮提取工藝及體外抗氧化活性研究[J].山東科學,2013,26(6):24-27.

[5] 汪倪萍,魏偉.中藥活性成分的抗炎免疫和鎮痛作用[J].中國藥理學通報,2003,19(4):366-370.

[6] 王愛萍,徐今寧.中藥免疫調節作用研究進展[J].中國藥業,2011,20(3):75-77.

(責任編輯：尹晨茹)

2014-12-21

崔春婷(1986-)，河南省鄭州市第一人民醫院中藥師，研究方向為天然藥物化學。

R285

A

1673-2197(2015)08-0014-02

10.11954/ytctyy.201508007