HPLC法測定柴黃利膽和胃糖漿中黃芩苷含量

王繼磊，陳云飛

(蒙城縣中醫院，安徽 蒙城 233500)

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HPLC法測定柴黃利膽和胃糖漿中黃芩苷含量

王繼磊，陳云飛*

(蒙城縣中醫院，安徽 蒙城 233500)

目的：建立柴黃利膽和胃糖漿中黃芩苷的含量測定方法。方法：采用HPLC法，色譜柱為依利特Hypersil ODS2柱(4.6mm×250mm，5μm)，流動相為甲醇-水-磷酸(49∶51∶0.2)，檢測波長為276nm，柱溫為30℃，流速為1.0mL/min。結果：黃芩苷在0.302～2.42μg范圍內與峰面積積分呈良好的線性關系，平均回收率為97.48%，RSD=1.55%(n=6)。結論：該方法準確可靠，可用于柴黃利膽和胃糖漿中黃芩苷的含量測定。

柴黃利膽和胃糖漿；黃芩苷；HPLC

柴黃利膽和胃糖漿是蒙城縣中醫院傳統制劑，由柴胡、法半夏、麩炒枳殼、陳皮、茯苓等十六味中藥組成，具有利膽和胃的功效，主要用于膽胃不和引起的口苦咽干、噯氣納呆、胃肋脹痛、頭暈等疾病的治療。為了更好地控制該制劑的質量，選擇處方中君藥黃芩的有效成分黃芩苷作為檢測指標，采用高效液相色譜法測定其含量，現報道如下。

1 儀器與試藥

島津高效液相色譜儀(島津SPD-10A紫外檢測器、島津LC-10A泵)；JK-2200DB型數控超聲波清洗儀；黃芩苷對照品(中國食品藥品檢定研究院)；樣品自制(批號20140301，20140320，20140408)；甲醇為色譜純，水為重蒸水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 溶液制備

2.1.1 對照品溶液制備 取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成15.1μg/mL的黃芩苷溶液。

2.1.2 供試品溶液制備 精密量取供試品溶液10mL，置于100mL圓底燒瓶中，加入70%乙醇50mL，加熱回流3h，放冷，濾過，濾液置于蒸發皿中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液濾入同一蒸發皿中，蒸干。殘渣加50%甲醇溶解，置于50mL容量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.1.3 陰性對照溶液制備 取按處方比例及生產工藝制備的不含黃芩原藥材的柴黃利膽和胃糖漿，按照供試品溶液制備方法同法操作即得。

2.2 色譜條件

色譜柱：依利特Hypersil ODS2柱(4.6mm×250mm,5μm)，流動相為甲醇-水-磷酸(49∶51∶0.2)，檢測波長為276nm，柱溫為30℃ ，進樣量為20μL，流速為1.0mL/min。

2.3 系統適用性實驗

在“2.2”項下色譜條件下，分別精密量取黃芩苷對照品溶液、樣品溶液以及陰性樣品溶液各20μL進樣測定。結果表明，在與對照品色譜對應的位置上未出現色譜峰，陰性樣品溶液無干擾。見圖1。

圖1 柴黃利膽和胃糖漿HPLC色譜

2.4 線性關系考察

精密稱取黃芩苷對照品7.55mg，置于50mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。精密吸取黃芩苷對照品儲備液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL至5mL容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻。按照“2.2”項下色譜條件進行測定，以黃芩苷進樣量為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程y=0.970 3x+11.183，r=0.999 4。結果表明，黃芩苷在0.302～2.42μg范圍內與峰面積積分呈良好的線性關系。

2.5 精密度試驗

精密吸取黃芩苷對照品溶液適量，按照“2.2”項下色譜條件進樣測定，連續測定6次，記錄峰面積積分值，RSD=1.43%，表明儀器精密度良好。

2.6 穩定性試驗

精密吸取同一樣品溶液，分別于放置0、2、4、6、8、10、12h進樣測定，記錄峰面積積分值，結果表明被測樣品峰面積積分值RSD=0.85%，樣品溶液在12h內性質穩定。

2.7 重復性試驗

取同一批樣品，按照“2.1.2“項下方法制備6份供試品溶液，按照“2.2”項下色譜條件進樣測定，求得峰面積積分值 RSD=0.86%，表明該方法重復性良好。

2.8 加樣回收率試驗

取已知黃芩苷含量(0.165mg/mL)的樣品6份，精密量取5mL，每份精密加入黃芩苷對照品溶液(濃度185μg/mL)5mL，按照“2.1.2“項下方法制備供試品溶液，按照“2.2”項下色譜條件進樣測定。結果表明平均回收率為97.48%，RSD=1.55%，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

2.9 樣品測定

取3批樣品，按照“2.1.2“項下方法制備供試品溶液，按照“2.2”項下色譜條件進樣測定，代入線性方程計算黃芩苷含量。結果表明，3批樣品黃芩苷含量分別為0.161mg/mL(批號20140301)、0.159mg/mL(批號20140320)、0.165mg/mL(批號20140408)。

3 討論

中華人民共和國藥典[1]規定，酒黃芩藥材中黃芩苷含量不得少于8.0%，制成制劑后每毫升黃芩苷含量不得少于0.2mg，考慮到藥材來源及工業化大生產的特點，柴黃利膽和胃糖漿中黃芩苷含量不得少于0.12mg/mL。結果表明，本實驗考察的所有醫院制劑均符合要求。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:化學工業出版社,2010:283.

(責任編輯：尹晨茹)

Content Determination of Baicalin in Chaihuanglidanhewei Syrup by HPLC

Wang Jilei,Chen Yunfei*

(TCM Hospital of Mengcheng,Mengcheng 233500,China)

Objective:To establish the method for determination of Baicalin in chaihuanglidanhewei syrup.Methods:The HPLC method was used with Hypersil ODS2 column(4.6mm×250mm,5μm), The mixture of methanol water phosphoric(49∶51∶0.2) was the mobile phase, the flow rate was 1.0ml/min and the detection wavelength was at 276nm ,The column temperature was at 30℃.Results:The linear range of Baicalin was 0.302～2.42μg and the average recovery was 97.48% with RSD of 1.55%(n=6).Conclusion:Conclusion:This method is simple,accurate and can be used to determine the contents of Baicalin in chaihuanglidanhewei syrup.

Chaihuanglidanhewei syrup;Baicalin;HPLC

2015-06-16

王繼磊(1976-)，男，安徽省蒙城縣中醫院主管中藥師，研究方向為中藥制劑。

陳云飛(1984-)，男，安徽省蒙城縣中醫院初級中藥師，研究方向為中藥制劑。

R284.2

A

1673-2197(2015)22-0028-02

10.11954/ytctyy.201522011