乳腺浸潤性導(dǎo)管癌超聲特征與分子生物學表達的相關(guān)性研究*

郭冀魯 李遠 牛俊波 陳偉娟 賈守艇 劉學智 馮勇 張秀江李建國

浸潤性導(dǎo)管癌是最常見的乳腺癌類型，本病發(fā)病率高，年輕化趨勢明顯。隨著分子生物學的發(fā)展，對該病的研究不斷深入，規(guī)范診治的要求也越來越高。本研究旨在通過分析107例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者術(shù)前超聲影像資料與術(shù)后病理及分子生物學指標之間的關(guān)系，為臨床診治及評估預(yù)后提供一定的依據(jù)，現(xiàn)具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集本院2012年1月-2014年6月收治的107例女性乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的臨床資料，均包含完整超聲及分子病理學資料，所選患者均為單側(cè)發(fā)病，左右側(cè)比為47∶60，年齡29~79歲，中位年齡為45.7歲。所有患者均接受彩超檢查及手術(shù)治療，其中單側(cè)乳腺癌改良根治術(shù)105例，姑息性乳腺象限切除（局部擴大切除）1例，腫塊切除活檢后要求外院治療1例。檢查前及術(shù)前均未接受放化療，術(shù)后均行常規(guī)病理學及相關(guān)免疫組化指標檢測，所有患者均證實為浸潤性導(dǎo)管癌，其中Ⅰ級21例，Ⅱ級47例，Ⅲ級39例。

1.2 方法

1.2.1 超聲檢查方法 采用飛利浦G4 iU-22高清晰度彩色多普勒超聲診斷儀行乳腺彩超檢查，高頻線陣寬頻探頭頻率為7~12 MHz，在乳房表面做放射狀掃查，各象限區(qū)域依次進行連續(xù)性對比，先行二維超聲檢查，觀測病灶部位、大小、形態(tài)、邊緣特征、內(nèi)部回聲、微小鈣化點、有無側(cè)方聲影及后方衰減、有無腋窩可疑淋巴結(jié)等指標，再行CDFI檢查觀測病灶周邊及內(nèi)部血流情況。檢查結(jié)果由2位超聲科乳腺相關(guān)專業(yè)醫(yī)師出具報告。

1.2.2 病理及分子生物學檢查方法 常規(guī)行HE染色及SP法免疫組化檢查。抗體試劑盒購自北京中杉金橋生物公司。ER、PR、C-erbB-2及Ki-67判定標準：細胞內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒即為陽性細胞，ER、PR、Ki-67陽性表達于癌細胞核，100個高倍鏡視野著色細胞<10%為陰性（-），≥10%為陽性（+）；C-erbB-2以細胞膜呈清晰棕色為陽性，<10%為陰性（-），≥10%為陽性（+）。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

腫塊直徑<2 cm和≥2 cm患者的各指標比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；有毛刺征患者的ER、PR陽性表達率均高于無毛刺征患者，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；有、無惡性聲暈征患者的各指標比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；有微鈣化征患者的ER、C-erbB-2及Ki-67的陽性表達率均高于無微鈣化患者，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；有可疑淋巴結(jié)患者的C-erbB-2陽性表達率高于無可疑淋巴結(jié)患者，比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；血流信號豐富組患者的C-erbB-2陽性表達率明顯高于血流信號不豐富患者，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見圖1及表1。

圖1 乳腺癌腫塊超聲及免疫組化染色圖像注：右乳浸潤性導(dǎo)管癌超聲毛刺征（圖1a）及ER陽性表達（圖1b，×400）；左乳浸潤性導(dǎo)管癌惡性聲暈征（圖1c）及C-erbB-2陽性表達（圖1d，×400）；右乳浸潤性導(dǎo)管癌微鈣化征（圖1e）及ER陽性表達（圖1f，×400）；右乳浸潤性導(dǎo)管癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（圖1g）及手術(shù)病理HE染色（圖1h，×400）；右乳浸潤性導(dǎo)管癌血流豐富（圖1i）及Ki-67陽性表達（圖1j，×400）

3 討論

超聲檢查是臨床常用的乳腺疾病篩查手段，可以作為早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌的檢查方法[1]。隨著彩色多普勒高頻探頭、血流顯像、彈性成像、超聲造影等技術(shù)的普及，超聲診斷乳腺良惡性病變的準確率不斷提高[2-3]。典型乳腺癌聲像圖表現(xiàn)包括：邊緣毛刺征，形態(tài)不規(guī)則，無包膜，腫塊縱橫比>1，內(nèi)部回聲不均勻，后方回聲衰減，內(nèi)部細小簇狀鈣化灶等[4]。乳腺癌超聲影像學表現(xiàn)與其組織病理學特征密切相關(guān)，而分子生物學行為是其決定性因素。腫瘤細胞受多種癌基因及細胞因子的調(diào)控，其分化程度不同，癌組織及其間質(zhì)與周圍正常組織之間必然出現(xiàn)差異，導(dǎo)致影像學表現(xiàn)復(fù)雜多樣。乳腺是性激素依賴器官，大量關(guān)于ER、PR的研究證實，其陽性表達者腫瘤分化程度相對較高，對內(nèi)分泌治療效果確切，預(yù)后較好。C-erbB-2及Ki-67是近年來乳腺癌研究中指導(dǎo)臨床和評估預(yù)后的常用指標。C-erbB-2，也稱HER2，目前已被公認為是與乳腺癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的原癌基因[5]。大量研究顯示C-erbB-2及其受體與乳腺癌關(guān)系密切，C-erbB-2高表達提示細胞增殖旺盛，侵襲力強，與瘤組織分級高、分期晚呈正相關(guān)，且表達越高，預(yù)后越差，甚至對部分化療方案明顯耐藥[6]。Ki-67抗原于1983年由Gerdes等[7]發(fā)現(xiàn)，在多種實體惡性腫瘤中高表達，并與惡性腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。有研究表明，乳腺癌組織的Ki-67陽性表達高達78%[8]。

本研究將乳腺浸潤性導(dǎo)管癌超聲影像學特征與上述分子生物學指標相結(jié)合，分析認為二者之間存在一定的關(guān)系。（l）腫塊大小：乳腺癌組織浸潤生長，多形成不規(guī)則腫塊。關(guān)于乳腺浸潤性導(dǎo)管癌癌腫大小與ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的關(guān)系，國內(nèi)外研究多數(shù)認為兩者間無顯著相關(guān)性，本研究得出相同結(jié)果，提示腫瘤的惡性程度并不隨腫瘤體積的增大而增加。臨床實踐中，某些乳癌患者雖然瘤體很小，甚至造成術(shù)中活檢困難，但病理已為較高的組織學分級，而有些直徑大于5 cm的癌組織仍可停留在導(dǎo)管內(nèi)原位癌狀態(tài)。（2）腫塊邊緣：毛刺征的病理基礎(chǔ)是癌細胞沿結(jié)締組織間隙蔓延、向周圍組織浸潤并引起周邊結(jié)締組織增生所致，癌腫周邊惡性聲暈的出現(xiàn)與毛刺征的發(fā)生機制相似，只是程度有所不同，因此，在許多浸潤性導(dǎo)管癌的超聲中可以同時觀察到兩種征象的存在。本研究結(jié)果顯示，有毛刺征患者ER、PR的陽性表達率明顯高于無毛刺征患者（P<0.05），但惡性聲暈特征中各指標陽性率比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），提示浸潤組織周邊纖維增生及淋巴細胞反應(yīng)可能是機體抵抗腫瘤的一種早期自身保護性防御行為，這與吳俊等[9]報道一致。（3）微鈣化：典型鈣化征屬營養(yǎng)不良性鈣化，是癌組織旺盛生長情況下發(fā)生血供不足時腫瘤細胞變性壞死和鈣鹽沉積所致[10]。在低回聲背景下，高頻探頭可清晰觀察到腫塊內(nèi)部多呈散沙狀或簇狀分布的強回聲鈣化灶，是浸潤性導(dǎo)管癌的重要特征[11]。本組微鈣化陽性率為38.32%，ER、C-erbB-2及Ki-67陽性率均明顯高于無微鈣化患者，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），結(jié)果與多數(shù)研究結(jié)論相符[12]。C-erbB-2及Ki-67過度表達提示腫瘤組織學分級較高，早期常發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，因此微鈣化的出現(xiàn)多預(yù)示腫瘤惡性程度較高，預(yù)后差。（4）可疑淋巴結(jié)：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳腺癌最常見轉(zhuǎn)移途徑，其影像學表現(xiàn)為淋巴結(jié)體積增大，長徑多大于15 mm，形態(tài)失常，淋巴結(jié)皮質(zhì)增厚、皮髓質(zhì)結(jié)構(gòu)改變直至“門”結(jié)構(gòu)消失或發(fā)生實變[13-14]。C-erbB-2的過度表達導(dǎo)致腫瘤細胞有絲分裂增強，從而增加了腫瘤轉(zhuǎn)移的可能性[15]。本組結(jié)果進一步印證了C-erbB-2的陽性表達與癌細胞轉(zhuǎn)移之間呈正相關(guān)。Ki-67陽性與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性存在爭議[16]。本研究亦未得出確切結(jié)果，可能與樣本量較少及超聲醫(yī)師對轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的診斷經(jīng)驗不足等因素有關(guān)。（5）血流信號：血管生成是細胞增殖的基礎(chǔ)，惡性腫瘤可以通過釋放血管生成因子刺激血管生長，這些新生的血管數(shù)目多、管壁薄、肌層缺乏、走形迂曲、排列紊亂，因此，血供異常豐富是惡性腫瘤的重要影像學特征[17]。錢超文等[18]報道彩超CDFI血流分級Ⅱ~Ⅲ級的乳腺癌患者其C-erbB-2的陽性率均較低血流分級者明顯偏高，提示C-erbB-2的高表達與乳癌腫瘤惡性較高相符合，本組資料得出相同結(jié)果。

表1 超聲圖像特征與分子生物學指標表達情況比較

總之，乳腺浸潤性導(dǎo)管癌超聲表現(xiàn)與分子生物學指標之間存在一定的相關(guān)性，分析分子生物學指標的變化能夠幫助醫(yī)生更好地認識和區(qū)分乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的影像學征象，通過影像學檢查可以無創(chuàng)性的大致推測此類乳癌細胞ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的表達情況，為臨床評估生物學行為和預(yù)后、選擇內(nèi)分泌治療和化療提供更有價值的信息。

[1]成楠.48例乳腺癌超聲表現(xiàn)與病理分型相關(guān)性探討[J].中外醫(yī)學研究，2015，13（14）：60-61.

[2]支鵬飛.超聲彈性成像在乳腺微小結(jié)節(jié)鑒別診斷中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2014，11（3）：45-47.

[3]林秋蘭.彩色多普勒超聲在乳腺腫瘤診斷中的應(yīng)用價值探討[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2012，9（34）：92-93.

[4]張建興.乳腺超聲診斷學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：137.

[5]王陽，王曉.乳腺癌鉬靶X線特征與分子生物學指標的相關(guān)性研究進展[J].中國普通外科雜志，2011，20（11）：1235-1239.

[6] Androutsopoulos G，Adonakis G，Gkermpesi M，et al.Expression of the epidermal growth factor system in endometrial cancer after adjuvant tamoxifen treatment for breast cancer[J].Eur J Gynaecol Oncol，2006，27（5）：490.

[7] Gerdes J，Lemke H，Baisch H，et al.Cell cycle analysis of a cell proliferation associated human unclear antigen defined by the monoelonalantibody Ki-67[J].J Immunol，1984，133（13）：1710-1715.

[8] Bhatavdekar J M，Patel D D，Shah N G，et al.Prognostic significance of immunohistochemically localized biomarkers in stageⅡ and stage Ⅲ breast cancer：a multivariate analysis[J].Ann Surg Oncol，2000，7（4）：305-311.

[9]吳俊，曹永政，彭格紅.乳腺癌超聲特征與分子生物學指標的相關(guān)性研究[J].中國臨床醫(yī)學影像雜志，2009，20（9）：689-692.

[10]任永富，閻若無，吳幼波，等.彩超診斷小乳腺癌[J].中國醫(yī)學影像技術(shù)，2001，17（3）：242-243.

[11]余小琴，吳乃安，姚蘭輝，等.小乳腺癌超聲直接和間接征象與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系的Logistic回歸分析[J].中華醫(yī)學超聲雜志，2010，7（6）：1015-1022.

[12] Kim S H，Seo B K，Lee J，et al.Correlation of ultrasound findings with histology，tumor grade，and biological markers in breast cancer[J].Acta Oncologica，2008，47（8）：1531-1538.

[13]何治平.彩色多普勒高頻超聲對乳腺腫瘤的檢出意義[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2012，9（11）：82-83.

[14]王豐，宋蘇云，張銳.乳腺浸潤性導(dǎo)管癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素分析[J].中華乳腺病雜志（電子版），2011，5（4）：434-445.

[15]曾紅艷，曹學政.乳腺癌超聲征象與ER、PR、C-erbB-2表達的相關(guān)性研究[J].中國醫(yī)學影像技術(shù)，2007，23（12）：1827.

[16]李維權(quán)，宋茂民.HER-2、P53、Ki67、Nm23、ER、PR蛋白在乳腺癌中的表達及臨床意義[J].標記免疫分析與臨床，2011，18（1）：18-22.

[17]王慧珠，栗河舟，班振英，等.超聲對年輕患者乳腺葉狀腫瘤與纖維腺瘤診斷的研究[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2014，11（34）：84-86.

[18]錢超文，徐棟，邊曄萍，等.乳腺癌彩色多普勒超聲顯像與ER、PR、C-erbB-2的表達及意義[J].中國腫瘤，2005，14（5）：339-341.