截敏祛風(fēng)2號方對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜組胺影響的實驗研究*

黃漢英，黃基榮，何光倫

(武警北京總隊第三醫(yī)院，北京 100141)

截敏祛風(fēng)2號方對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜組胺影響的實驗研究*

黃漢英，黃基榮，何光倫

(武警北京總隊第三醫(yī)院，北京 100141)

目的:探討截敏祛風(fēng)2號方對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜組胺的影響，以期為臨床治療提供有效依據(jù)。方法:按隨機數(shù)字表法選取40只大鼠作為研究對象，每組10只，先采用經(jīng)卵清蛋白致敏制備動物模型，成功后分別灌注截敏祛風(fēng)2號方、截敏祛風(fēng)1號方、西替利嗪和生理鹽水。采用酶聯(lián)法檢測造模，稱出鼻黏膜組胺含量。結(jié)果:在臨床癥狀體征積分和嗜酸性細胞陽性率以及組胺含量上均以生理鹽水最高，而截敏祛風(fēng)2號方在噴嚏、流涕和嗜酸性細胞陽性率在截敏祛風(fēng)1號方、西替利嗪比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而組胺含量比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:截敏祛風(fēng)2號方能降低變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜組胺含量，可有效改善變應(yīng)性鼻炎臨床癥狀。

變應(yīng)性鼻炎;截敏祛風(fēng)2號方;大鼠;鼻黏膜組胺

變應(yīng)性鼻炎是特應(yīng)性個體接觸致敏源后導(dǎo)致包含IgE炎癥介質(zhì)釋放和多種免疫活性細胞，而細胞因子參與鼻黏膜慢性炎癥反應(yīng)的疾病。臨床上以噴嚏、鼻癢、鼻塞、流大量清涕為主要特征。研究［1］稱，該疾病近些年有升高趨勢，全球發(fā)病率為10%～20%，在發(fā)達國家患病率每30年增加1倍。該疾病嚴重影響患者生活質(zhì)量，給患者帶來了巨大的經(jīng)濟和心理負擔(dān)。在治療上目前仍無特異性方法，而中醫(yī)藥治療該病具有較好的效果，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取40只大鼠為研究對象，每組10只。近交系，均為雄性，平均體質(zhì)量(210±20)g，均由湖北試驗動物中心提供。備好相關(guān)的試劑，如卵清蛋白、氫氧化鋁、大鼠組胺試劑、2%戊巴比妥鈉、10%甲醛、蘇木素-伊紅染液、磷酸緩沖劑和丙酮等。實驗儀器有電子天平、手持式勻漿機、低溫高速離心沉淀機、酶標(biāo)儀、微量加樣器、解剖顯微鏡等。

1.2 方法

對所有大鼠進行變應(yīng)性鼻炎動物造模，先用卵清蛋白0.3 mg作抗原，氫氧化鋁粉末30 mg作為佐劑，加生理鹽水1 ml形成混合液后進行腹腔注射，隔日1次，連續(xù)注射1周。在進行強化致敏、腹腔注射完成后，每只大鼠以0.25%卵清蛋白生理鹽水2 ml霧化吸入，每日1次，連續(xù)使用5 d。激發(fā)則為末次霧化后間歇3 d后，以1%卵蛋白用微量加樣器滴入大鼠雙側(cè)鼻腔中，每次約20單位，每日1次，連續(xù)使用7 d。每次滴鼻后觀察大鼠噴嚏、搔抓、流涕等鼻部癥狀，均觀察30 min。觀察大鼠行為學(xué)得分，總分為5分。鼻分泌物可見大量嗜酸性粒細胞表示造模成功，然后根據(jù)每組試驗要求分別給予不同藥物。截敏祛風(fēng)2號方藥物組成:茜草10 g，防風(fēng)6 g，蟬衣6 g，地龍10 g;截敏祛風(fēng)1號方組成:茜草10 g，蟬衣6 g，地龍10 g，紫草10 g，徐長卿10 g，烏梅10 g，防風(fēng)6 g，以上均煎汁10 ml灌胃;西替利嗪(深圳致君制藥有限公司，國藥準字H20000386)10 mg灌胃，生理鹽水10 ml灌胃。以上均灌胃1周，每日早晚各1次。然后采用Loren氏法對大鼠造模完成時和取材時各做1次，在光鏡下觀察嗜酸性粒細胞情況。

然后在末次滴鼻30 min后用2%戊巴比妥鈉麻醉下斷頭處死，剝離上頜骨骨部皮膚后將其從顱骨中游離出來，沿鼻中線切開后暴露鼻中隔和雙側(cè)鼻腔，取下鼻甲和鼻中隔黏膜組織50 mg后置于液氮中冷凍，先進行組織粉碎勻漿，經(jīng)離心后取上清液，再用相關(guān)檢測方法檢組胺含量。

1.3 評定標(biāo)準

從第1次給藥后觀察大鼠在噴嚏、抓鼻和流涕癥狀變化情況，參照中華醫(yī)學(xué)會變應(yīng)性鼻炎診斷標(biāo)準，采用計分法觀察癥狀且記錄。輕度:計為1分，噴嚏為1～3次，流涕為流至前鼻孔，鼻癢搔鼻為輕擦鼻幾次;中度:噴嚏4～10分，流涕超過前鼻孔，鼻癢搔鼻為抓鼻面不止;重度:3分，噴嚏超過11分，流涕滿面到處摩擦抓癢［2］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計分析，將調(diào)查統(tǒng)計的內(nèi)容作為變量，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組鼻部癥狀體征比較

表1顯示，所有患者動物造模成功，評分均在5分以上，各組大鼠健康活潑，反應(yīng)敏捷，食欲正常，體質(zhì)量逐漸加大，無死亡情況出現(xiàn)。對各組的鼻部癥狀體征進行比較，A組、B組、C組和D組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而A組和B組在所有癥狀和A組、B組和C組在抓鼻次數(shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但A組和B組、C組在噴嚏、鼻分泌物比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 4組鼻部癥狀體征比較(±s，分)

表1 4組鼻部癥狀體征比較(±s，分)

注:A、B、C、D組分別代表截敏祛風(fēng)2號方、截敏祛風(fēng)1號方、西替利嗪和生理鹽水(下同)

臨 床 癥 狀 例數(shù) A組 B組 C組 D組噴 嚏 (個) 10 0.89±0.23 0.94±0.52 0.71±0.20 2.43±0.53 10 1.94±1.00 2.05±0.88 3.89±1.35 10.46±3.15抓 鼻 (次) 10 5.02±0.94 4.72±1.20 4.62±1.20 13.57±3.56鼻分泌物(分)

2.2 鼻分泌物中嗜酸性細胞陽性率比較

表2顯示，對鼻分泌物中嗜酸性細胞陽性率進行比較，以D組最高為60%，A、B、C 3組組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

表2 鼻分泌物中嗜酸性細胞陽性率比較(%)

2.3 4組組胺含量比較

表3顯示，對組胺含量進行比較，A組和B組、C組、D組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而B、C、D 3組組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

表3 4組組胺含量比較(±s，ng/mL)

表3 4組組胺含量比較(±s，ng/mL)

組胺含量 例數(shù) A組 B組 C組 D組10 26.5355±10.367430.4647±5.6756 35.3575±6.0367 39.2374±13.4675

3 討論

變應(yīng)性鼻炎指的是臨床上多種炎癥介質(zhì)、細胞因子和免疫細胞共同參與形成的黏膜局部血供和神經(jīng)、腺體功能紊亂的疾病，在臨床上常稱為級鏈反應(yīng)。中醫(yī)學(xué)上稱之為鼻鼽，其發(fā)病病機主要是衛(wèi)表不固、風(fēng)寒濕乘虛而入侵犯鼻腔的氣虛證，由于津液停聚、鼻塞雍滯，致使出現(xiàn)鼻腔部的流清涕等癥狀。而其病因中就有內(nèi)外因，屬于本虛標(biāo)實證，本在脾腎，標(biāo)在肺，而在治療上則需急治標(biāo)、緩治本［3-4］。

在本研究中采用的是截敏祛風(fēng)2號方，由茜草、蟬衣、防風(fēng)、地龍等4味中藥組成，其中茜草涼血活血，可起到治風(fēng)先治血、血行風(fēng)自滅作用;防風(fēng)可通竅止涕、祛風(fēng)脫敏;地龍祛風(fēng)止癢通絡(luò)［5］，總之具有宣竅止涕、祛風(fēng)脫敏的作用。從現(xiàn)代藥理學(xué)上看，茜草、防風(fēng)具有抑制病原菌生長、抗氧化、抗過敏和免疫調(diào)節(jié)作用，其中茜草還具有抑制氧化物、對抗過氧化氫的脂質(zhì)代謝、減輕谷胱甘肽含量等作用。研究［6］稱，防風(fēng)可抑制大鼠的免疫作用，能抑制離體氣管等過敏性收縮，對外源性或內(nèi)源性組胺藥物瘙癢模型有顯著止癢效果。報道認為，防風(fēng)還能有效增強機體免疫力，提高吞噬細胞吞噬功能和NK細胞殺傷活性;地龍則能對抗組胺毛細血管通透性，抑制嗜酸性粒細胞的增加，阻止該細胞在全身中的激活情況;蟬衣則能很好地提高機體免疫力［8］。

采用截敏祛風(fēng)2號方治療變應(yīng)性鼻炎后鼻部臨床癥狀體征有明顯好轉(zhuǎn)跡象，但在嗜酸性細胞陽性率上則僅為20%，說明該藥物吞噬細胞有很好作用，特別是在組胺上變化顯著。研究認為，組胺是臨床上最常見的炎性介導(dǎo)物質(zhì)，其指標(biāo)越低說明變態(tài)反應(yīng)越強［9］。

結(jié)果顯示，該藥物能很好地抑制組胺含量，并在嗜酸性細胞和相關(guān)積分上比較也顯著不同，說明該方法臨床效果是滿意的。其結(jié)果顯示，目前采用中醫(yī)藥治療疾病具有安全性高、費用低廉等優(yōu)勢，受影響因素較低［10］。而通過本研究為臨床采用截敏祛風(fēng)2號治療應(yīng)性鼻炎提供了有效依據(jù)，且臨床效果滿意。但西醫(yī)臨床治療變應(yīng)性鼻炎后發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥較為混亂，有待臨床上進一步深入探討。

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［2］袁穎，郭忻.鼻炎噴劑對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜形態(tài)及組胺含量的影響［J］.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2011，22(4):72-74.

［3］Li Jing，Huang Ying，Lin Xiaoping.Influence of degree of specific allergic sensitivity on severity of rhinitis and asthma in Chinese allergic patients［J］.Respiratory Research，2011，12(1):36-39.

［4］袁穎，符勝光，郭忻，等.鼻炎噴劑對變應(yīng)性鼻炎模型大鼠鼻黏膜病理改變及組胺含量的影響［C］.中華中醫(yī)藥學(xué)會2008臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集，2013，8(4):258-261.

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［8］燕志強，高盛宏，李得本，等.變應(yīng)性鼻炎患者組胺受體表達及與嗜酸性粒細胞浸潤相關(guān)性分析［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科雜志，2011，19(4):223-225.

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R765.21

B

1006-3250(2015)06-0675-02

2015-03-04

北京市衛(wèi)生局重點扶持計劃(BW-2012BNO.029)

黃漢英，女，主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)本科，從事耳鼻喉疾病的臨床與研究。