結(jié)直腸癌患者血清降鈣素原水平變化及其與腸道菌群失調(diào)的關(guān)系

魏莉平，黃艷春，劉誠(chéng)明

(新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，烏魯木齊830011)

結(jié)直腸癌患者血清降鈣素原水平變化及其與腸道菌群失調(diào)的關(guān)系

魏莉平，黃艷春，劉誠(chéng)明

(新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，烏魯木齊830011)

目的 觀察結(jié)直腸癌患者血清降鈣素原(PCT)水平變化，分析其與腸道菌群失調(diào)的關(guān)系。方法 行結(jié)直腸癌根治手術(shù)的結(jié)直腸癌患者60例，收集手術(shù)前糞便標(biāo)本，計(jì)算雙歧桿菌、大腸桿菌菌數(shù)量及其比值(B/E值)；抽取靜脈血，檢測(cè)血清PCT。結(jié)果 結(jié)直腸癌患者糞便大腸桿菌(7.95±1.02)log10，雙歧桿菌(7.14±0.58)log10，B/E值1.11±0.09；血清PCT(0.27±0.26)ng/mL；血清PCT與B/E值呈正相關(guān)(r=0.612，P<0.01)。血清PCT水平與結(jié)直腸癌患者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤分期有關(guān)(P=0.02、0.03)。結(jié)論 隨著結(jié)直腸癌分期增高及發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，血清PCT水平升高；血清PCT水平與結(jié)直腸癌患者腸道菌群失調(diào)有關(guān)。

結(jié)直腸腫瘤；降鈣素原；菌群失調(diào)

血清降鈣素原(PCT)是一種反映全身炎癥反應(yīng)活動(dòng)的重要指標(biāo)，在非炎癥性感染過程中保持低水平。PCT對(duì)胃腸道癌圍手術(shù)期感染性并發(fā)癥的監(jiān)測(cè)比其他炎癥標(biāo)記物(如C反應(yīng)蛋白)更靈敏[1]；此外，監(jiān)測(cè)血清PCT變化可以了解細(xì)菌的感染程度，對(duì)治療及預(yù)后有重要指導(dǎo)意義[2～4]。研究發(fā)現(xiàn)，腸道菌群失調(diào)及其代謝產(chǎn)物與結(jié)直腸癌發(fā)生密切相關(guān)[5,6]。本研究觀察結(jié)直腸癌患者血清PCT水平變化，分析血清PCT水平與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征及腸道菌群失調(diào)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2012年12月～2013年12月新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院收治結(jié)直腸癌患者60例，均行結(jié)直腸癌根治手術(shù)。男34例、女26例，年齡48～73歲、平均61歲，腫瘤位于直腸23例、結(jié)腸37例。

1.2 方法

1.2.1 腸道菌群檢查方法 患者留取糞便標(biāo)本前4周均未使用抗生素、微生態(tài)制劑及聚乙二醇，未做術(shù)前腸道內(nèi)準(zhǔn)備。晨起自然排便時(shí)取新鮮尾便1 g，置入?yún)捬醮鼉?nèi)，30 min內(nèi)送檢。用天平稱取0.1 g糞便于EP管中，加入0.9 mL生理鹽水，系列10倍稀釋，各稀釋度取0.01 mL使用接種環(huán)分別接種至培養(yǎng)大腸桿菌、雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基平板上；大腸桿菌培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)24～48 h；雙歧桿菌培養(yǎng)基置于厭氧罐中，放入?yún)捬醢l(fā)生劑后封閉，再放入恒溫培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)48～72 h；分別對(duì)各菌株進(jìn)行鑒定，并按平板活菌計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)，計(jì)算雙歧桿菌/大腸桿菌(B/E值)。每毫升標(biāo)本中活菌集落單位(log10)計(jì)算公式：(標(biāo)本質(zhì)量+稀釋量)/標(biāo)本質(zhì)量×稀釋度×菌落個(gè)數(shù)(或×10)(稀釋度即稀釋倍數(shù))。

1.2.2 血清PCT檢測(cè) 患者在留取糞便標(biāo)本前1 h內(nèi)取血液標(biāo)本進(jìn)行血清PCT測(cè)定。PCT檢測(cè)采用電化學(xué)發(fā)光免疫學(xué)方法，步驟參照Roche PCT進(jìn)口原裝試劑盒說明書，總檢測(cè)時(shí)間18 min。

2 結(jié)果

結(jié)直腸癌患者糞便大腸桿菌(7.95±1.02)log10，雙歧桿菌(7.14±0.58)log10，B/E值1.11±0.09；血清PCT(0.27±0.26)ng/mL；血清PCT與B/E值呈正相關(guān)(r=0.612，P<0.01)。

血清PCT水平與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系見表1。

3 討論

人體在健康狀態(tài)下腸道菌群與腸道微環(huán)境維持平衡狀態(tài)。腸道中的正常菌群主要為專性厭氧菌，占99.0%～99.9%，但當(dāng)機(jī)體受感染、應(yīng)激等刺激或飲食發(fā)生改變時(shí)，腸道菌群平衡就可能被打破導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)[7]。腸道菌群失調(diào)可引起腸道細(xì)菌易位，促進(jìn)內(nèi)毒素進(jìn)入腸道，從而破壞腸道黏膜屏障、增加腸壁通透性，并釋放更多的炎性因子引起腸道發(fā)生慢性炎癥反應(yīng)[8]。慢性炎癥釋放的炎性因子以及免疫應(yīng)答過程中激活的免疫細(xì)胞可促進(jìn)結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。此外，炎性細(xì)胞產(chǎn)生的活性氧自由基和活性氮自由基，可損傷腸黏膜上皮細(xì)胞DNA，從而誘導(dǎo)癌基因的激活或抑制抑癌基因，最終參與結(jié)直腸癌發(fā)生。腸道菌群失調(diào)主要表現(xiàn)為糞便中厭氧菌與需氧菌的比值下降。目前，糞便中厭氧菌與需氧菌的比值主要以B/E值表示，腸道菌群組成正常者B/E值常>1，而失調(diào)者B/E值一般<1。結(jié)直腸癌患者腸道菌群失調(diào)主要表現(xiàn)為腸道中大腸桿菌、腸球菌、類桿菌數(shù)量升高，而雙歧桿菌及乳酸桿菌減少[9]；術(shù)后B/E值倒置明顯，以雙歧桿菌及乳酸桿菌的減少最為顯著[10]。本研究中，結(jié)直腸癌患者B/E值為1.11±0.09，表明結(jié)直腸癌患者存在腸道菌群失調(diào)，具體表現(xiàn)為腸道中有益菌雙歧桿菌明顯減少，而潛在致病菌大腸桿菌明顯增加。

PCT是降鈣素前肽物質(zhì)，無激素活性，由116個(gè)氨基酸殘基組成，主要由甲狀腺髓質(zhì)中的C細(xì)胞分泌，是一種新的感染性炎性標(biāo)記物。人體在健康狀態(tài)下，甲狀腺C細(xì)胞僅分泌極微量的PCT。但當(dāng)人體發(fā)生嚴(yán)重的細(xì)菌、真菌感染以及多器官功能衰竭引起的感染時(shí)，血清PCT水平明顯升高。因此，PCT水平是一種反映全身炎癥反應(yīng)活動(dòng)的重要指標(biāo)，與被感染器官、菌種、炎癥程度和機(jī)體免疫功能狀況等密切相關(guān)[11，12]。細(xì)菌內(nèi)毒素是誘導(dǎo)PCT產(chǎn)生的最主要的刺激因子[13,14]。結(jié)直腸癌患者機(jī)體免疫功能差，腸道菌群失調(diào)會(huì)導(dǎo)致腸道內(nèi)革蘭陰性桿菌過度繁殖，細(xì)菌內(nèi)毒素隨之生成增多，最終導(dǎo)致腸道黏膜炎癥。本研究結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌患者血清PCT水平與B/E值呈正相關(guān)，說明血清PCT可作為反映腸道菌群失調(diào)情況的指標(biāo)。

Matzaraki等[15]研究發(fā)現(xiàn)，肝癌患者血清PCT水平越高，發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的潛在風(fēng)險(xiǎn)越大。本研究中結(jié)直腸癌發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者血清PCT水平較未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者高，說明血清PCT水平可能在反映腸道黏膜受損程度方面具有一定意義。而且，本研究發(fā)現(xiàn)血清PCT水平與結(jié)直腸癌患者腫瘤分期存在一定關(guān)系，說明血清PCT水平可以作為結(jié)直腸癌患者預(yù)后評(píng)估指標(biāo)。

綜上所述，結(jié)直腸癌患者血清PCT水平可反映腫瘤分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及腸道菌群失調(diào)，可指導(dǎo)治療及評(píng)估預(yù)后。

[1] Montagnana M, Minicozzi AM, Salvagno GL, et al. Postoperative variation of C-reactive protein and procalcitonin in patients with gastrointestinal cancer[J]. Clin Lab, 2009,55(5-6):187-192.

[2] 黎卓華,吳麗川,何綺雯,等.細(xì)菌感染患者血清降鈣素原的診斷意義[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(9):1166-1167.

[3] 李莉,辛?xí)阅?血清降鈣素原、C反應(yīng)蛋白對(duì)尿路感染的診斷價(jià)值[J].山東醫(yī)藥，2013,53(21):40-42.

[4] 秦東春,張欽憲.感染性和非感染性燒傷患者血清CRP和PCT水平比較[J].山東醫(yī)藥，2012,52(4):90-91.

[5] 郭伯敏,秦環(huán)龍.腸道菌群在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制中的研究進(jìn)展[J].腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng),2014,21(2):114-118.

[6] 王生,黃曉星,余鵬飛,等.腸道菌群失調(diào)與結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展之間關(guān)系的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2014,30(8):1045-1049.

[7] 賈盛佼,王莉莉,于新娟,等.腸道菌群參與結(jié)直腸癌發(fā)生的模式[J].世界華人消化雜志,2013,21(9):779-784.

[8] Sartor RB. Microbial influences in inflammatory bowel diseases[J]. Gastroenterology, 2008,134(2):577-594.

[9] 郭世奎,王昆華.16S rRNA基因與結(jié)直腸癌患者腸道相關(guān)分子微生態(tài)研究進(jìn)展[J].云南醫(yī)藥,2010,31(2):211-215.

[10] Rafter J, Bennett M, Caderni G, et al. Dietary synbiotics reduce cancer risk factors in polypectomized and colon cancer patients[J]. Am J Clin Nutr, 2007,85(2):488-496．

[11] 賓昌輝.血清降鈣素原水平在抗生素致腸道菌群失調(diào)性腹瀉患兒中的臨床應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué),2014,22(4):167-168.

[12] 王赤,任天成,戚曉莊,等.血清降鈣素原對(duì)多器官功能障礙綜合征早期診斷的臨床價(jià)值[J].山東醫(yī)藥,2009,49(37):39-40.

[13] 盧本亮.降鈣素原在鑒別診斷細(xì)菌和病毒感染中的應(yīng)用[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2014,12(4):798.

[14] 血清降鈣素原和內(nèi)毒素在肝硬化患者腹水感染中的診斷價(jià)值[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2014,(4):452-455.

[15] Matzaraki V, Alexandraki KI, Venetsanou K, et al. Evaluation of serum procalciton in and interleukin-6 levels as markers of liver metastasis[J]. Clin Biochem, 2007,40(5-6):336-342.

10.3969/j.issn.1002-266X.2015.12.032

R735.3

B

1002-266X(2015)12-0078-02

2014-07-15)