老年宮頸癌患者組織及血清VEGF－C的表達水平及其相關(guān)性研究

陳艷君 黎勇夫

老年宮頸癌患者組織及血清VEGF－C的表達水平及其相關(guān)性研究

陳艷君 黎勇夫

目的探析老年宮頸癌患者組織和血清中血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF－C)的表達及其相關(guān)性。方法將入選的60例老年宮頸癌患者作為觀察對象，其中淋巴轉(zhuǎn)移和非淋巴轉(zhuǎn)移者各30例;入選同期30例老年宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)患者和30例老年健康人群作為對照。采用免疫組化(SP)法檢測組織中VEGF－C的表達，采用雙抗體夾心酶聯(lián)吸附免疫(ELISA)法檢測血清中VEGF－C的濃度，并采用Pearson相關(guān)分析研究VEGF－C在組織和血清中的相關(guān)性。結(jié)果宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移組組織VEGF－C陽性表達率93．3%(28/30)最高，吸光度(32865．4±5927．4)最高，血清中VEGFC濃度(13845．2±1228．6)pg/ml最高，其次為宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組和CIN對照組，正常對照組最低，組間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0．05);組織和血清中的VEGF－C呈正相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)γ=0．723。結(jié)論老年宮頸癌患者組織和血清中VEGF－C均顯著升高，且二者呈正相關(guān)性。

組織;宮頸癌;血清;VEGF－C;相關(guān)性

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:812～814)

宮頸癌也稱宮頸浸潤癌，是常見的女性惡性腫瘤之一，近年流行病學(xué)數(shù)據(jù)表明，宮頸癌的死亡病例約25．5萬［1］。VEGF－C與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［2－3］。我院納入60例老年宮頸癌患者，檢測組織和血清中VEGF－C的表達，分析其相關(guān)性，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1．1 一般資料

入選我院2012年1月－2014年1月收治的60例老年宮頸癌患者作為觀察對象，所有患者均經(jīng)術(shù)后病理結(jié)果確診。宮頸癌患者年齡60～80歲，平均(69．2 ±5．1)歲;組織病理學(xué)分型:鱗癌48例(80．0%)，腺癌10例(16．7%)，腺鱗癌2例(3．3%);低分化14例(23．3%)，中分化36例(60．0%)，高分化10例(16．7%);根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)病理分期:Ⅰ期14例(23．3%)，Ⅱ期16例(2%6．7)，Ⅲ期22例(36．7%)，Ⅳ期8例(13．3%);根據(jù)是否有淋巴轉(zhuǎn)移分為2組，各30例。入選同期30例老年CIN患者和30例老年健康人群作為對照。CIN組患者年齡60～79歲，平均(68．7±4．8)歲;CINⅡ期16例(53．3%)，CINⅢ期14例(46．7%)。健康對照組年齡60～83歲，平均(69．1±5．0)歲。4組患者的平均年齡等基線特征大體一致。

1．2 方法

組織VEGF－C表達檢測:采用活檢取得宮頸組織標本，并用10%福爾馬林固定，石蠟包埋，制作若干切片，采用SP法(試劑盒源自美國Santa公司)染色，嚴格按照試劑盒說明操作。血清VEGF－C濃度檢測:抽取受試者靜脈血4 ml，置于試管中搖勻，凝固，分離血清標本，在2 000 r/min條件下離心10 min，取上清液待測。采用雙抗體ELISA法(試劑盒源自北京博奧森生物技術(shù)公司)檢測，嚴格按照試劑盒說明操作。采用Pearson相關(guān)性分析研究VEGF－C在組織和血清中的相關(guān)性。

1．3 判斷和評估標準

根據(jù)IseKi K綜合計分法計算VEGF－C在組織中的陽性表達［4］:a:染色強度(0=無，1=弱，2=中，3=強);b:陽性細胞數(shù)(0=無陽性細胞，1=陽性細胞＜25%，2=陽性細胞25%～50%，3=陽性細胞＞50%)。二者綜合得分為0～1分，陽性指數(shù)為0;二者綜合得分為2分，陽性指數(shù)為1;二者綜合得分為3分，陽性指數(shù)為2;二者綜合得分為4～5分，陽性指數(shù)為3;二者綜合得分為6分，陽性指數(shù)為4。陽性指數(shù)≥2為陽性表達。讀取組織VEGF－C表達的光密度值。根據(jù)吸光度值(OD)計算血清中VEGF－C濃度。

1．4 統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 17．0統(tǒng)計軟件對結(jié)果進行統(tǒng)計分析，計量資料采用均數(shù)±標準差(ˉx±s)表示，比較采用t檢驗，計數(shù)資料采用百分數(shù)表示，比較采用χ2檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析，P＜0．05則差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．14 組組織VEGF－C陽性表達率比較

宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移組組織VEGF－C陽性表達率為93．3%(28/30)，顯著高于宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組60．0%(18/30)(χ2=7．55，P＜0．01);宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組顯著高于CIN對照組30．0%(9/30)(χ2= 4．31，P＜0．01)，CIN對照組顯著高于正常對照組(χ2=8．37，P＜0．01)，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0．05)。

2．24 組組織VEGF－C吸光度比較

宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移組組織VEGF－C吸光度為(32865．4±5927．4)，顯著高于宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組(27092．1±5145．2)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2= 4．03，P＜0．01);宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組顯著高于CIN對照組(10054．8±4132．9)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=14．14，P＜0．01);CIN對照組顯著高于正常對照組(3743．8±1876．5)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=7．62，P＜0．01)。

2．34 組血清VEGF－C濃度比較

宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移組組織VEGF－C濃度為(13845．2 ±1228．6)pg/ml，顯著高于宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組(11938．4±995．8)pg/ml，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2= 6．61，P＜0．01);宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組顯著高于CIN對照組(11003．7±1142．5)pg/ml，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=3．78，P＜0．01);CIN對照組顯著高于正常對照組(10123．5±921．6)pg/ml，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=3．28，P＜0．01)。

2．4 組織和血清VEGF－C相關(guān)性

根據(jù)Pearson相關(guān)性分析，宮頸癌組織和血清中的VEGF－C表達均隨宮頸癌程度的加深而升高，相關(guān)系數(shù)γ=0．723，P＜0．05。

3 討論

宮頸癌病因較為明確，與人乳頭瘤病毒(HPV)持續(xù)感染密切相關(guān)。HPV種類繁多，與生殖道黏膜感染相關(guān)者至少有30余種，婦女感染率高達80%［5］，但大多數(shù)能夠自然清除，少數(shù)持續(xù)感染。鱗癌是常見的病理類型，其次是腺癌，但近年腺癌發(fā)生率逐年上升［6］。過早性行為、過多性伴侶、吸煙、長期服用避孕藥以及免疫系統(tǒng)的抑制和缺陷都是宮頸癌的高危發(fā)病因素。腫瘤血管生成指的是腫瘤內(nèi)新生長形成的血管，包括微血管前期到毛細血管形成新血管結(jié)構(gòu)［7］。癌細胞生長到1～2 mm的球狀結(jié)構(gòu)時，需要更多營養(yǎng)物質(zhì)并排出廢物，若缺乏血供，則無法繼續(xù)生長。因此，腫瘤的新生血管可以供腫瘤營養(yǎng)和氣體交換等［8］。近年來，諸多臨床研究認為［9］，腫瘤的新生血管還是癌變進展、浸潤漸深和腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。腫瘤通過釋放血管生成刺激因子誘導(dǎo)新生血管，如VEGF、堿性成纖維細胞生長因子和血小板內(nèi)皮細胞生長因子(PDECGF)等。

VEGF是一組分泌型糖蛋白，VEGF－C是其中重要一員。VEGF－C也是一種重要的致淋巴管生長因子，主要表達于心臟、小腸、卵巢和胎盤中。無論是在病理組織還是正常組織中，VEGF－C均是新血管生成的主要調(diào)節(jié)因子，并通過與其受體的結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。目前，VEGF－C在宮頸癌中表達的研究較少且無一致結(jié)論。但對其它系統(tǒng)腫瘤的研究發(fā)現(xiàn)，VEGF－C在腫瘤組織中的陽性表達率升高，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［10］。說明轉(zhuǎn)染了VEGF－C的腫瘤組織生長迅速，且容易形成比正常組織更多的血管異種移植體。

我院納入60例老年宮頸癌患者，檢測組織和血清中VEGF－C的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移組組織VEGF－C陽性表達率最高，吸光度最高，血清中VEGF－C濃度最高，其次為宮頸癌非淋巴轉(zhuǎn)移組和CIN對照組，正常對照組最低，組間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0．05)。提示隨著宮頸疾病的發(fā)生發(fā)展，VEGF－C表達逐步增強，尤其是盆腔淋巴轉(zhuǎn)移宮頸癌患者組織和血清中VEGF－C高表達，說明其在術(shù)前對宮頸癌是否發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移具有重要預(yù)測價值。這與國內(nèi)相關(guān)研究結(jié)果一致［11］。VEGF－C參與宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移的機制復(fù)雜，VEGF－C具有提高腫瘤細胞黏附力并激活淋巴管內(nèi)皮細胞上受體的作用，從而實現(xiàn)較強趨化能力，使自身淋巴系統(tǒng)為腫瘤轉(zhuǎn)移提供便利條件［12－13］。此外，通過Pearson相關(guān)性分析研究發(fā)現(xiàn)，組織和血清中的VEGF－C呈正相關(guān)，當無法檢測組織中VEGF－C表達時，可相對方便地檢測血清中VEGF－C濃度，臨床價值一致。

綜上所述，老年宮頸癌患者組織和血清中VEGFC均顯著升高，且二者呈正相關(guān)性。

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Study of VEGF-C Expression Level in Tissues and Serum of elderly Patients with Cervical Cancer and Their Relevance

CHEN Yanjun，LI Yongfu．First People＇s Hospital of Jiulongpo，Chongqing，404100

ObjectiveTo study the VEGF－C expression in tissues and serum of elderly patients with cervical cancer and their relevance．Methods60 elderly patients with cervical cancer were chosen as research objects，including 30 cases with lymphatic metastasis and 30 cases without lymphatic metastasis．30 elderly patients with CIN and 30 elderly healthy patients were chosen as the control group．SP method was adopted to detect expression of VEGF－C in tissues，and ELISA method was adopted to detect VEGF concentration in serum．Pearson relevance analysis was adopted to study the relevance of VEGF－C in tissues and serum．ResultsPositive expression rate of VEGF－C in cervical cancer tissues with lymphatic metastasis was 93．3%(28/30)，absorbancy was(32865．4±5927．4)，and serum VEGF－C level was(13845．2±1228．6)pg/ml which was the highest，secondly was cervical cancer without lymphatic metastasis and CIN control group，and healthy control group was the lowest(all P＜0．05)．There was positive relevance between VEGF－C in tissues and serum，and the correlation index was γ=0．723．ConclusionVEGF－C in tissues and serum of elderly patients with cervical cancer both rise obviously and they are positively related．

Tissue;Cervical cancer;Serum;VEGF－C;Relevance

10．3969/j．issn．1001－5930．2015．06．006

R737．33

:A

:1001－5930(2015)06－0812－03

2014－10－23

2015－01－20)

(編輯:甘艷)

404100重慶市九龍坡區(qū)第一人民醫(yī)院