眼分泌物細菌培養及藥物敏感性分析

南方醫科大學附屬中山市博愛醫院（528403）林愛心 譚南 汪偉山 楊曉華 李麗蓮

為了解我院嬰幼兒眼疾的細菌分布及藥物敏感試驗情況，對1505例嬰幼兒眼分泌物標本細菌培養及藥物敏感試驗結果進行回顧性分析，結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 1505例標本來自中山市博愛醫院2013年4月～2014年9月眼科門診的患兒，診斷為結膜炎、淚囊炎或淚道阻塞合并感染，年齡從出生3天至6歲5月，其中3天至3月齡嬰兒共1021例。

1.2 儀器與試劑 采用法國梅里埃生物公司VITEK 2全自動細菌鑒定藥敏儀，其配套相關鑒定卡及藥敏卡由廣州華鑫公司提供，二氧化碳培養箱為美國Forma 3111，血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板、血M-H平板、腦心浸液培養基及HTM平板均購于廣州迪景公司，K-B法藥敏紙片由OXOID公司提供。使用金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸桿菌ATCC25922、肺炎鏈球菌ATCC49619質控標準菌株購于衛生部臨床檢驗中心。所有試劑均在有效期內使用。

1.3 實驗方法 按照《全國臨床檢驗操作規程》第三版要求，把標本接種于麥康凱平板、血平板及巧克力平板，置35℃，6%CO2經24～48小時培養，分離到純菌落后于法國梅里埃生物公司VITEK 2全自動細菌鑒定藥敏儀進行鑒定及藥敏試驗。流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌藥敏試驗用K-B法。判斷標準遵循美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）規定的法規。

2 結果

2.1 致病菌種類構成 1505例眼分泌物細菌培養中，無菌生長149例，占9.9%，有正常菌群（如：草綠色鏈球菌、棒狀桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌等）生長為840例，占55.8%，有致病菌生長占34.3%。檢出致病菌549株，以流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌為主，分別占25.9%，25.3%，20.2%。其中有35標本存在混合感染，主要以流感嗜血桿菌混合其他細菌如肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌或陰溝腸桿菌為主，各17例、6例、4例和1例。其余金黃色葡萄球菌混合肺炎鏈球菌2例；肺炎克雷伯氏菌混合化膿鏈球菌、大腸埃希氏菌或真菌，大腸埃希氏菌混合金黃色葡萄球菌，肺炎鏈球菌混合植生拉烏爾菌各1例。

2.2 藥敏試驗結果 主要革蘭陰性桿菌為流感嗜血桿菌，對氨芐西林及氨芐西林/舒巴坦的耐藥率分別為33.1%和16.9%，對環丙沙星、頭孢曲松、阿奇霉素耐藥率均為時0%。而肺炎克雷伯氏菌、大腸埃希氏菌等腸桿菌科細菌對氨芐西林及氨芐西林/舒巴坦的耐藥率分別為84.3%和21.9%，對頭孢曲松，復方新諾明的耐藥率分別為14.1%和7.8%，對環丙沙星及左氧氟沙星均為3.1%，腸桿菌科細菌對阿米卡星未見耐藥。主要革蘭陽性球菌為金黃色葡萄球菌及肺炎鏈球菌，對青霉素耐藥率分別為97.1%和29.7%、對紅霉素耐藥率分別為41.0%和89.2%，對克林霉素耐藥率分別為40.3%和85.6%、對復方新諾明耐藥率分別為2.9%和69.4%、兩者對萬古霉素的耐藥率均為0%，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率為21.6%。

3 討論

正常人的淚囊、結膜、鞏膜、角膜和前房等是無菌的，然而人的眼睛常年暴露于空氣中，以極易受到外界細菌的侵害。當遇到毒株和（或）人體抵抗力減弱時，外界進入的病原菌就會在眼內大量繁殖，引起感染[1]。草綠色鏈球菌是人體正常菌群的組成部分[2]，也非眼部主要致病菌。大多數棒狀桿菌存在于人體各部位及環境中，如果采樣過程不正確，就有可能會分離到這些菌株[1]。干燥棒狀桿菌、表皮葡萄球菌、微球菌等是結膜上的正常菌群。故本研究對以上幾種細菌列為非致病菌未作報告，注意勿將其誤作病原菌報告。莫拉菌屬存在于正常人皮膚和黏膜表面，是正常寄生菌，很少致病，是機會致病菌，也可引起眼結膜炎[1]，故對于大量優勢生長的卡他莫拉菌也作為致病菌統計在內。兒童細菌性眼結膜炎的主要致病菌為流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌、灰色奈瑟菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌等[1]。本組數據顯示，我院眼科患兒主要致病菌為流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯氏菌、銅綠假單胞菌等，與其一致。金黃色葡萄球菌是革蘭陽性菌中的主要致病菌，占致病菌檢出率25.3%，與各文獻報道相符。而流感嗜血桿菌25.9%和肺炎鏈球菌20.2%的檢出率遠比其高，這可能與其檢測條件有關。因該兩種細菌的培養條件較為苛刻，有時實驗室又不能做到及時處理標本，從而造成分離率較低。而20株真菌均為年齡3月內嬰兒標本中檢出，可能與其在分娩過程中由產道感染所致。

藥敏結果顯示流感嗜血桿菌除對氨芐西林和氨芐西林/舒巴坦一般耐藥外，對環丙沙星、頭孢曲松、阿奇霉素均高度敏感。金黃色葡萄球菌對青霉素耐藥性最高，對紅霉素及克林霉素次之，而對復方新諾明、左氧氟沙星、利福平則較為敏感，對萬古霉素則未見耐藥。MRSA約占五分之一。肺炎鏈球菌對紅霉素及克林霉素耐藥率最高，復方新諾明次之，青霉素相對敏感，而頭孢曲松和利福平則較為敏感，對萬古霉素也未見耐藥。腸桿菌科細菌則對氨芐西林較為耐藥，對氨芐西林/舒巴坦及頭孢曲松輕度耐藥，而對環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明等均較為敏感。結合本組數據，綜合分析，諾酮類藥滴眼液可作為首選外用藥用于經驗治療細菌性眼部感染。因不同的細菌對各種藥物的敏感性有較大差異，治療感染性眼疾，特別是嬰幼兒患者，一定要根據細菌培養及藥敏試驗結果合理選用抗生素，減少藥物耐藥性的產生及對兒童的毒副作用，以達到最佳治療效果。