復方磺胺氯吡嗪鈉—二甲氧芐啶混懸液對雞的安全性試驗

趙莎莎+徐亞亞

摘要：選取40羽（雌雄各半健康的15日齡揚州黃羽肉雞，隨機分成4組，每組10羽。試驗雞分別以0 mg/kg、推薦劑量（300 mg/kg、3倍推薦劑量（900 mg/kg、5倍推薦劑量（1 500 mg/kg的磺胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶混懸液連續給藥 5 d，給藥方式為自由飲水，5 d后根據各組雞平均增質量、血液學和血液生化學參數及組織病理學檢查結果，評價磺胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶混懸液對雞的安全性。

關鍵詞：磺胺氯吡嗪鈉；二甲氧芐啶混懸液；血液學；血液生化；安全性評價

中圖分類號： S85979+6文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（201412-0262-04

磺胺氯吡嗪屬于磺胺類廣譜抗菌藥，臨床主要用于治療由艾美耳屬球蟲感染引起的雞球蟲病和特定的細菌性疾病。二甲氧芐啶為獸醫專用抗菌增效劑，內服吸收很少，含DVD的復方制劑主用于防治禽、兔球蟲病及畜禽腸道感染[1]。本試驗所用的復方磺胺氯吡嗪鈉-二甲氧芐啶混懸液臨床擬用于治療由艾美耳屬球蟲感染引起的雞球蟲病，推薦的給藥方案為1 L水加入本品1～2 mL，連用3～5 d。筆者參照美國FDA《新獸藥靶動物安全性試驗指南》（Guideline No 33中禽的毒性研究內容，結合該藥物擬推薦的臨床使用劑量設計并進行了本次試驗，以提供磺胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶混懸液在雞的組織病理學和臨床病理學方面的研究數據，了解該產品對擬用靶動物的安全性。

1材料與方法

11供試藥品

磺胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶混懸液，含量200%+40%，規格為200 mL，由中牧南京動物藥業有限公司提供。

12試驗儀器與試劑

121儀器及其他

OLYMPUS Au2700 全自動生化分析儀，生物顯微鏡，離心機；其他器具有血細胞計數板、離心管、載玻片、蓋玻片等。

122試劑試驗中所用試劑主要有瑞士染液、結晶紫染液、中性紅染液等。

13試驗動物及飼養地點

1日齡黃羽肉雞100羽，購自中國家禽研究所孵化場，每天由專人定時喂料不含任何藥物的全價日糧（中國家禽研究所提供，自由飲食。育雛及試驗期間如需保溫則采用油汀或白熾燈保溫。

14試驗動物入選和剔除標準

入選的15日齡雞在試驗前1 d必須經獸醫檢查確認為臨床健康。試驗前處于瀕死的雞以及生病或受傷的雞不得作為試驗動物用于本次試驗。

15方法

151試驗分組與給藥方案

試驗前1 d從100羽飼養至14日齡的雛雞中選擇40羽健康雛雞，稱重后按體質量進行均衡隨機分組，共分4組，每組10羽雞（公母兼有。試驗雞采用翅號和籠號進行標記識別。

根據該藥物擬推薦的臨床給藥劑量，自15日齡起各組雞分別按推薦應用水平的倍數，即0、1、3、5倍的最大推薦劑量進行自由飲水給藥。試驗持續期為藥物推薦使用的最長持續時間，共計5 d。具體給藥方案：對照組0 mg/kg、最大推薦劑量組300 mg/kg、3倍最大推薦劑量組900 mg/kg和5倍最大推薦劑量組1 500 mg/kg，連用5 d。

152安全性試驗評價指標

1521臨床觀察

試驗期間每天對試驗動物進行細致而周密的觀察，描述靶動物對藥物有毒劑量產生的反應。具體觀察項目取決于藥物的已知特性和受試家禽的種類：（1與藥物有關的發病率和死亡率；（2增重和飼料轉化，試驗前和試驗結束后各測定1次；（3其他不良反應。

1522大體病理學檢查

對試驗中死亡的所有雞都要剖檢，對與藥物毒性、疾病或其他原因有關的死亡率通過可接受的診斷技術加以確認，并記錄死亡日期，對疑似與藥物相關的大體損傷進行組織病理學檢查。

1523臨床病理學檢查（血液學和血液生化學檢查[3-4]

在試驗結束時對每組試驗雞頸動脈放血并分別采集血樣進行血液生化學檢查和血常規檢查。檢測的參數有：（1血常規參數。包括紅細胞數量、血紅蛋白數量、白細胞數量、淋巴細胞數量、異嗜性粒細胞數量、單核細胞數量、嗜酸性粒細胞數量、嗜堿性粒細胞數量、淋巴細胞含量、異嗜性粒細胞含量、單核細胞含量、嗜酸性粒細胞含量、嗜堿性粒細胞含量。（2血液生化學參數。包括白蛋白含量、總蛋白含量、球蛋白含量、白球比值、直接膽紅素含量、總膽紅素含量、間接膽紅素含量、谷草轉氨酶活性、谷丙轉氨酶活性、乳酸脫氫酶活性、堿性磷酸酶活性、葡萄糖含量、尿素氮含量、肌酐含量、鈣含量、磷含量、鉀含量、鈉含量、氯含量。

1524組織病理學檢查

試驗結束時每組試驗雞進行組織學檢查。其中對肝臟、腎臟、脾臟和肺等組織進行常規檢查，根據出現的毒性情況決定是否對其他組織進行檢查。如果與不給藥的對照組相比，來自較高劑量試驗組雞的組織未出現與藥物相關的組織病理學變化，則較低濃度劑量組的雞組織則不必進行組織學檢查。

1525數據統計分析

用SPSS應用軟件系統進行數據的顯著性檢驗。采用t檢驗比較試驗組與對照組間平均增質量、料肉比（飼料利用率、血液學和血液生化學等各項指標的顯著性差異[5]。

2結果與分析

21一般臨床觀察

整個試驗期間，對照組、推薦劑量組和3倍推薦劑量組中的所有試驗動物健康狀況良好，飲水和采食均正常。5倍劑量組中有個別雞在給藥3 d時出現精神沉郁、采食量下降、羽毛蓬亂等現象；其他各試驗組雞在試驗期間未觀察到任何臨床癥狀。試驗期間各組動物均無死亡。

22增質量與飼料利用率

試驗結束時各組平均增質量及飼料利用率結果分別見表1與表2。統計學分析結果（表1表明，推薦劑量、3倍推薦劑量組雞平均增質量略有下降，但與對照組平均增質量差異不顯著（P>005；5倍推薦劑量組與對照組和其他用藥劑量組相比，平均增質量顯著下降（P<005。[FL]endprint

[F（W8][HT6H][J][WTH]表1試驗結束時各組雞的平均增質量（n=20[WTB][HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W15，W30，W15W]組別[B（][BHDWG12，W30W]體質量（g[BHDWG12，W15。2W][XXSX2-SX292]試驗前（15日齡試驗后（21日齡[BW]平均增質量（g

[BHDG12，W15Q1，W15。3W]對照組（0 mg/kg20390±105738700±2348a18310±1838a

[BHDW]推薦劑量組（300 mg/kg20010±102737330±2152a17320±1581a

3倍推薦劑量組（900 mg/kg19300±153636200±2722b16900±1612a

5倍推薦劑量組（1 500 mg/kg20060±166734150±3363c1409±1954b[HJ][BGF]

注：同列數據后不同小寫字母表示差異顯著（P<005。下表同。[F]

[FL（22]與對照組相比，推薦劑量組和3倍推薦劑量組的料肉比變化不明顯，但5倍推薦劑量組料肉比增高，表明磺胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶溶液在使用劑量過高時會降低飼料的利用率，這與其對增質量的影響一致（表2。

[F（W7][HT6H][J]表2試驗結束時各組試驗雞的料肉比[HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W14，W5。3W]組別消耗飼料量（g增質量（g料肉比

[BHDG12，W14Q0，W5。3W]對照組（0 mg/kg4 16081 831227

[BHDW]推薦劑量組（300 mg/kg3 79091 732219

3倍推薦劑量組（900 mg/kg3 56501 690211

5倍推薦劑量組（1 500 mg/kg3 54661 409252[HJ][BG）F][F）]

23血液學參數

[JP2]由表3可見，隨著劑量增加，3倍推薦劑量組和5倍推薦劑量組的一些血液學指標顯示出增加或減少的趨勢。統計學分析結果表明，推薦劑量組的嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞數量較對照組有所增加（P<005；3倍推薦劑量組的嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞數量較對照組有所增加（P<005，單核[JP3]細胞數量有所減少（P<005；5倍推薦劑量組的嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細飽和單核細胞數量與對照組差異顯著（P<005。

24血液生化學參數

試驗結束時血液生化學檢測結果分別見表4。

25病理學檢查

試驗試驗結束后分別將每組雞撲殺，所有劑量組經肉眼觀察均未發現任何異常或可疑病變。對5倍推薦劑量組內的所有雞進行組織病理學切片，檢查結果表明，所有雞的肝、脾、肺和腎均未發現顯微病理學變化（圖1、圖2、圖3、圖4、圖5、圖6、圖7、圖8。

3結論與討論

本試驗所采集的數據包括體質量、健康狀況、食欲情況以[FL]

[F（W13][HT6H][J][WTH]表3試驗結束時各組試驗雞的血液學指標（n=10[WTB][HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W72。8W]組別紅細胞數量（萬個/μL血紅蛋白含量（g/L白細胞數量（萬個/μL淋巴細胞數量（萬個/μL異嗜性粒細胞數量（萬個/μL嗜酸性粒細胞數量（萬個/μL嗜堿性粒細胞數量（萬個/μL

[BHDG12，W72Q0，W72。7W]對照組23610±2141a8740±1197a3300±0330a0893±0100a2280±0230a0055±0007a0019±0002a

[BHDW]推薦劑量組23750±1060a8390±672a3410±0524a0920±0148a2370±0362a0065±0012b0022±0003c

3倍推薦劑量組22950±2232a8270±819a3400±0457a0940±0135a2350±0317a0066±0010c0022±0003c

5倍推薦劑組23730±2579a8320±791a3300±0283a0840±0097a2300±0211a0072±0006c0021±0002b

及血液學、臨床生化學等參數。推薦劑量組、3倍推薦劑量組的試驗雞健康狀況、食欲情況以及可能的毒性反應與對照組差異不顯著，部分血液學參數有不同程度的變化，但在正常范圍內；少數血液生化指標與對照組的差異可能和儀器分析有關。與對照組相比，推薦劑量和3倍推薦劑量組的增質量未受顯著影響，飼料利用率也未顯著改變。

5倍推薦劑量組在用藥3 d后個別雞出現輕度臨床不耐受現象，主要表現為精神沉郁、采食量下降、羽毛蓬亂等現象。

[F（W12][TPSS11tif；S+3mm][F]

但試驗結束時這些不良反應明顯減少，表現出適應現象，且病理剖檢未見相關組織呈現明顯病理變化，但部分臨床血液學、生化參數指標，如嗜酸性粒細胞數量、嗜堿性粒細胞數量、葡萄糖含量、谷丙轉氨酶活性、Na含量和Cl含量等檢測指標與未用藥對照組之間差異顯著（P<005。

鑒于本試驗在較熱的季節進行，試驗期間雞的飲水量增加對藥物的不良反應和試驗結果可能會有一定的影響。

[CM（24]本試驗結果表明，南京中牧動物藥業有限公司生產的磺[CM）]

[F（W11][TPSS44tif][F]

[F（W12][TPSS33tif][F]

[F（W13][TPSS55tif][F]

胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶混懸液至少以3倍最大推薦劑量對雞連續給藥5 d，并未觀察到對雞有毒性作用和死亡現象發生，雞精神狀況良好，食欲和糞便正常。說明磺胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶混懸液至少以3倍最大推薦劑量對靶動物雞連續飲水給藥5 d是安全的。

綜合本次試驗結果，建議在使用磺胺氯吡嗪鈉、二甲氧芐啶混懸液飲水給藥時，連續用藥不得超過5 d，炎熱季節可適當降低混飲藥物的濃度。

[HS2][HT85H]參考文獻：[HT8SS]

[1][（#]李湘鳴 SPSS軟件應用指導：常用醫學生物統計[M] 南京：東南大學出版社，2000[）][HJ]

[F（W14][TPSS66tif][F]

[F（W14][TPSS77tif][F]

[F（W12][TPSS88tif][F]

[HT8][2][（#]王俊東，劉宗平 獸醫臨床診斷學[M] 北京：中國農業出版社，2004

[3]王捍東 獸醫臨床診斷學實習指導[M] 揚州：揚州大學農學院，1998

[4]陳杖榴 獸醫藥理學[M] 北京：中國農業出版社，2002：237-238

[5]中華人民共和國獸藥典委員會 獸藥使用指南：化學藥品卷[M] 北京：中國農業出版社，2006：146-147[HJ][FL]

[HT5”SS〗江蘇農業科學2014年第42卷第12期

[SQ5]

[HT6F][JP3]趙衛紅，於葉兵，王資生，等 不同脂肪源餌料對日本沼蝦抗氧化機能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影響[J] 江蘇農業科學，2014，42（12）：266-271

doi：1015889/jissn1002-13022014120endprint