血清降鈣素原檢測在血液細菌感染中的作用

1 資料與方法

1.1 一般資料本院收治疑似血液細菌感染患者268例，其中男158例，女110例;血培養(yǎng)陽性者(陽性組)155 例，平均年齡(60.46 ±14.97)歲;血培養(yǎng)陰性者(陰性組)113 例，平均年齡(56.50 ±16.67)歲;正常健康查體者(對照組)51例，平均年齡(57.23±10.22)歲;3組年齡差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。培養(yǎng)陽性組均為不同部位兩次或多次血培養(yǎng)陽性且為同一種細菌感染者，血培養(yǎng)陽性患者按菌種不同分為革蘭陰性桿菌組(91例)和革蘭陽性球菌組(64例)，根據(jù)出院診斷分為膿毒血癥組(63例)和非膿毒血癥組(92例)，培養(yǎng)陰性組為發(fā)熱患者最終排除血液細菌感染者。

1.2 方法

1.2.1 標本采集:在患者高熱寒戰(zhàn)時及抗生素治療前抽取靜脈血10 ml注入血培養(yǎng)瓶中立刻送檢，同時采集靜脈血2 ml于乙二胺四乙酸K2抗凝管進行WBC計數(shù)和NLR測定，采集2 ml靜脈血于干燥管，進行CRP測定，另外2 ml靜脈血于干燥管靜置1 h后3 000 r/min低溫離心10 min(離心半徑為17.5 cm)，提取血清后置－70℃冰箱保存，統(tǒng)一測定PCT。

1.2.2 主要試劑和儀器:所用主要試劑:全自動五分類細胞分析配套試劑購自希森美康生物科技(無錫)有限公司;血培養(yǎng)瓶、微生物鑒定卡片均購自法國梅里埃公司;PCT檢測試劑購自廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司;CRP檢測試劑購自日本關(guān)東化學株式會社。所用儀器:日本Sysemex XT-1800全自動五分類細胞分析儀;法國梅里埃公司Bace/Alert3D全自動血培養(yǎng)儀和VITEK-2 Compact微生物鑒定儀;廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司FS-112型免疫熒光檢測儀;日立7180全自動生化分析儀。

1.2.3 血培養(yǎng):放入血培養(yǎng)儀中的培養(yǎng)瓶陽性報警后轉(zhuǎn)種于血平板、中國蘭平板、巧克力平板，并進行涂片鏡檢，病原菌用VITEK-2 Compact鑒定。

1.2.4 PCT 測定:吸取 30 μl樣本加入緩沖液中，將樣本與緩沖液充分混勻1 min，吸取75 μl混勻后的樣本，滴加到測試卡的加樣孔中，在室溫下放置15 min，將測試卡插入免疫熒光檢測儀中的承載器中進行測試。

1.2.5 WBC和CRP檢測:嚴格按照操作規(guī)程進行，NLR通過血常規(guī)中性粒細胞與淋巴細胞計算得出。

1.3 統(tǒng)計學分析應用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件，正態(tài)分布的計量資料以±s表示，多均數(shù)間兩兩比較采用q檢驗;偏態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)(M)、四分位數(shù)間距(Q)表示，2組間比較采用Mann-Whitney U檢驗，多組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗，多組間兩兩比較采用Nemenyi檢驗;相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)陽性患者血清中PCT、CRP、WBC及NLR水平變化與對照組比較，血培養(yǎng)陽性和陰性患者血清中 PCT、CRP、WBC及 NLR均明顯升高(P＜0.01);與陰性組比較，血培養(yǎng)陽性患者血清中PCT和NLR明顯升高(P＜0.05或P＜0.01)，尤以PCT升高倍數(shù)最大，CRP和WBC雖也升高但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 血培養(yǎng)陽性患者PCT、CRP、WBC及NLR水平變化(以M和Q表示) ±s

注:與陰性組比較，*P ＜0.01，#P ＜0.05;與對照組比較，△P ＜0.01

組別 PCT(ng/ml)M Q CRP(mg/L)M Q WBC(×109/L)M Q NLR(%)M Q陽性組(n=155)6.31 22.63 123.1 150.6 11.9 9.5 15.27 22.27陰性組(n=113) 0.54 2.54 91.4 130.0 10.30 7.75 9.55 10.18對照組(n=51) 0.17 0.07 1.2 0.9 6.1 1.50 1.53 0.79 Z值118.825 85.637 36.973 72.855 P值0.000 0.000 0.000 0.000

2.2 陰性桿菌感染患者血清中 PCT、CRP、WBC及NLR水平變化與革蘭陽性球菌組比較，陰性桿菌組PCT和NLR明顯升高(P＜0.05)，CRP和WBC無明顯改變(P＞0.05)。見表2。

表2 陰性桿菌患者PCT、CRP、WBC及NLR水平變化(以M和Q表示)

2.3 膿毒血癥患者血清PCT、CRP、WBC及NLR水平變化與非膿毒血癥患者比較，膿毒血癥患者PCT、CRP、WBC升高且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，NLR雖升高但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表3。

表3 膿毒血癥患者PCT、CRP、WBC及NLR水平變化(以M和Q表示)

2.4 血培養(yǎng)陽性患者PCT、CRP、WBC及NLR指標間相關(guān)分析 PCT與CRP呈正相關(guān)(r=0.227，P＜0.05)，PCT 與 NLR 呈正相關(guān)(r=0.294，P＜0.01)，WBC 與 NLR 呈正相關(guān)(r=0.482，P＜0.01)，其他指標間無相關(guān)性。

3 討論

目前常用感染指標WBC和CRP均為非特異性，除細菌感染外，病毒感染、手術(shù)、排異反應等均可引起升高，而血培養(yǎng)雖然是檢測患者是否存在血液細菌感染的重要手段和明確診斷的金標準，但所需時間長、分離率低，因此，尋找一種快捷有效的診斷血液細菌感染的指標尤為重要。

PCT由甲狀腺C細胞分泌，正常情況下不釋放入周圍循環(huán)血中，在體內(nèi)很穩(wěn)定，但當人體合并細菌感染、膿毒癥時，患者血清中PCT可迅速升高［3］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血培養(yǎng)陽性組與陰性組、對照組比較，PCT、CRP、WBC及NLR均升高，其中PCT增高程度最大，可能在血液細菌感染時誘導全身各種組織大量釋放PCT，并可很快檢測到PCT水平升高，提示PCT在血液細菌感染方面可作為一個重要的感染指標。同時我們研究也發(fā)現(xiàn)，革蘭陰性桿菌感染患者PCT與NLR明顯高于革蘭陽性球菌感染者，明顯升高的PCT支持革蘭陰性桿菌感染的可能性更大，提示PCT在鑒別革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌感染中也具有參考價值，這與國內(nèi)外研究［4，5］一致，陰性桿菌與陽性球菌在PCT表達量的區(qū)別可能與細菌結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。此外，本研究結(jié)果還提示，與非膿毒血癥患者比較，膿毒血癥患者PCT增高的水平要遠超出其他指標，表明在血液細菌感染時各炎性因子對機體都發(fā)揮作用，但PCT的作用可能更大，而且PCT升高程度越高，細菌感染程度可能越重，提示膿毒血癥患者PCT水平升高程度與疾病的嚴重程度相關(guān)［6］。

值得注意的是，本研究中NLR在判別血液細菌感染以及鑒別革蘭陰性桿菌和陽性球菌感染中也具有一定的價值，是目前研究的新型指標，NLR在呼吸道感染疾病中具有早期預測價值［7］。NLR升高不僅是由于中性粒細胞升高，還可能是由于淋巴細胞的降低引起，淋巴細胞在機體的免疫機制中起十分重要的作用，因此，NLR變化不僅反映了機體的炎性反應水平，還表明了疾病與免疫紊亂的關(guān)系，對疾病治療及預后可能起到重要作用。血培養(yǎng)陽性組各指標相關(guān)結(jié)果顯示，PCT與CRP和NLR均呈正相關(guān)，提示PCT等炎癥指標的聯(lián)合檢測相比血培養(yǎng)具有早期、快速特點，對血液細菌感染的早期診斷可能價值更大。

1 Clover B.Governance.PCT non-executives to hold clusters‘to account’.Health Serv J，2011，121:4-5.

2 Chargui A，Zekri S，Jacquillet G，et al.Cadmium-induced autophagy in rat kidney:an early biomarker of subtoxic exposure.Toxicol Sci，2011，121:31-42.

3 Holub M，Rozsypal H，Chalupa P.Procalcitonin:a reliable maker for the diagnosis and monitoring of the course of bacterial infection.Klin Mikrobiol Infekc Lek，2008，14:201-208.

4 楊朵，張曼.重癥監(jiān)護病房細菌性血流感染監(jiān)測中C反應蛋白和降鈣素原的臨床意義.中國感染與化療雜志，2014，14:29-31.

5 陳國強，曹華英，姚正國，等.血清降鈣素原水平區(qū)分重癥監(jiān)護病房患者革蘭陽性菌與革蘭陰性菌感染的研究.中華醫(yī)院感染學雜志，2009，19:1944-1946.

6 李麗娟，陳煒，古旭云，等.血漿PCT和CRP水平的動態(tài)變化對膿毒癥嚴重程度的評估及其相關(guān)性研究.中國實驗診斷學，2013，17:1010-1013.

7 李斌，張周良，楊珍珍，等.中性粒細胞與淋巴細胞計數(shù)比值在呼吸道感染性疾病中的應用價值.中國血液流變學雜志，2012，22:522-524.