CK19、AAT、TPO、CD56及Galectin－3在甲狀腺乳頭狀癌的診斷及鑒別診斷中的意義

柳芳蕓

（寧夏石嘴山市第五人民醫院病理科 寧夏 石嘴山 753000）

甲狀腺乳頭狀癌是內分泌系統常見的惡性腫瘤，占甲狀腺癌的60%－70%。但在臨床工作中常遇到不典型病例，尤其是近年來穿刺技術的發展，往往收到的標本較小，而且濾泡亞型的乳頭狀癌不含有乳頭狀結構，單靠HE染色容易誤診。由于PTC 是一種低度惡性的腫瘤，經過合理有效的治療預后良好。因此探索它的免疫表型對PTC 的診斷與鑒別診斷具有比較重要的意義。我們聯合檢測CD56、TPO、CKl9、Galectin－3、AAT 的表達情況，旨在探討這組標志物在甲狀腺乳頭狀病變中的診斷與鑒別診斷的意義。因此，尋找有特異性診斷價值的指標對于區分甲狀腺良惡性病變非常重要。而單一的抗體往往不特異，抗體組合診斷甲狀腺乳頭狀癌有很大的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 標本：收集本院2011 年1 月至2015 年4月手術切除的PTC標本存檔蠟塊38 例（微小乳頭狀癌10例，經典型乳頭狀癌28例），男10例，女28 例，年齡16－72歲，中位年齡44歲。

1.2 檢測方法。試劑：CK19（克隆號：A53－B／A2.26）、AAT（多克隆）、Galectin－3（克隆號：9C4）、TPO（克隆號：AC25）和CD56（克隆號：56CO4）均為即用型，S－P 試劑盒及DAB 顯色液均購自福州邁新生物技術有限公司。全部組織經10% 中性緩沖福爾馬林固定，石蠟包埋，≤4μm 厚度切片，采用免疫組化EnVision法檢測，具體操作步驟均按照試劑盒說明書進行。

1.3 結果判定：CK19、AAT 和TPO 染色均以細胞漿出現的棕黃色顆粒為陽性標準，Galectin－3 染色以細胞質或細胞核出現的棕黃色顆粒為陽性標準，CD56 染色以細胞膜出現棕黃色顆粒為陽性標準。按照陽性細胞所占百分數并參考著色強度確定（圖1），陽性細胞數＜10% 為（－）＞10%為（＋）。

2 結果

2.1 形態學特征：典型的甲狀腺乳頭狀癌以其分枝狀的乳頭結構和特征性的毛玻璃樣細胞核形態，有核溝，核內假包涵體，核增大是最為突出的表現，卵圓形，長的和相互重疊的核，核輪廓不規則；核膜高度不規則，凹凸不平，伴切跡及不同大小和方向的內陷；另外40%－50%的乳頭狀癌中有砂粒體，但是往往有一些不典型形態表現的病例則需免疫組化染色鑒別診斷。

2.2 免疫標志的表達：在甲狀腺乳頭狀癌中，5種抗體表達陽性率如下（表1）：CKl9：94.7%（36／38）；Galectin－3：97.3%（37／38）；AAT：100%（38／38）；CD56：10.5%（4／38）；TPO：7.8%（3／38）。5 種 標 志 物單獨用于PTC的診斷時，CK19及Galectin－3的靈敏度和特異度最高，AAT陽性表達較弱，但均有＞10%的細胞質陽性表達。CK19，Galectin－3及AAT 同時陽性與CD56，TPO 同時陰性，是診斷PTC 的可靠組合。

表1 CKl9、Galectin－3、AAT，TPO 及CD56在甲狀腺乳頭狀癌的表達

圖1 CKl9、Galectin－3、AAT 及CD56在甲狀腺乳頭狀癌中的表達EnVision 10×10

3 討論

CK19（鼠抗人細胞角蛋白）在甲狀腺良惡性增生性病變中的診斷和鑒別診斷作用已有不少報道，Lsic－Dencic等在研究中發現CK19 在大部分PTC 病例中呈陽性表達其強陽性表達預示著腫瘤的浸潤潛能；因此CK19 在甲狀腺乳頭狀癌的診斷中具有較高的靈敏度。Galectin－3（鼠抗人Galectin－3）是一同型細胞粘附凝集素，在PTC 中的表達率最高，目前普遍認為Galectin－3是鑒別甲狀腺良惡性病變比較可靠的一線免疫組化標記物。CD56及TPO（鼠抗人甲狀腺過氧化物酶）在正常、炎性病變和良性腫瘤中的濾泡上皮均可見彌漫表達，目前很多文獻也報道其越來越多的應用于PTC的鑒別診斷中。本研究中CD56、TPO 在PTC是陰性標志物。AAT（兔抗人抗胰蛋白酶）是一種糖蛋白，在甲狀腺乳頭狀癌中陽性表達，而正常甲狀腺組織AAT 陰性表達。

總之，本研究數據進一步證實了CKl9、Galectin－3、AAT、CD56，TPO 聯合免疫組化染色對于PTC做出準確的診斷是十分重要的，對于那些非典型性病變這5種標志物的聯合應用有助于PTC的明確診斷。

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