新鮮全血在不同血液分析儀比對試驗中的應用

陳立松，周芹

(阜寧縣溝墩醫院檢驗科，江蘇 阜寧 224433)

血液分析儀廣泛運用在各級醫院的臨床檢驗中，伴隨著工作量的增加，同一實驗室同時使用不同品牌或同一品牌不同型號的血液分析儀的現象已很普遍。由于不同型號的血液分析儀因檢測方法和檢測原理不盡相同，對同一標本的測定結果必然存在著系統誤差[1]，所以關注檢驗結果的溯源性和可比性，提高血細胞分析系統的可比性非常重要[2]。我們自2008年以來試用新鮮抗凝全血在兩臺血液分析儀之間進行結果比對，經過幾年的改進和完善，現已形成了一套較為規范的科內血液分析儀比對操作程序，取得了較為滿意的臨床效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1 .1儀器與試劑 血液分析儀2臺，分別為Sysmex XS-800i(日本希森美康公司)和BC-5300(深圳邁瑞公司)。所用試劑均為儀器配套試劑。

1.1 .2校準品和質控物 儀器均使用各自配套的校準品和質控物。

1.1 .3比對物 EDTA-K2抗凝的新鮮全血。為了避免抗凝劑、溫度等各方面的影響[3，4]，每次所有標本的檢測均在2h內完成。

1.2 方法

1.2 .1比對前的儀器準備 為保證結果的準確性和重復性，要求室溫20～250C，濕度小于80%。試驗前每臺血液分析儀進行日保養，以去除管道中殘留的血液、吸附的蛋白纖維等，確保管路通暢和清潔，然后做空白計數和攜帶污染率測定，本底和攜帶污染率必須符合要求。

1.2 .2精密度測定 取新鮮抗凝全血2份，分別在兩臺儀器上重復檢測11次，計算第2~11次結果的白細胞、紅細胞、血紅蛋白、平均紅細胞體積和血小板的均值(x)、標準差(s)及變異系數(CV%)。

1.2 .3參比儀器的確定與校準 我們以多年參加室間質評且成績優秀的Sysmex XS-800i血液分析儀作為參比儀器，并用配套的校準品進行校準。

1.2 .4比對方法 取5份新鮮抗凝全血標本(低值1份，正常參考范圍內2份，較高1份，高值1份)，按照儀器的操作規程在試驗儀器和參比儀器上平行測定，每份標本測定兩次(順序1,2,3,4,5,5,4,3,2,1)，結果取兩次的均值，第二天以同樣的方式再測5份標本，計算10份標本在試驗儀器和參比儀器上各參數測定結果的平均相對偏差。相對偏差=(試驗儀器測定值-參比儀器測定值)/參比儀器測定值。

1.2 .5統計學處理 依據實驗結果求出回歸方程，分析試驗儀器和參比儀器的相關性。

1.2 .6評價標準 儀器精密度評價參照美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)實驗室改進修正案(CLIA’88)規定的室間質量評價標準允許誤差的1/4作為判定規則，即CV值滿足：WBC≤3.75%、RBC≤1.5%、Hb≤1.75%、MCV≤1.5%、PLT≤6.25%；儀器比對的相關系數參照ICSH和NCCLS制定的標準作為判定規則：r>0.95；不同血液分析儀之間各指標的評價依據CLIA，88規定的允許誤差的1/2作為判定規則：采用 WBC≤±7.5%、RBC≤±3.0%、Hb≤±3.5%、MCV≤±3.0%、PLT≤±12.5%。

1.2 .7試驗儀器的調整 如果試驗儀器和參比儀器參數的相關系數或平均相對偏差超過質量控制范圍，需要對試驗儀器進行校準。(1)采集同一健康人新鮮抗凝血2份，分別在參比儀器和試驗儀器上連續測定11次，計算2~11次各參數測定結果的均值，并以參比儀器的結果作為試驗儀器各參數的靶值。(2)調整系數=靶值/測定值×原系數。如果靶值/測定值大于1.1或小于0.9，需工程師進行儀器維護或維修。(3)系數調整后應重新做比對試驗，保證質量控制指標在允許范圍之內。

2 結果

2.1 兩臺儀器的精密度測定結果 見表1。

表1 儀器精密度測試的變異系數(CV%)

2.2 兩臺儀器相關性及平均相對偏差 見表2。

表2 實驗儀器與參比儀器相關性比較及平均相對偏差(%)

3 討論

血液分析儀比對結果的評價應包括儀器的日保養、空白計數、攜帶污染率、準確度和精密度、可測定范圍以及比對期間室內質量控制的監測等，在保證儀器運行正常的情況下,綜合評價各儀器質量控制指標，對質量指標超過控制范圍,應查找原因,必要時對儀器進行檢修或校準，特別是參比儀器應溯源至國際標準或使用溯源至國際標準的二級標準檢測系統[5]。從表1可以看出,在儀器的本底及攜帶污染率均符合要求的前提下，兩臺儀器測定的WBC、RBC、Hb、HCT和PLT的精密度均在CLIA’88規定的1/4允許誤差的可接受范圍內,最大CV值為BC-5300的PLT 3.48%,各儀器測定結果的重復性好，具備儀器比對的前提條件。從儀器角度分析XS-800i的精密度稍好于BC-5300。

實驗方面，我們采用不同水平的全血標本、連續兩天的均值作為靶值進行比對，增加試驗的客觀性。表2的結果顯示，本次比對(2013.09.21-22)試驗儀器的各項參數與參比儀器具有良好的相關性，r值均>0.98,各參數與參比儀器的平均相對偏差均在CLIA’88規定允許誤差的1/2范圍內，最高為PLT 3.60%。試驗儀器與參比儀器檢測結果的相對偏差在允許范圍內，各參數的系數無需調整。綜合以上結果還可以發現，血小板計數結果在兩臺儀器上的差異較大,這是由于血小板在自動化分析過程中可能受多種因素的影響所致。日本臨床實驗室標準化委員會 (JCCLS)規定不同血液分析儀血小板測定的最大誤差為10%,這也從另一側面說明不同血液分析儀在保證血小板測定結果的一致性具有一定難度。隨著新技術原理的血液分析儀相繼問世，此問題會有良好的解決辦法。

血液分析儀檢測結果的準確性直接影響患者疾病的診斷和療效監測，不同檢測系統對同一份標本的同一項目的檢測結果應具有溯源性和可比性[6]，而不同的血液分析儀不可避免的均存在系統誤差，因此，同一實驗室同時使用多臺血液分析儀，除了有完整的質量控制體系，還應定期用可溯源的血液檢測系統對其他儀器進行比對，保證不同檢測系統間結果的準確性和一致性[7]。新鮮抗凝全血為儀器間的比對提供了簡便可行的途徑，特別是小型實驗室更可以用周邊大型實驗室“定值”的新鮮抗凝全血校準或比對儀器，既方便又經濟，也有利于實現溯源標準的傳遞以及不同級別實驗室之間結果互認。

[1]彭文紅,蘭曉梅,王海,等.不同血細胞分析儀多水平比對試驗方案的建立和應用[J].軍醫進修學院學報,2010,31(12):1224-1226.

[2]胡綠蔭,楊冀,吳文娟.兩種血細胞分析系統檢測結果的可比性研究[J].現代檢驗醫學雜志,2011,26(5):115-118.

[3]肖木洲,鄭惠紅,梁淑慧,等.靜脈血標本靜置時間對血細胞分析儀測定結果的影響[J].實用醫學雜志,2006,22(15):1822-1823.

[4]陳黔,唐斌,沈毅,等.對BC-3000plus全自動血液分析儀測定結果的影響因素分析和對策[J].醫療衛生裝備,2010,31(11):111-112.

[5]彭明婷,申子瑜.血細胞分析溯源體系的建立及有關問題的探討[J].中華檢驗醫學雜志,2004,27(3):132-133.

[6]黃永富,曹興建.三個不同血細胞分析檢測系統間檢驗結果的偏差評估與比對性研究[J].現代檢驗醫學雜志,2012,27(6):86-94.

[7]武錦彪,陳曉玲,任春云,等.多臺血液分析儀檢測結果一致性比較[J].實驗與檢驗醫學,2013,31(1):27-30.