“瘦肉精”沙丁胺醇及其常用檢測方法

孫書剛 李建偉 張富剛 孫書濤 陳國信 河北省滄州市青縣農業局 062650

“瘦肉精”主要包括鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇和塞布特羅等，是屬于β 類興奮劑的苯乙胺類藥物。其中的沙丁胺醇屬于β2 類興奮劑。養殖戶喂飼沙丁胺醇后，可達到豬群生長速度提高、瘦肉率增加、屠宰后肉色鮮紅和脂肪層薄的目的，往往是皮貼著瘦肉，瘦肉豐滿，十分迎合大眾消費市場。近年來消費者由于誤食含有瘦肉精的豬肉而產生不良癥狀的事件屢有發生，甚至導致集體中毒。

1 沙丁胺醇的危害

沙丁胺醇具有很好的熱穩定性及生化穩定性，日常的烹飪很難致其穩定性改變從而失去活性。同時由于人體對沙丁胺醇吸收快、排泄慢，極易在體內產生蓄積。研究發現，沙丁胺醇最易蓄積于眼角膜中，經檢測，在毛發、肺、肝等部位也有沙丁胺醇的殘留[3]。食用含有沙丁胺醇的豬肉，對心臟和肝腎的毒性較大，同時會引發人體各種不良反應，例如肌肉震顫、心悸、頭痛、惡心和失眠等。有報道顯示，沙丁胺醇會誘發和加重糖尿病、心血管和腦血管病人的病情，嚴重威脅著人們的身體健康和生命安全。

2 沙丁胺醇常用檢測方法

（1）感官檢測。長期飼喂沙丁胺醇的生豬皮膚白里透紅、光潔、毛少，臀部結實上翹、勻稱呈紅亮狀。背部被驅打后易見傷痕且長久不消退。行走不靈活，易發生跛行，蹄部易受傷并發生感染[4]。一般健康豬肉呈淡紅色，肉質彈性好，不會有“滲血”現象。而飼喂沙丁胺醇比較嚴重的豬屠宰后，肉色異常鮮紅透亮，后臀肌肉飽滿，脂肪薄，肉皮緊貼著瘦肉，瘦肉纖維疏松。對屠宰后豬的感官識別，可以快速簡便地作出初步判定。

（2）法膠體金免疫層析法。法膠體金免疫層析法具有方便快捷、操作簡單、用時少且操作人員不需特殊培訓的特點，一般10～15 分鐘便可完成初步篩查得出結論。相對與其他檢測方法而言，其生產成本和檢測成本均較低[5]。但是，法膠體金免疫層析法只能作為樣品的初步篩查方法，僅用來判斷樣品是否可疑，不能準確定性是否含有沙丁胺醇。

（3）酶聯免疫吸附法。目前，在我國這種技術已經非常成熟，市場上有很多商品化的檢測試劑盒，只要按照試劑盒中的說明書即可完成檢測，操作簡單快捷，準確率較高。但是需要注意的是，在分子結構方面，沙丁胺醇和克倫特羅較為相似，因此克倫特羅抗體和沙丁胺醇反應具有一定的交叉性，這就會導致同一個樣品用沙丁胺醇試劑盒和克倫特羅試劑盒檢測，如果是陽性樣品就會顯示兩項都是陽性，不易區分此樣品含有哪一種瘦肉精。因此，酶聯免疫吸附法也常常用于大批量樣品的篩選工作，不能作為最后科學準確定性的依據，必須使用其他方法來進行確證。

（4）氣相色譜法。使用氣相色譜法（如高效氣相色譜法、氣相質譜聯用法等）來檢測動物組織和尿液中的沙丁胺醇含量，目前已經比較成熟，相應的國家標準也已經建立。在使用氣相質譜聯用法來檢測樣品中沙丁胺醇含量時，樣品通常要經過前處理、凈化、衍生化三步后才能置于氣相質譜聯用分析儀進行分析。樣品在進行前處理時，常常使用的是酶解法。不用水解的方法是由于水解法反應非常強烈，并且需要使用濃鹽酸或高氯酸，危險性比較大。與水解法相比較，酶解法的優點為較為溫和，但是反應的時間較長，常常為十幾個小時。凈化這一步使用的是固相萃取法，多數實驗人員選擇使用MCX 或SCX 固相萃取小柱。凈化過柱后，使用BSTFA 試劑來進行衍生化。需要注意的是，衍生化一定要防水，尤其值得注意的是空氣中的水分對衍生化的干擾較大，衍生完畢后，要置于氣相質譜聯用分析儀上進行測定[6]。氣質聯用檢測法檢測動物組織、尿液中沙丁胺醇時，具有低檢出限、高穩定性、高準確性、高靈敏度等優點，通過前處理和凈化兩步，很大程度上降低了樣品中雜質的干擾。但是該方法也有不足之處，例如氣相質譜聯用分析儀儀器設備昂貴，很難在基層普遍使用。另外，檢測操作方法比較復雜，對實驗室的要求較高，且檢測需要的時間較長，不適用于一線快速檢測。

（5）液相色譜法。使用液相色譜法（高效液相色譜法、超高效液相色譜法、液相質譜聯用法），不需要對樣品進行衍生化，并且樣品的處理方法較為簡單。秦永平等學者第一個建立了反相高效液相色譜-紫外法，用來檢測血漿中沙丁胺醇殘留的含量，該方法的最低檢測限為0.3ng／g，回收率一般為98%～109%，RSD＜8%。金雁等研究者通過高效液相色譜-二極管陣列檢測器來檢測動物組織中沙丁胺醇的含量。尚紅霞等學者改進此方法，利用大孔吸附樹脂進行固相萃取，很好地解決了萃取過程中的乳化難題。二級陣列管檢測器的使用，不僅提升檢測的準確性，還在很大程度上降低了成本，操作過程簡單，易于推廣。也有學者利用高效液相色譜-串聯質譜法來檢測豬肝高效液相色譜法、超高效液相色譜法、液相質譜聯用法中沙丁胺醇的殘留量，其結果為最低檢出限0.1ng／g，平均回收率為76.8%～82.8%，RSD 小于5.8%[7]。此方法具有高靈敏度和高準確性等優點。但是液相質譜儀儀器操作較為復雜，購買及維護價格非常昂貴，也不適用于基層一線檢測。超高效液相色譜優點很多，首先其能獲得更高的柱效，同時在更寬的線性范圍內也可以保持柱效恒定，檢測時間明顯縮短，試劑耗費顯著減少，在分析效率和靈敏度等方面也有很大提高。

3 展望

雖然沙丁胺醇殘留檢測的方法非常多，但是目前我國行業標準和國家標準中使用的方法為液相質譜聯用法和氣相質譜法，此兩種方法都能夠較準確地檢測沙丁胺醇的含量，但是樣品預處理過程都非常復雜且耗時較長。酶聯免疫法處理樣品預處理過程操作簡便，可同時檢測多個樣品，很大程度上縮短了分析時間，但是僅可以作為快速篩選手段，不能作為定性確證依據。因此，對液相質譜聯用法和氣相質譜法的進行簡化，對現有復雜、繁瑣、耗時長的樣品預處理方法的進行改進是非常必要的。這就需要我們監察工作者不斷探索新的方法，使得沙丁胺醇的檢測工作更加方便、快捷、準確，為老百姓食用放心肉提供可靠保障。

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