2011～2012年廣州地區兒童腹瀉病原菌分布及耐藥性分析＊

黃蓮芬，劉海英，謝永強，鐘華敏，周珍文

（廣州市婦女兒童醫療中心/廣州市兒童醫院檢驗科，廣東廣州 510120）

2011～2012年廣州地區兒童腹瀉病原菌分布及耐藥性分析＊

黃蓮芬，劉海英，謝永強，鐘華敏，周珍文

（廣州市婦女兒童醫療中心/廣州市兒童醫院檢驗科，廣東廣州 510120）

目的了解廣州地區兒童細菌性腹瀉主要病原菌分布及其耐藥性。方法對2011～2012年疑似細菌性腹瀉患兒大便標本進行細菌培養，分析病原菌分布特征及耐藥性。結果2011～2012年共檢出兒童腹瀉病原菌416株，其中沙門菌屬、致病性大腸埃希菌、空腸彎曲菌、白色念珠菌分別占53.61%、37.98%、5.29%、1.68%。主要病原菌對抗菌藥物的耐藥率分別為氨芐西林85.25%、復方磺胺甲噁唑54.28%、頭孢噻肟44.70%、頭孢曲松42.53%、氯霉素40.66%、頭孢他啶23.55%、氨曲南23.36%、環丙沙星14.88%、頭孢吡肟8.07%、頭孢哌酮/舒巴坦7.99%、哌拉西林/他唑巴坦7.42%、亞胺培南0.00%。結論廣州地區兒童腹瀉病原菌以沙門菌屬、致病性大腸埃希菌、空腸彎曲菌為主；敏感性排名前5位的抗菌藥物為亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢吡肟、環丙沙星。

腹瀉； 病原菌； 耐藥性； 兒童

腹瀉是由一組多病原、多因素引起的，以腹瀉、嘔吐為主要癥狀的胃腸道功能紊亂綜合征。在國內，腹瀉是小兒常見病，發病率僅次于呼吸道感染［1－2］。根據病因，腹瀉分為感染性與非感染性兩類；按病原學特點，又可分為病毒性、細菌性、寄生蟲性、真菌性。本研究分析了兒童大便細菌培養和藥敏實驗結果，旨在了解兒童細菌性腹瀉主要病原菌及其藥敏特征。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院兒童院區2011～2012年分離的腹瀉病原菌416株。

1.2 儀器與試劑 致病性大腸埃希菌診斷血清試劑盒、志賀菌診斷血清試劑盒、沙門菌分型血清試劑盒購自寧波天潤生物藥業有限公司；中國藍平板、麥康凱平板、SS平板、CV平板購自廣州市迪景微生物科技有限公司；MH平板、藥敏紙片購自英國Oxoid公司；空腸彎曲菌選擇培養基購自英國Oxoid公司，按說明書要求自行配置CCDA平板；轉運培養基采用Cary－Blair運送培養基；微需氧產氣袋、比濁儀和藥敏實驗用生理鹽水購自法國生物梅里埃公司。

1.2 方法

1.2.1 細菌培養和鑒定 對所有送檢大便標本按《全國臨床檢驗操作規程》進行腸道病原菌分離培養和鑒定［3］。大便采集至Cary－Blair運送培養基，在生物安全柜中接種至中國藍平板、麥康凱平板、SS平板和CCDA平板。CCDA平板置微需氧產氣袋中，42℃培養48～72 h，其他平板37℃培養過夜。根據平板上的菌落特征初步判斷是否為病原菌，再利用生化實驗鑒別到屬。采用大腸埃希菌、志賀菌、沙門菌分型血清進行致病性大腸埃希菌、志賀菌、沙門菌血清學分型。空腸彎曲菌采用42℃生長實驗及氧化酶實驗、觸酶實驗、生化反應鑒定。

1.2.2 藥敏實驗 分離獲得的致病性大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌按《全國臨床檢驗操作規程》進行藥敏實驗檢測，根據美國臨床和實驗室標準化協會（CLSI）M100－S20文件判斷藥敏實驗結果。空腸彎曲菌和真菌未做藥敏實驗。

2 結 果

2.1 病原菌病原學分布及血清學分型 416株小兒細菌性腹瀉病原菌病原學分布見表1，其中致病性大腸埃希菌和沙門菌屬血清型分布見表2～3。2株志賀菌血清學分型分別為宋內和福氏志賀菌。

2.2 病原菌病區分布 致病性大腸埃希菌158株，其中門診50株、病房108株。沙門菌屬223株，其中門診103株、病房120株。空腸彎曲菌22株，其中門診6株、病房16株。檢出白色念珠菌7株，其中門診1株、病房6株。金黃色葡萄球菌1株，分離自皮膚科門診患兒。嗜水氣單胞菌3株，1株來自急診科門診患兒，2株來自消化科住院患兒。志賀菌2株，分別來自急診科門診和危重綜合病區患兒。門診患兒主要來自內科、消化科、新生兒科及急診科門診，住院患兒主要來自消化科、感染區、危重綜合病區及急診留觀病區。重癥監護病房、內分泌科、呼吸科、腎內科、心臟內科分離到少數致病性大腸埃希菌、沙門菌、空腸彎曲菌、白色念珠菌。

2.3 常見病原菌藥敏實驗結果 小兒細菌性腹瀉常見致瀉菌包括致病性大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌，其藥敏實驗結果，見表4。

3 討 論

腹瀉是嬰幼兒常見病。據文獻報道，全世界每年至少有1.3億5歲以下兒童發生腹瀉，其中350萬患兒死亡［2］。小兒腹瀉發病年齡多在2歲以下，是導致小兒營養不良的主要原因，治療不及時或不恰當可導致患兒死亡。0～3歲嬰幼兒腹瀉的易感性因素:（1）胃腸道發育不夠成熟，酶活性較低，但營養需要相對較高，胃腸道負擔重；（2）免疫功能不完善；（3）未接受母乳喂養；（4）正常腸道菌群的建立與生理演替；（5）神經、內分泌、循環系統及肝、腎功能發育未成熟，調節功能較差。

本院腹瀉患兒多為5歲以下兒童，以2歲以內嬰幼兒為主。嬰幼兒腹瀉腸內感染的常見病原體包括輪狀病毒、產毒性大腸埃希菌、空腸彎曲桿菌、沙門菌屬、隱孢子蟲等。本研究結果顯示，廣州地區兒童腹瀉主要病原菌為沙門菌屬，其次是致病性大腸埃希菌和空腸彎曲菌、白色念珠菌等，志賀菌較少，條件病原菌（如白色念珠菌和金黃色葡萄球菌等）引起的腹瀉更為少見，病原菌構成與青島地區有差異［3］，可能與不同地區存在流行病原菌及治療用藥習慣不同有關。本院2011～2012年所有檢出腸道致瀉菌的患兒，大便多為黏液膿血便，少數已是遷延性腹瀉。416株腸道致瀉菌中，53.61%為沙門菌屬，37.98%為致病性大腸埃希菌，空腸彎曲菌約占5%，病原菌構成與肯尼亞十分類似［4］，而與西非、南亞等地區以志賀菌、產腸毒素性大腸埃希菌、隱孢子蟲、腸致病性大腸埃希菌為主有所不同［5］。與成人相比，小兒致病性大腸埃希菌性腹瀉的病情相對較重，病程也較長，主要分離的血清型由多到少依次為O125K70、O127aK63、O86K61、O44K74、O126K71、O128K67、O119K69、O114K90、O55K59等。沙門菌屬可致結腸炎，導致膿血腹瀉，鼠傷寒沙門氏菌幾乎占了所有沙門菌屬的70%，是廣州地區兒童細菌性腹瀉的重要病原菌。該血清型流行廣泛，傳染性強。鼠傷寒沙門氏菌所致腹瀉病情輕重不等，年齡越小，病情越重，并發癥越多，半數患兒病后排菌約2周，少數達2個月以上，多在6個月消失。在發展中國家，空腸彎曲菌腸炎以5歲以下兒童發病率最高，尤其是1歲以內的嬰幼兒，發病率隨年齡升高而下降，部分帶菌者無癥狀，但不斷排菌，排菌期長達6～7周，甚至15個月之久，臨床上應該注意隔離，及時切斷傳染源，避免交叉或二次感染。

3種常見腹瀉病原菌（致病性大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌）藥敏實驗結果顯示，其對氨芐西林的耐藥率最高，為85.25%，其次為復方磺胺甲惡唑（54.28%），頭孢類抗菌藥物，如頭孢噻肟、頭孢曲松和氯霉素耐藥率為40%～50%，頭孢他啶和氨曲南耐藥率為23%左右，耐藥率較低的藥物包括環丙沙星、頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦，未檢出亞胺培南耐藥菌株。由此可見，廣州地區兒童腹瀉常見病原菌的耐藥性較強，對各種抗菌藥物的耐藥率均高于2013年青島地區的報道［3］。因此，對于疑似細菌性腹瀉患兒，應及時進行大便細菌培養、病原菌分離和藥敏實驗，根據藥敏實驗結果合理用藥，減少多藥耐藥菌株的產生。

［1］左素君，胡艷軍.我院感染性腹瀉患兒病原菌及藥敏分析［J］.兒科藥學雜志，2008，14（3）:34－36.

［2］Woodward DL，Rodgers BFG.Surveillance of antimicrobial resistance in salmonella，shigella and vibrio cholerae in latin America and Caribbean:A collaborative project［J］.Can J Infect Dis，2000，11（4）:181－186.

［3］薛愛國，李愛燕，宋冬，等.嬰幼兒腹瀉病原菌分布特點和藥敏分析［J］.中國現代藥物應用，2014，8（7）:7－8.

［4］Swierczewski BE，Odundo EA，Koech MC，et al.Surveillance for enteric pathogens in a case－control study of acute diarrhea in Western Kenya［J］.Transac Royal Soci Trop Med Hygi，2013，107 （2）:83－90.

［5］Kotloff KL，Nataro JP，Blackwelder WiC，et al.Burden and aetiology of diarrhoeal disease in infants and young children in developing countries（the Global Enteric Multicenter Study，GEMS）:a prospective，case－control study［J］.Lancet，2013，382（9888）:209－222.

Composition and drug resistance of pathogenic bacteria causing infantile diarrhea in Guangzhou from 2011 to 2012＊

Huang Lianfen，Liu Haiying，Xie Yongqiang，Zhong Huamin，Zhou Zhenwen
（Laboratory Department，Guangzhou Children Hospital/Guangzhou Women and Children Medical Center，Guangzhou，Guangdong 510120，China）

ObjectiveTo explore the main pathogenic bacteria and antibiotic resistance patterns in children with bacterial diarrhea from Guangzhou region.MethodsRegular bacterial culture of stool samples from children with suspicious bacterial diarrhea was performed to isolate the pathogen during 2011 to 2012，followed by the analysis of its composition and serum type，ward distribution characteristics and drug resistance to 12 antimicrobacterial drugs.Results416 strains of pathogenic bacteria were isolated from diarrhea children during 2011－2012，in which salmonella，enteropathogenic E.coli，Campylobacter jejuni and Candida albicans isolates accounted for 53.61%，37.98%，5.29%and 1.68%respectively.Drug resistance rate of the main strains to 12 antimicrobial agents was 85.25%to ampicillin，54.28%to compound sulfamethoxazole，44.70%to cefotaxime，42.53%to ceftriaxone，40.66%to chloramphenicol，23.55%to ceftazidime，23.36%to aztreonam，14.88%to ciprofloxacin，8.07%to cefepime，7.99%to cefperazone/sulbactam，7.42%to piperacillin/tazobactam respectively，and no resistance to imipenem was detected.ConclusionThe pathogenic bacteria causing diarrhea mainly includes salmonella，pathogenic e.coli，campylobacter jejuni in children from guangzhou region，the top five sensitive antimicrobial reagents for the main strains includes imipenem，piperacillin/tazobactam，cefperazone/sulbactam，cefepime and ciprofloxacin.

diarrhea； pathogenic bacteria； drug resistance； infant

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.013

A

1673－4130（2015）10－1351－03

2015－03－02）

廣東省廣州市衛生局基金課題（2013A011040022，201102A213044）。 作者簡介:黃蓮芬，女，主管技師，主要從事臨床微生物檢驗研究。