祛痰化瘀方藥對心血管疾病中內皮細胞保護作用的研究評述

陳冰 胡鏡清 馬雅鑾 杜松 柏冬 陶旭光

心血管疾病在中國發病率逐年上升，其發生發展過程與內皮細胞(endothelial cells，EC)功能密切相關［1］。血管內皮細胞功能失調不僅被認為是冠狀動脈粥樣硬化起始環節，而且與冠心病、高血壓發生、發展相關。中醫辨證分型發現，痰瘀互結證是心血管疾病的主要證型之一。痰瘀互結是心血管疾病的重要病機，祛痰、活血治法已經成為心血管疾病的常用治法。本文就祛痰化瘀方藥對內皮細胞的保護作用簡述如下。

1 血管內皮細胞功能及與痰瘀證的相關性

EC 為血管最內層的連續細胞結構，具有以下作用:屏障功能，血管調節功能，凝血功能，分泌內皮源性細胞生長因子功能，代謝功能，免疫功能。

近年來有學者對痰瘀相關證與EC 功能相關性做了大量研究。袁肇凱等［2］對冠心病心血瘀阻證組112 例、冠心病非心血瘀阻證組108 例、非冠心病心血瘀阻證組110 例和健康人對照組100 名檢測分析血管EC 產生的一氧化氮(nitric oxide，NO)、內皮素(endothelin，ET)、血管緊張素(angiotensin，Ang)Ⅱ、可溶性細胞間黏附分子(soluble intercellular adhesion molecule，sⅠCAM)-1 和可溶性血管細胞黏附分子(soluble vascular cell adhesion molecule，sVCAM)-1 等血管活性物質。結果發現，ET、AngⅡ、sⅠCAM-1 和sVCAM-1 的異常程度均呈心血瘀阻證組＞非血瘀證組＞健康人對照組的趨勢;而心血瘀阻證組和非冠心病心血瘀阻證組之間差異無顯著性。由此得出結論:血管內皮細胞分泌的ET、AngⅡ、sⅠCAM-1 和sVCAM-1 等血管活性物質可能是冠心病“血瘀”病理重要標志物。

王師菡等［3］將96 例冠心病血瘀證患者辨證進行血管內皮因子的測定，同時采用血瘀證積分評定血瘀證程度，采用Gensini 評分系統評價冠脈造影的結果。結果發現，患者血清血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、ET-1 水平隨血瘀證積分及Gensini 積分增高而增高，由此判斷，冠脈Gensini 積分與血管內皮因子及血瘀證積分相關。朱明軍等［4］對100 例經冠狀動脈造影診斷為冠心病心絞痛患者參照一定的標準進行證候要素提取，并測定患者血清白介素(interleukinⅠL，ⅠL)-6、ET-1 水平，作相關性分析。結果發現，證型分布以本虛標實證居多，證候分布中氣虛、痰濁、血瘀三型所占比例較大，關系為血瘀＞痰濁＞氣虛;實證較虛實夾雜證ⅠL-6 水平明顯升高;夾痰夾瘀證較夾痰證和夾瘀證ET-1 水平明顯升高。由此認為，冠心病心絞痛中醫證型以本虛標實證居多，冠心病心絞痛的基本證候是血瘀、痰濁、氣虛;ⅠL-6、ET-1 與中醫證型分布具有相關性，兩者均能作為辨證的客觀參考依據。上述研究說明，內皮功能與痰瘀證候密切相關。

2 祛痰化瘀方藥對內皮細胞的保護作用

近年來，在對高脂血癥與動脈粥樣硬化、高血壓、冠心病等心血管疾病的治療中，有大量學者從祛痰化瘀方藥對EC 功能保護作用方面進行了研究。

2.1 高脂血癥與動脈粥樣硬化

韓學杰等［5-7］采用高脂飼料制造家兔動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)模型，給予痰瘀同治方(全瓜蔞30 g、薤白10 g、水蛭5 g 等)進行治療，觀察主動脈變化。之后觀察高脂血清損傷EC 后痰瘀同治方的保護作用。結果發現，痰瘀同治方可顯著調節AS 家兔血漿NO 含量，防止血管痙攣和血小板的聚集，可顯著降低AS 家兔血漿ET;電鏡及熒光顯微鏡觀察發現，給藥組動物主動脈EC 變化基本趨向正常組。提示痰瘀同治方可減輕血管內膜脂斑形成，對血管內皮損傷有明顯的保護作用。宋劍南等［8-13］采用高脂血癥大鼠模型，發現祛痰化瘀方藥(半夏、陳皮、川芎、水蛭等)可顯著抑制高脂組大鼠主動脈EC 通透性的增加，明顯升高高脂狀態下主動脈血管壁NO 合酶(nitricoxide synthase，NOS)活性及其mRNA 表達，降低ET mRNA 表達，保持血漿6 酮前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin1α，6-keto-FGF1α)的正常水平及6-keto-FGF1α/血栓素B2(thromboxane B-2，TXB2)平衡，具有保護EC 功能的作用;進一步研究發現健脾祛痰化瘀方(瀝水調脂膠囊:半夏、陳皮、茯苓、甘草、水蛭、川芎、竹瀝)含藥血清可抑制氧化型低密度脂蛋白引起的EC 胞質Ca2+濃度升高，降低細胞凋亡率，使G0-G1 期細胞明顯減少，S 期細胞增多;可抑制P 選擇素的表達，上調Bcl-2蛋白水平，下調P53 和Caspase-3 蛋白表達水平。提示健脾祛痰化瘀方可能通過上述途徑進而抑制EC凋亡、減輕血管炎性反應和血栓形成，達到阻止AS發生的作用。

黎鵬程等［13］觀察舒心穩斑顆粒(血竭、虎杖、瓜蔞殼、明礬等)對兔AS 斑塊中VEGF 表達的影響，發現舒心穩斑顆粒能明顯降低VEGF 在主動脈粥樣斑塊中的面密度。從而認為舒心穩斑顆粒通過抑制VEGF 在AS 斑塊中的表達達到抑制AS 斑塊形成的作用。楊自生［14-15］等觀察痰瘀通膠囊含藥血清對EC 增殖及內皮型NOS(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)蛋白及環氧合酶-2(cyclo-oxygenase，COX-2)蛋白表達的影響。結果發現痰瘀通膠囊含藥血清能促進EC 增殖，上調eNOS 的蛋白表達水平，抑制損傷的EC 活性的下降，下調COX-2 的蛋白表達。由此認為痰瘀通膠囊通過上調eNOS 的蛋白表達水平，下調COX-2 的蛋白表達，從而促進EC增殖、抑制炎癥反應，達到抗動脈粥樣硬化和防治高脂血癥的作用。

劉建勛等［16-19］發現痰瘀同治方(人參、丹參、黃連、川芎等)能夠明顯減輕小型豬AS 斑塊負荷，抑制管腔狹窄，減少炎細胞侵潤，降低血清高敏C 反應蛋白(high sensitivity C reactive protein，hs-CRP)，腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF)-α 和ⅠL-6 等炎癥細胞因子水平并抑制冠脈核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)p65 核移位。痰瘀同治方含藥血清可使EC 活力顯著升高，細胞上清中NO 含量明顯提高，可下調NF-κB p65 mRNA 和蛋白表達，降低ⅠCAM-1 mRNA 和蛋白表達，上調eNOS mRNA 及其蛋白表達。認為痰瘀同治方具有明顯抑制冠狀動脈粥樣斑塊發展、降低動脈血管斑塊負荷和管腔狹窄等作用，具有多靶點AS 的效應。

2.2 高血壓

盧焯明等［20］發現調肝腎、祛痰瘀中藥(熟地黃25 g、龜甲30 g、丹參15 g、三七5 g、鉤藤15 g、瓜蔞12 g)作用于SHR 大鼠后，大鼠血漿NO 水平顯著高于空白組，全程給藥組ET/NO 比值顯著低于空白組，三個中藥組的血壓上升趨勢均隨周齡增長而明顯減緩。從而認為調肝腎、祛痰瘀治法能提高NO水平，改善內皮分泌舒縮因子的功能，在一定程度上延緩SHR 9 ～12 周齡的高血壓發展。歐奇偉等［21］應用化痰通絡中藥(法半夏15 g、陳皮15 g、茯苓10 g、白術10 g、丹參10 g、益母草15 g、澤蘭10 g、川牛膝10 g、天麻10 g、鉤藤10 g、夏枯草10 g、炙甘草5 g)治療痰瘀互結型高血壓病患者，結果發現治療后患者血清VEGF 水平均較治療前明顯下降，且不良反應發生例數少。認為化痰通絡中藥可降低血清VEGF 水平，在一定程度上改善血管內皮功能。葉穗林等［22］探討加味溫膽湯(半夏，竹茹，陳皮，茯苓，澤瀉，甘草，生姜，加味:丹參，枳實)對痰瘀證高血壓病患者內皮功能障礙的影響。結果發現治療組患者ET、血管性血友病因子(von willebrand factor，vWF)比治療前下降，NO 比治療前升高，血管內皮舒張功能指標有改善。認為加味溫膽湯有一定的血管內皮保護作用。趙永華等［23］觀察頤年降壓飲(雙鉤藤20 g、石決明25 g、醋龜板20 g、法半夏10 g、廣陳皮8 g、炒枳殼12 g、懷牛膝25 g、益母草15 g、桑寄生20 g、制首烏20 g)對南粵地區早期原發性高血壓患者血管內皮功能的影響。結果發現治療后患者血漿ET-1、vWF 明顯降低，由此得出結論:頤年降壓飲的作用機制與保護血管內皮功能，進而改善動脈彈性有關。

2.3 冠心病

薛亞軍等［24］發現復方蔞薤合劑(瓜蔞24 g、薤白12 g、丹參15 g、水蛭0.3 g、玉竹10 g、澤瀉10 g、五味子6 g、麥冬9 g、杜仲10 g)可降低冠心病穩定型心絞痛患者血管ET-1 的水平，認為復方蔞薤合劑具有恢復內皮功能，拮抗動脈粥樣硬化的作用。劉莉等［25］發現，在常規治療基礎上聯用瓜蔞皮注射液能明顯改善穩定型心絞痛痰瘀互結證患者NO 及ET-1 水平。朱偉等［26］觀察應用痰瘀同治方藥后心肌缺血大鼠血清中NO 水平，以及血漿中TXB2與6-Keto-PGF1α 的變化情況。結果發現，與化痰法、活血化瘀法相比，痰瘀同治法能顯著增強心肌缺血大鼠的NO 活性，改善PGⅠ2/TXA2的失衡狀態。認為痰瘀同治法抗急性心肌缺血的作用機制可能與其增強NO 活性，抑制血漿TXA2釋放，糾正PGⅠ2/TXA2失衡，從而促進缺血心肌功能恢復，緩解冠脈痙攣有密切關系。李軍等［27］在常規治療基礎上加用穩心湯治療痰瘀阻絡型不穩定型心絞痛患者，發現穩心湯可明顯降低患者ⅠL-6、ⅠL-8 水平。李鵬等［28-29］發現心痛寧加味方(全瓜蔞、薤白、當歸、丹參、紅花、川芎、厚樸、桔梗、新塔花、阿里紅)能顯著降低冠心病痰瘀互結證患者血漿ET 含量，提高血漿NO 含量水平，調節二者平衡。動物實驗結果表明，心痛寧加味方能有效抑制急性心肌缺血大鼠血清ET 分泌，促進NO 的合成和釋放。提示其抗心肌缺血作用機理可能與調節內源性血管活性物質NO、ET 平衡，保護血管內皮損傷有關。

3 結語

內皮細胞損傷是高脂血癥與動脈粥樣硬化、高血壓及冠心病等常見心血管疾病的共同基礎，內皮損傷會導致脂質代謝紊亂、分泌NO、TNF-α、NF-κB等炎性物質，參與炎癥反應。脂質代謝紊亂是痰濁的物質基礎，NO 等炎性因子與血瘀密切相關，因此，內皮損傷與心血管疾病痰瘀互結證密切相關。

對上述祛痰化瘀方藥配伍組成與內皮細胞功能對應關系研究發現，藥物作用主要集中在影響內皮細胞增殖、凋亡，以及調節內皮細胞分泌活性物質如NO、ET、VEGF、白介素等方面。其中，全瓜蔞在方藥中應用最多，有較多證據證明其對NO、ET 有調節作用，也有研究發現其對ET/NO、NOS、VEGF、COX-2 及內皮細胞增殖有影響;次之為薤白，除對ET 有調節作用，也發現其對NO、ET/NO、VEGF、vWF 有影響;再次為半夏、陳皮、川芎、水蛭、竹瀝等，對Ca2+、細胞凋亡率、Bcl-2、P53、Caspase-3 等有調節作用;人參、丹參、黃連等對細胞增殖、hs-CRP、TNF-α、ⅠL-6、NF-κB、ⅠCAM-1 等有影響，這些可能是祛痰化瘀方藥通過調節內皮細胞功能治療心血管疾病的有效機制之一。

心血管疾病的發病機制較為復雜，還涉及到平滑肌細胞增殖、巨噬細胞泡沫化、以及二者與內皮細胞相互作用等因素，目前祛痰化瘀方藥在心血管疾病中作用的研究主要集中于內皮細胞的損傷方面，對內皮細胞、平滑肌細胞、巨噬細胞三者相互作用的研究較少。開展祛痰化瘀方藥對多種病理機制之間關系影響的研究可能是今后心血管疾病痰瘀互結證的重要研究方向之一。

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