兒科臨床分離腸球菌的耐藥性監測及大環內酯類耐藥機制研究

楊豐

(新蔡縣人民醫院 檢驗科 河南 新蔡 463500)

腸球菌為條件致病菌，可引起泌尿系感染、心內膜炎、腹腔感染、傷口感染等嚴重感染［1］。隨著抗菌藥物及免疫抑制劑應用的日益廣泛，腸球菌感染率、耐藥性不斷增強，已成為醫院感染的主要致病菌［2］。為監測兒科臨床分離腸球菌的耐藥性，并初步探討腸球菌對大環內酯類耐藥機制，現收集新蔡縣人民醫院兒科2011 年12 月至2012 年12 月收治的120 例腸球菌感染患兒的臨床資料，結合文獻報道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 收集2011 年12 月至2012 年12 月兒科收治的120 例腸球菌感染患兒的臨床資料，從120 例送檢標本中分離出糞、屎腸球菌，經VITEK 全自動生物分析系統、ATB 自動細菌鑒定儀進行細菌鑒定后確診為腸球菌。送檢標本包括尿液(51 例，42.5%)、糞便(32 例，26.7%)、血液(20 例，16.7%)、膿液(11 例，9.2%)、痰(6 例，5.0%)。

1．2 檢驗方法 抗菌藥敏感性試驗采用Kirby －Baner(KB)法［3］。對120 株腸球菌進行氨芐青霉素、紅霉素、環丙沙星藥物敏感試驗。MH 培養基及藥敏紙片購自博文生物醫藥公司，質控菌株ATCC2012929 由北京天壇藥品生物制品鑒定所提供。根據KB 法藥敏試驗結果，將對紅霉素有耐藥性的菌株定義為觀察組，非耐藥性菌株為對照組，對兩組菌株采用PCR 方法檢測ermB 基因，引物為5’－ GAAAAGGTACTCAACAAAATA －3’。PCR 產物大小為639 bp。50 μg 反應體系中，DNA 模板液5 μl，KCl 濃度50 mmol/L、(NH4)2SO440 mmol/L、Tris － HCl 50 mmol/L、MgCl222.5 mmol/L。94 ℃預變性5 min 后，94 ℃變性30 s，50 ℃退火30 s，72 ℃延伸1.5 min，35 個循環后72 ℃再延伸3 min。擴增產物瓊脂糖凝膠電泳，溴化乙錠染色成像。

1．3 統計學方法 采用SPSS 17.0 統計學軟件進行數據處理分析，定性資料的組間比較采用χ2檢驗，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 耐藥性統計 患兒腸球菌對氨芐青霉素、紅霉素、環丙沙星的耐藥性分別為21.7%(26/120)、65.8%(79/120)、33.3%(40/120)，經兩兩比較差異均具有統計學意義(P ＜0.05)。

2．2 ermB 基因檢測結果 對紅霉素耐藥的79 株腸球菌(觀察組)中ermB 基因陽性株57 株，陽性率72.2%，非紅霉素耐藥菌41 株(對照組)中ermB 基因陽性1 株，陽性率2.4%，組間比較差異具有統計學意義(P ＜0.05)。

3 討論

調查顯示，由腸球菌引起的院內感染已位居第2 位，占所有院內感染病因的12%［4］。由于腸球菌本身具備固有耐藥和獲得性耐藥特征，使其對多種抗菌藥物具有耐藥性，給臨床治療腸菌感染帶來了一定的困難，因此，長期進行腸球菌耐藥性監測，分析耐藥變化特點十分必要。

本次統計發現，腸球菌對紅霉素的耐藥性最高，遠高于氨芐青霉素、環丙沙星，與國內相關報道接近。查閱相關文獻示，不同地區腸球菌的耐藥性也有差異［5］。經過PCR 檢測ermB基因示，對紅霉素耐藥的79 例菌株中有57 株ermB 基因陽性，而非耐藥的41 株菌株中有1 株ermB 基因陽性，組間比較差異具有統計學意義(P ＜0.05)。ermB 基因是球菌耐藥性的常見耐藥基因，其編碼的23 Sr RNA 甲基化酶致靶位改變從而發揮出耐藥性［6］。由結果分析，耐藥性與非耐藥性腸球菌的ermB基因陽性率差異具有統計學意義，腸球菌對大環內酯類耐藥性可能與ermB 有關。

綜上所述，兒科病房患者腸球菌對紅霉素的耐藥性明顯高于氨芐青霉素及環丙沙星，耐藥菌株中ermB 基因的陽性率較高，可能是導致腸球菌對紅霉素耐藥的機制之一。

［1］汪玲．兒科臨床分離腸球菌的耐藥性監測及大環內酯類耐藥機制研究［J］．中華檢驗醫學雜志，2008，12(9):984 －988．

［2］吳慶．腸球菌臨床感染特點及耐藥機制研究［J］． 河南醫學研究，2010，14(17):133 －137．

［3］劉祥琴．2011 年四川省人民醫院分離致病菌的分布特點和耐藥分析［J］．實用醫院臨床雜志，2012，15(6):3345 －3346．

［4］喬俊英．2008 年我院兒科病房病原菌檢測及耐藥性分析［J］． 中國婦幼保健，2011，12(22):545 －548．

［5］余素飛．肺炎鏈球菌對大環內酯類的耐藥機制研究［J］．中華醫院感染學雜志，2012，19(6):1222 －1223．

［6］姚杰．臨床分離腸球菌的耐藥性分析及相關耐藥機制的研究［J］．安徽醫科大學，2011，14(5):112 －113．